副主任医师
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血红蛋白电泳
状态：就诊前
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我院现在停止该项目检查，建议到省妇幼做。
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疾病名称：5个月发现胼胝体缺失引产一次自然流产2次&&
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遗传性疾病的基因诊断及产前诊断与遗传咨询。单基因遗传病（如多囊肾、血友病、视网膜色素变性、地中海贫血...
杨季云，男，副研究员，硕士研究生导师。1996年毕业于第三军医大学，医学学士学位。2002年毕业于第三军医大...
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【关键词】 血红蛋白& 电泳& 临床意义
【中图分类号】R443+.8&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 【文献标识码】A&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 【文章编号】（4-01
&&&&&&& 血红蛋白电泳可以将血红蛋白中各正常成分或异常成分分离，以便进一步鉴定或定量测定。用等电聚焦毛细管电泳(CIEF)和区带电泳(CZE)可分离出十几种Hb变异链，有作者采用CZE法对正常人和地中海贫血患者血液样品在pH 11.8碱性磷酸盐缓冲液(PBs)中进行分离，分离的速度很快(&8分钟)，两者的电泳图谱明显不同[1]。对胎儿红细胞处理后，分离其血红蛋白，可分离出&、&和&几种球蛋白链，如采用低pH 3.2的缓冲液，虽然分析时间延长，但变异体的分辨效果更佳。显然CE技术对鉴别诊断血红蛋白病起重要作用。
&&&&&&& 1 材料与方法
&&&&&&& 1.1 检测对象& 收集2011年1月～2012年12月受检300例均为门诊进行婚前检查或前前检查人员。其中男60例，女240例，年龄22～35岁，平均为29岁。
&&&&&&& 1.2 方法& 电泳槽中的阳极注入& pH9.1的Tris缓冲溶液，阴极注入 pH8.6的巴比妥缓冲溶液，要求两极液面尽量成同一水平。把醋酸纤维素薄膜裁成4cm&12cm大小，浸入薄膜浸泡液中10min左右，取出，用滤纸吸去多余浸泡液，把薄膜粗面朝上，贴在电泳槽支架上，用两层纱布搭桥，不接通电源，自由平衡5min。用血红蛋白吸管吸取2～3&浓度为1 80～100g/L的血红蛋白溶液，放在盖玻片边缘(盖玻片长约1cm)，把血红蛋白液用盖玻片印在醋酸纤维素薄膜靠阴极一端约1.5cm处(薄膜下衬一片干燥滤纸，吸去多余的血红蛋白液)，同时用正常人血红蛋白液作对照。接通电源，平衡5min，电压调至150V，电流量约为0.2mA/cm簿膜宽，电泳15～20min。电泳完毕后，取下薄膜条，置于氨基黑10B染色液里染色10min，取出，用漂洗液漂洗，换液数次，直至薄膜条洁白为止。
&&&&&&& 2 结果
&&&&&&& 在pH 8.6或pH 8.8电泳时，正常人的血红蛋白A及血红蛋白A2都向正极方向泳动，血红蛋白A在前，血红蛋白A2在后。但血红蛋白F与血红蛋白A的位置很靠近，难以准确地分离和定量，可作1min碱变性试验，来测定血红蛋白F。300例血红蛋白电泳结果中检验异常96例，HbA2的平均值为2.3%；范围在1.1%～3.2%之间。HbA2增高是&-轻型地中海贫血的一个重要特征。缺铁性贫血及其他血红蛋白合成障碍性疾病。
&&&&&&& 3 讨论
&&&&&&& 异常血红蛋白分子的结构改变使其等电点发生变化，在电泳时其泳动速度与正常血红蛋白不同。一般用以检出各种异常血红蛋白的主要电泳方法是在pH 8.6或pH 8.8条件下进行，有时需要用pH 7.0、6.8、6.5或6.25的条件作进一步的鉴别。作为电泳支持物可采用层析滤纸、醋酸纤维素薄膜、淀粉胶、淀粉板或琼脂胶，不同支持物的电泳各有其特点，可根据需要选择。
&&&&&&& 在pH 8.6或pH 8.8碱性缓冲液中电泳时，各种血红蛋白都向阳极泳动，按其泳速可大致分为6组。血红蛋白E：血红蛋白E泳速与血红蛋白A2相等。在患者的血红蛋白中血红蛋白E的含量超过20％。虽然血红蛋白C的泳速与血红蛋白A2很接近，在此电泳中不能分离，但可进一步作pH 6.25琼脂电泳加以区别，这时血红蛋白E与血红蛋白A2电泳位置相同，而与血红蛋白C分离。血红蛋白S在碱性条件下，电泳速度与异常血红蛋白S相同或接近的异常血红蛋白有血红蛋白D、血红蛋白G以及某些不稳定血红蛋白(如Z&rich等)，但它们的镰变试验阴性及还原血红蛋白溶解度正常，而血红蛋白S的镰变试验阳性及还原血红蛋白溶解度降低，可加以区别[2]。血红蛋白G的泳速较血红蛋白D快。不稳定血红蛋白可进行热不稳定试验加以确诊。测定血红蛋白F是诊断重型和中间型地中海贫血的重要依据。淀粉板电泳可以分清血红蛋白F与血红蛋白A两条区带，定量测定结果与抗碱血红蛋白测定结果相似。血红蛋白H：进行电泳时，可以出现一条快速的异常血红蛋白区带，在pH 6.5淀粉胶电泳中该区带仍向阳极移动，结合H包涵体阳性，可以确诊为血红蛋白H病。血红蛋白H的等电点是pH 5.6。在pH 6.5或 pH 6.8的条件下，血红蛋白H向正极泳动，而其他血红蛋白则向负极泳动，这对进一步鉴定血红蛋白H有特定意义。血红蛋白M经转变为氰化高铁血红蛋白M后，在pH6.8条件下可与血红蛋白A分开。利用pH 6.8电泳，还可以分离血红蛋白E与血红蛋白A2及过筛不稳定血红蛋白。在pH 8.6条件下，有几种异常血红蛋白的泳速相同或接近[3]。在pH 6.25时，可进一步区分。例如，将血红蛋白S与血红蛋白D及血红蛋白G分开；将血红蛋白C与血红蛋白O、血红蛋白E及血红蛋白A2分开；又可将血红蛋白O与血红蛋白C、血红蛋白E及血红蛋白A2分开。
[1]秦文斌.红细胞外血红蛋白A与血红蛋白A2之间的相互作用[J].生物化学杂志，):583
[2]叶应妩.全国临床检验操作规程[M].第2版.南京:东南大学出版社,.
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关于地贫筛查
我做了血常规和血红蛋白电泳，从血常规看医生说可能是地贫携带，让我老公一同检查，我老公检查了血常规和血红蛋白电泳没有问题，请问我老公还用做基因检查吗？
我也是被怀疑携带，老公以前做过血常规，正常的，医生就直接建议我做基因筛查，结果是静止型，就不需要进一步查了，宝贝最多也就是携带而已。
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不正常&死胎
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Hb Barts 是α地贫的典型表现， 从其较少的比例， 及
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HbA2刚刚大于3.5%，高度怀疑B-轻型地中海贫血，如血象也显示轻微小细胞低色素性贫血而且排除缺铁，基本上可以肯定是了。如血象比较模糊，建议基因检测，因为个巨
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基本信息：女&&30岁
发病时间：不清楚
病情描述及疑问：请问血红蛋白电泳这个结果能确诊是β地贫吗？有没有可能弄错？我看网上很多都是血红蛋白A2升高才有β地贫的可能，但我这个是低于正常值啊。这个异常血红蛋白hbj是什么？医科大的医生只匆匆看了我的报告单，就叫我老公也去做血红蛋白电泳和α基因检测，结果三个星期后出，我觉得非常疑惑。我的β的地贫基因检测还要不要做呢？血红蛋白电泳正常值又该是多少
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建议：一般B地贫会出现HBA2升高，你的结果正常。 但是从血红蛋白电泳看，您有HBj，这是一种异常血红蛋白。 B地贫基因应该做一下，基因检查更可靠地排除B地贫 ，正常是血红蛋白A95％，血红蛋白A21.6％－3.5％，血红蛋白F0.2％－2.0％，HbA2增高是轻型β―海洋性贫血最重要的诊断依据，可以参考一下化验单的正常值。
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建议：（1）微量血红蛋白电电泳：血红蛋白中的各组分由于其分子表面所带电荷性质与数量不同而等电点各异。在不同pH的电场中，因其所带电荷差异而泳动速度不同。由此可将血红蛋白的各组份分开。异常血红蛋白分子如果有电荷的改变，则会在正常电泳图形的其他部位出现异常区带，以达到分离鉴定的目的。在电泳法中，因所用支持物不同，有纸上电泳、琼脂电泳、淀粉胶电泳、淀粉板电泳、醋酸纤维素膜电泳等。所用的电泳缓冲液有pH8.6或8.9的巴比妥缓冲液，pH9.1、9.0、8.9及8.5的TEB缓冲液。pH16.8和7.0的磷酸缓冲液等。目前临床实验室首选的是醋酸纤维素膜碱性电泳。该方法操作简易、电泳时间短，分辨率高，常用于异常血红蛋白的筛选。必要时再用pH6.5或pH6～6.2缓冲液的酸性电泳进一步进行异常血红蛋白的鉴别。（2）异常肽链鉴定（尿素解离法）：将巯基乙醇与尿素加入血红蛋白溶液后，可使血红蛋白分子中二硫键还原，空间结构被破坏，珠蛋白被裂解为肽链亚单位。不同肽链的等电点不同，迁移率各异，可用电泳将肽链分开。异常血红蛋白的异常肽链也可用此法分开，并根据其位置判断属何种异常。
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