血液rna提取试剂盒4度保存了15天还能提RNA吗?

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主营产品:血液4度保温柜
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血液4度保温柜。
我公司生产血液4度保温柜,已畅销国内外十余年,如果您对血液4度保温柜感兴趣,欢迎您致电24小时销售热线咨询了解血液4度保温柜价格、厂家、型号、图片。
24小时免费咨询热线:010-&&联系人:王亚飞&&QQ&&。
&&本血液4度保温柜属智能新型多功能恒温箱,温度宽泛在2-48度之间,可任意设定需要的数值,温差±1℃,特别适合医疗、卫生、防疫、食品化工、军工、科研等部门使用。专注于恒温领域多年,专业打造恒温冷藏设备,现已服务于358家企业和286家医疗结构,成为国内恒温领域优质品牌。
血液4度保温柜特点:
&&&&&&1·智能恒温系统:LED数码显示屏,温控范围2~48℃,可任意调控恒温,温度调控的精度为1℃,并且温差能够控制在±1-2℃。
&&&&&&2·人性简洁设计:透明玻璃门立式结构,双层透明玻璃门,可实时观测箱内保存物品状态。
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&配备双锁,安全系数增高,底部有脚轮,可轻松移动箱体。
&&&&&&3·多功能内嵌式:可任意直接嵌入壁橱以及墙壁,应用广泛,比如手术室,实验室建设,不占用多余空间。
&&&&&&4·双料报警系统:本产品采用双报警系统--灯光闪烁报警,蜂鸣声音报警。
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&可实现高低温报警、传感器故障报警、开门报警、电源故障报警、制冷系统故障报警。
&&&&&&5·优质板材结构:先进防腐化喷涂工艺,表面色泽柔和,内部预设搁架卡槽,可任意分配箱内空间,便于放置不同的物品。
&&&&&&6·性能稳定精确:核心采用国外进口高效全封闭压缩机,环保无氟,绿色节能,超静音设计,风循环系统,制冷加温迅速而又均匀。
血液4度保温柜优势:
&&&&&&福意联血液4度保温柜现已服务于358家企业和286家医疗结构,成为国内恒温领域优质品牌,企业秉承以诚立人,以德敬人。优质的售后服务以及丰富的产品,畅销国内10余年。
&&&&&&1·故障率低:采用国外进口高效全封闭压缩机,可连续长时间无故障工作,已到达世界先进水平。
&&&&&&2·售后服务:完善的售后服务体系为您保驾护航,第一时间响应客户并解决问题。
&&&&&&3·应用广泛:本产品采用制冷加温系统,可加温可制冷,并达到精确的恒温效果。
&&&&&&4·操作简单:简单傻瓜式的操作设计使用户一目了然,很快的投入使用。
血液4度保温柜详细参数:
产品名称:血液4度保温柜FYL-YS-150L
额定电压:220V
额定频率:50Hz
额定输入功率:100W
噪音(声功计):42dBvAw
箱体尺寸:(W*D*H):595×570×865mm
制冷剂用量:R600a(55g)
有效容积:150L
气候类型:N,SN
温控范围:2-48℃
温差范围:±2℃
型号:血液4度保温柜FYL-YS-230L
有效容积:230L
气候类型:N,SN
额定电压:220V
额定频率:50Hz
额定输入功率:160W
额定输入电流:0.8A
噪音(声功计):44dBvAw
制冷剂用量:R600a(43g)
温控范围:2-8℃,2-48℃
箱体尺寸:595×590×1215mm
产品名称:血液4度保温柜FYL-YS-280L
额定电压:220V
额定频率:50Hz
额定输入功率:160W
噪音(声功计):44dBvAw
箱体尺寸:(W*D*H):595×570×1445mm
制冷剂用量:R600a(55g)
有效容积:280L
气候类型:N,SN
温控范围:2-48℃
温差范围:±2℃
型号:血液4度保温柜FYL-YS-310L
有效容积:310L
气候类型:N,SN
额定电压:220V
额定频率:50Hz
额定输入功率:160W
额定输入电流:0.8A
噪音(声功计):44dBvAw
制冷剂用量:R600a(43g)
温控范围:2-8℃,2-48℃
箱体尺寸:595×695×1315mm
产品名称:血液4度保温柜FYL-YS-430L
额定电压:220V
额定频率:50Hz
额定输入功率:160W
噪音(声功计):44dBvAw
箱体尺寸:(W*D*H):&595×680×1805mm
制冷剂用量:R600a(55g)
有效容积:430L
气候类型:N,SN
温控范围:2-48℃
温差范围:±2℃
血液4度保温柜备注:
1.&箱体内部具备照明设施,方便夜间观察储存的物品;
2.&翅片式蒸发器,制冷迅速;
3.&门体带有门锁,保证存放物品安全,符合现各大单位需求和国家规定。
4.&此血液4度保温柜为带有报警冷藏箱,具有自动化霜功能,适合高温高湿地区,外门防凝露技术的应用,85%湿度无凝露;
血液4度保温柜。
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产品名称:血液4度保温柜
产品类别:&&
产品价格:面议/台
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型号规格:血液4度保温柜
产品包装:普通/精装
血液4度保温柜。我公司生产血液4度保温柜,已畅销国内外十余年,如果您对血液4度保温柜感兴趣,欢迎您致电24小时销售热线咨询了解血液4度保温柜价格、厂家、型号、图片。24小时免费咨询热线:010-
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王亚飞(先生)&&营销部/经理
联系地址:中国???菜户营东街甲88号(邮编:100054)
发布者IP:221.223.*.*(北京)
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求助RNA4度能放多久
大家们好,我用trizol法提完RNA后,放在了四度,不知道能放多久,会不会影响Rt,用DEPC水融的。谢谢了,似乎网上的讨论也不多
谢谢了 太谢谢了~~:D
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即送15丁当
【求助】提取出的RNA放4度冰箱1周了还能用于反转录PCR吗?
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问题已关闭悬赏丁当:2
如题,谢谢大神指点!还有我的PCR产物跑胶是700BP,当时设计引物也是按照P出来是700BP设计的,但是测序公司测出来是360BP,问他们,说是就这么短,360bp处已经出现结束信号了。怎么办???求大神指点啊
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你是跑胶后胶回收的嘛?
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宁静的跳跳糖 你是跑胶后胶回收的嘛?我取了5微升跑了胶,可是我没有纯化,把剩下的45微升给公司测序的
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PCR扩增失败的原因有很多,目标片段700bp但是只P出来300多bp(模板降解可能性较大吧)RNA提取放置一周了,可能就降解了呢,引物设计也很重要,还有扩增使用的特异性(使用特异性较高的酶)
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不是的,我跑胶检测了是700bp,RNA刚提取出来就反转录了PCR了,没有放置1周。
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话说你跑胶验证过了,应该没问题啊,而且估计你的浓度也不低,不是测序信号弱的原因。目前只想到的方法,就是再让公司测一遍自己先比对一下那测到的300bp是不是你的目的基因中的一段。我感觉啊,p出来的片段还是不太稳定的,末端没有保护,有被降解或者剪切掉的可能。测序公司用的引物也可能有问题……你要不然再纤细查一下测序这个方面可能出现的问题吧。换家公司,或者重新p,重新测,让他们换引物。
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模板没有降解,要不就是扩增之后降解吧(难道被酶切掉了?)跑胶是700bp首先要确认无误,要不就是测序公司的问题(但是人家是靠这个赚钱的,出问题可能性较小吧)
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关于丁香园关注今日:7 | 主题:299268
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即送15丁当
关于血液(实验需要提取DNA)保存多久及方法问题,急急急!
页码直达:
这个帖子发布于12年零89天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位大侠、专家:
我已经收集临床标本(血液)3个月了,但还没有收集够预定样本量,血液保存一直在EDTA抗凝真空玻璃管里,4℃冰箱环境下。
我实验需要提取DNA,PCR扩增目的基因的片断。我想再过2个月就可以收集完毕,再开始进入实验室。
不知道我如此保存血样的方法如何?请指教,越详细越好!
不胜感激!
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借楼主的地方问一下我也是收集血样,但是要提取RNA,请问能否如楼主一样的保存,最多多长时间?今天请教过,建议抽血后立刻提,RNA太易被酶降解,请问只能如此吗?谢谢
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我也有个问题:
EDTA抗凝管中的临床血液标本,如果以后可能要提蛋白或者RNA,怎样处理比较好呢?
我们用来提DNA的标本是冻存在-80度的。
听说如果分离淋巴细胞后加保护液,放在液氮中可以保存很长时间,提蛋白没有问题,是不是这样呢?提RNA会不会有问题呢?
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我的一点经验:我也是从血液中提取DNA的,用的是快速酚氯仿提取法;我的血液在4℃保存了3个月,抽提时已经溶血,血液发黑,但还是提出来了,不过浓度很低(12.5ng/ml-25ng/ml),比新鲜血液差得很远;所以我觉得越快提越好,最好的是新鲜血液;有师兄说如果要保存应该在-20℃保存(冻干血),提取时再自然溶解即可。RNA和蛋白我没有提去过,不过我觉得蛋白应该没问题,因为我提取过程中除蛋白一步出现了大量的蛋白(比新鲜血多);RNA我估计不行,因为
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(无意中发出了,继续)RNA很娇贵,那样发黑的血,能提出来?怀疑。不过你可以试一试,好运!
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一般放-20℃可以保存相当长的时间,因为DNA很稳定。如果要提RNA,则建议现抽的血马上提。
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再请教大家个问题:
快速酚氯仿提取法抽提血液中DNA 后,如何长期保存?谢谢!
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gongrui大侠:
-20℃确切吗?
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对楼主的问题,我回答如下:我们实验室的DNA提取采用高渗盐法,临床血标本抗凝采集后,都是加三蒸水于冰上两小时,破碎红细胞,离心,再用三蒸水洗两次,直到白细胞沉淀为粉白色为止,然后可以在-20度保存一年以上(冰箱可不能断电哦:)),提的DNA都没问题。至于酚:氯仿,仅在血液一不小心凝固时采用(毕竟有毒吗:()。
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新鲜血液放在-20度冰冻会破坏细胞
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提取DNA的血液要一般4度可以保存一段时间(三个月应该可以),不过如果长期保存还是要4度.提RNA要求立即提取.如果要保存,要先把细胞分离出来,加入保护剂(如甘油,二甲桠枫)放入-70度冻存应该可以放上几个月的.
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to popla :据我所知,如果血样提出以后加入ACD抗凝剂,放在四度比较合适,负二十度不适合保存新鲜血样(我们做过实验),血样一旦提出,应尽早提取DNA,我们这边,一般是拿到血样以后,用酚-氯仿法的前几步,到用蛋白酶K消化的步骤后,可保存三天左右,再积存一些样本共同继续后续步骤,一般提出的DNA没有问题,但如你所说,等两个月怎么样我不清楚,血样来之不易,及时提取比较好,DNA提取步骤不复杂,试剂要求新鲜配制。提出DNA后,用TE液融解,如果常用,放在4度,DNA稳定,一般没问题,如果间隔时间比较长,放-20度,需要时溶解,一般一年没有问题。在刚提取完后可进行分装,可较好保存样本。
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doctormb大侠:
我打算尽快将所收集血样进行DNA提取,你提供的高渗盐法,请发来详细步骤,我试一试。麻烦了,谢谢!E-mail:
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我也要用血提DNA, 2ML能提多少DNA
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还有,请问谁可以提供酚-氯仿法,请发至:谢谢!
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还有,请问谁可以提供酚-氯仿法,请发至:谢谢!
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分别采集外周静脉血5ml,2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)抗凝待用。采用酚氯仿提取法提取外周血白细胞基因组。(1)取外周抗凝血(全血)200ul于Ep管中,加PBS 1ml混匀 5000rpm离心5min (2)弃上清,加溶液1 1ml+12ul NP40,反复颠倒混匀放置5分钟5000rpm5分钟去上清.(3)400ul溶液2混匀后放置5分钟,酚400ul震荡,10000rpm 5min (4)取上请加酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)400ul,震荡,10000rpm离心10min。 (5)取上层液350ul,加入另一新Ep管中,加2倍体积预冷无水乙醇,混匀室温放置5min,静置后的反应体系10000rpm离心10min,使沉淀紧贴Ep管壁。(6)弃上清,加70%乙醇1ml(不振动),10000rpm离心10min。(7)弃乙醇,敞开Ep管盖, 烘干(37℃恒温箱)后,加1xTE溶液30ul,溶解DNA>12h以上,制成的DNA液-20℃冰箱保存备用。溶液1:10mmol/ltris.cl(ph=7.6)
10mmol/lkcl
10mmol/lmgcl2溶液2:10mmol/ltris.cl(ph=7.6)
10mmol/lkcl
10mmol/lmgcl2
2mmol/lEDTA
0.5mmol/lnacl
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zhl068 edited on
从外周血提出DNA来自白细胞,我们实验室在从血液中提取基因组主要用卢圣栋编的分子生物学实验指南中的“真核生物染色质DNA 提取”,这种方法要求血液量在600ul以上,先裂解红细胞,沉淀白细胞,后再提DNA,但如果血样保存不当,就看不到白细胞沉淀,当然就提不到DNA。这种方法提取的DNA量大,PCR效果不错。我用的是ACD抗凝剂。
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血液提取RNA和DNA可以一起提取。血液提取RNA时,要保证血液的新鲜度,也就是说越新鲜越好,我们一般采用1)ACD抗凝,采血5ml,混匀。2)取400ul全血,-20度保存,以备将来做其他实验。3)用 10ml
1% 草酸胺溶解红细胞,室温放置5min,2500转离心5min,反复几次至将沉淀洗至发白。4)加1ml Trizol 混匀,-20度保存,待标本收集完后一起提取。5)提取RAN时不要将吸取水相后物质丢弃,可以参照Trizol说明书提取DNA。
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请大侠提供高渗盐法提取血液DNA的具体操作步骤,谢了!
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nyfeng752003 doctormb大侠:
我打算尽快将所收集血样进行DNA提取,你提供的高渗盐法,请发来详细步骤,我试一试。麻烦了,谢谢!E-mail: 对不起,这两天忙得没顾上进园子看看:(“高渗盐法提取血基因组DNA.PDF”已发到您的邮箱(),请查收。另请注意,其中的 Lysis buffer 可以用三蒸水替代。祝您顺利!
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谢了,doctormb大侠!请斑竹加分。
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有那么多样本,提取失误了就太可惜了,为什么不用试剂盒呢!
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你保存的血液能提到DNA就不错了,赶快放到-80冰箱中。全血放置或吸出白细胞放置均可,提DNA第一步是不需要洗红细胞,直接加k消化。
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酚-氯仿法可以参考分子克隆第二版,466页,可以不用蛋白酶K消化,前两次用酚抽提,最后一次用酚-氯仿。但是离心速度8000rpm比较合适,5000g蛋白无法完全分离。
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吹烟 edited on
你好,我最近也在做DNA提取,用的是饱和盐法,呵呵,刚做,还没出来,不知和高渗盐法是不是同一种方法,想看一下相关步骤,不知能否帮忙?我的邮箱:
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借楼主的地盘,请问请能发给我一份高盐法提DNA的方法。不胜感 激。
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请问血清、血浆、WBC中DNA的提取protocal下面这个可以吗血清、血浆提取DNA步骤1.融化血样。2.分装 每管300ul+450ulDNA提取液,每管加5ulRNA酶(20ug/ml)。3. 37度温浴1小时,加蛋白酶K5ul(20mg/ml),振荡过夜。4.加等体积酚,混匀,4度,离心12000转/分,15’。5. 加酚:氯仿(1:1)等体积,充分混匀,离心12000转/分,15’。6.加氯仿,等体积,混匀,离心12000转/分,15’。7.将上层水相转移至一离心管中,加2倍体积无水乙醇+1/10体积10m醋酸铵。8.-20度静置。9.4度离心,12000转/分,15’。10.弃上清,75%乙醇洗,空气干燥,+TE液 过夜问题:1WBC是不是应加上一部细胞裂解的步骤。许多书上的方法不尽相同,但大同小异。直接冻存液检测不加磷酸盐缓冲液是否可行。2我这方法未用异戊醇能否可行。
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请问能不能发一份从外周血提取RNA的详细点的PROTOCOL啊,我的邮箱:
zmfhello@webmail..
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个人经验:我们课题组一直在提DNA,用的BIOMA的试剂盒,去年提了3000个新鲜血样。今年是提得血细胞的,2008年的血样,当时是把上清去掉只留血细胞保存的,一直负80度保存,现在能提出来DNA,但是效果没全血好,跑电泳有条带,但有些拖带。DNA总量大概130*600ng。建议采血后负80度保存,我们现在另一个项目的血标本在医院采回来后负80度保存,就是留着提DNA得。
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:你好想问一下,您这个“建议采血后负80度保存”是指不离心,不分离血清,只是-80度冻存全血吗?
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:你好想问一下,您这个“建议采血后负80度保存”是指不离心,不分离血清,只是-80度冻存全血吗?我直接用EDTA抗凝管采血后,轻轻摇匀,不离心,不分离血清,直接放入-86度冰箱,现在一年了提出来还可以,经典酚氯仿跟天根试剂盒都用过。
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大家好,新手弱弱的问一句,新鲜血冰冻保存,是直接用采血管保存还是用eppendorf管?
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:你好,在请教您一个低级的问题,呵呵,最近我们要用***溶液型DNA提取试剂盒提取DNA,最后那个DNA溶解液溶解的DNA如果我要冻在-80的冰箱里,能冻多长时间?如果想长期保存,我需要怎么做比较好?溶解在TE溶液中吗?具体怎么操作。
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royalgala 我直接用EDTA抗凝管采血后,轻轻摇匀,不离心,不分离血清,直接放入-86度冰箱,现在一年了提出来还可以,经典酚氯仿跟天根试剂盒都用过。:不好意思,看错了,我就是想请教一下,我最近想提取一批DNA,最后试剂盒内那个DNA溶解液溶解的DNA能直接放进-80的冰箱内吗?我想长期保存DNA,不知道您是怎么做的,我查的是用TE溶液。请指教一下
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