ROS对巨噬细胞MAPK／NF-κB相关信号通路的调控作用初探--《中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要》2006年
ROS对巨噬细胞MAPK／NF-κB相关信号通路的调控作用初探
【摘要】：正单核-巨噬细胞是一类在免疫调节中发挥重要作用的免疫细胞。活化的巨噬细胞可产生大量的ROS, 生理或病理条件下,由巨噬细胞产生的ROS而形成的氧化压力对巨噬细胞本身乃至整个机体的免疫功能可产生重要影响。ROS作为信号分子,可对细胞信号转导网络发挥重要的调控功能,但其具体的作用机制并
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【分类号】：R392【正文快照】：
单核一巨噬细胞是一类在免疫调节中发挥重要作用的免疫细胞。活化的巨噬细胞可产生大量的ROS， 生理或病理条件下，由巨噬细胞产生的ROS而形成的氧化压力对巨噬细胞本身乃至整个机体的免疫功能可 产生重要影响。ROS作为信号分子，可对细胞信号转导网络发挥重要的调控功能，但
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优质期刊推荐选择性抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路调节巨噬细胞自体吞噬稳定动脉粥样硬化易损斑块的研究--《山东大学》2014年硕士论文
选择性抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路调节巨噬细胞自体吞噬稳定动脉粥样硬化易损斑块的研究
【摘要】：背景
心血管疾病正逐步成为世界范围内死亡的主要原因,其中以动脉粥样硬化为基础的病理过程占了绝大多数。动脉粥样硬化主要是由于脂质堆积、巨噬细胞和T淋巴细胞浸润逐渐形成脂质斑块。许多生物标记物在此过程中扮演重要角色。低密度脂蛋白及其他促炎细胞因子至关重要。另一方面,自体吞噬(来自希腊语,意为“自食”)是一种进化中高度保守的具有调节细胞分解代谢以及维持稳态能力的生命进程,可以阻碍动脉粥样硬化病理过程早期泡沫细胞的形成。我们的实验表明有许多信号分子可以招募促炎细胞因子,导致动脉粥样硬化疾病进展。某些药物可以通过抑制影响自体吞噬的信号通路来抑制巨噬细胞转化为泡沫细胞,进而阻止斑块形成,为动脉粥样硬化硬化的防治指明了新的方向。
从体外和体内实验两方面验证选择性抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路能否通过激活巨噬细胞的自体吞噬降低炎症反应并增强斑块的稳定性。
在体外实验中,分离家兔腹腔原代巨噬细胞,分别用PI3K抑制剂LYμmol/L)、Akt抑制剂曲西立滨(20μnmol/L)、mTOR抑制剂雷帕霉素(10nmol/L)、 mTOR-siRNA(30nmol/L)以及PBS作为空白对照与巨噬细胞共培养24小时,用酶联免疫吸附法(ELASA)检测巨噬细胞分泌的IL-10和IFN-y的表达水平,透射电镜观察自噬小体形成情况,蛋白印记法(Western blot)检测Akt、 mTOR、 P-Akt/P-mTOR和自噬相关蛋白Beclin1和Atg5-Atg12连接体的表达水平,激光共聚焦显微镜观察自噬相关蛋白LC3Ⅱ荧光亮点的数量。体内实验中,用球囊损伤和高脂喂养的方法建立动脉粥样硬化斑块实验兔的模型,然后随机分为4组,分别给予Akt抑制剂曲西立滨(口服,1.Omg/kg/d, n=10)、 mTOR抑制剂雷帕霉素(口服,0.5mg/kg/d,n=10)、 mTOR-siRNA(3μg/μL, PBS稀释为500μg/2mL,每周一次腹腔注射,n=10)以及PBS作为空白对照(口服,1.0ml/kg/d, n=10)。干预8周后,用血管内超声(IVUS)观察腹主动脉斑块形成情况,计算管腔面积、外弹力膜面积、斑块面积和斑块负荷,鲁塞尔蝰蛇毒加组胺注射进行药物触发,观察斑块破裂情况。病理学方法检测斑块脂质面积、胶原面积以及巨噬细胞、α-平滑肌细胞和mTCR、 MMP9和Atg5-Atg12连接体的表达。
体外实验中,相比对照组,LY294002处理组自噬小体形成减少,曲西立滨、雷帕霉素和mTOR-siRNA组形成增多。LY294002组自噬相关蛋白Beclin1和Atg5-Atg12连接体表达减少,其他三组表达增多；P-mTOR在四个实验组中表达都减少,P-Akt在雷帕霉素组和mTOR-siRNA组表达增多,在LY294002组和曲西立滨组表达增多；总mTOR和Akt没有变化。相比于对照组,LY294002组IL-10表达量明显增加而曲西立滨、雷帕霉素和mTOR-siRNA组IL-10表达量显著减少；相反,IFN-y表达水平在LY294002组下降而其他组上升。在体内实验中,与对照组相比,曲西立滨、雷帕霉素和mTOR-siRNA组斑块面积和斑块负荷显著减少,同时斑块破裂率降低；巨噬细胞RAM-11和mTOR染色面积明显减少而平滑肌细胞不受影响,同时MMP9表达减少而Atg5-Atg12连接体阳性表达率极大增高。
选择性抑制Akt/mTOR信号通路可以促进巨噬细胞自体吞噬,减少炎症反应,稳定动脉粥样硬化易损斑块。
【关键词】：
【学位授予单位】：山东大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：R543.5【目录】：
中文摘要6-8ABSTRACT8-11符号说明11-13前言13-16实验材料16-20实验方法20-29实验结果29-32讨论32-39结论39-40附图表40-47参考文献47-53致谢53-54发表论文54-55学位论文评阅及答辩情况表55
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巨细胞病毒单核细胞增多症
【摘要】：正 巨细胞病毒单核细胞增多症(Cytomegalovirus mononucleosis)是由巨细胞病毒(CMV)引起的一种单核细胞增多样综合征。本病临床表现与EB病毒(EBV)诱发的传染性单核细胞增多症(IM)很相似,健康成人、儿童及接受输血、器官移植者均可发生。自1965年Klemola首次报道以来,引起人们日益重视。本文拟就有关研究情况作一扼要综述。发病率和感染方式近年来,流行病学和实验研究已证明单核细胞增多样综合征可由多种传染性病原体感染引起,其中90%病例为EBV所致,5～7%为CMV,其次为弓形体、风疹病毒、腺病毒、肝炎病毒等。据统计,IM与本病住院病人比例为13.6∶1。本病在人群中散在发生,以成年人病例
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【正文快照】：
巨细胞病毒单核细胞增多症(Cytome-gazovirus mononueleosis)是由巨细胞病毒(C Mv)引起的一种单核细胞增多样综合征。本病临床表现与EB病毒(EBv)诱发的传染性单核细胞增多症(IM)很相似,健康成人、儿童及接受输血、器官移植者均可发生。自一965年Klemola〔1〕首次报道以来,引
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