油烟含粉尘螨滴剂有用吗屋尘螨吗?过敏性咳嗽

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如何确认自己是过敏性咳嗽
最近咳嗽了一个多月,一直不见好,无炎症,一直百思不得其解,突发奇想自己有没有可能是过敏性的咳嗽,因为最近部门有做过一批涂料聚酯的试验,
很久以前我就感觉似乎这个试验过后我都会咳嗽一段时间,如果真是如此,我特想知道到底是什么物质导致了我的过敏。
由于这个项目不是我的项目,所以我无法提供使用的原料到底是什么,所以可否请各位帮我判断下,大概有几种物质比较容易引起过敏,谢谢!
行业分类:化学试剂类
回答时间: 09:54:21
你的情况首先需要排除因细菌或病毒引起的咳嗽,然后考虑涂料聚酯原因。也需要注意两者的兼有。
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回答时间: 09:39:03
过敏性咳嗽是发生在呼吸系统的一种过敏性疾病,正常人的咳嗽是人体的一种保护性呼吸反射动作,而过敏性咳嗽则是因过敏体质接触到过敏源后,呼吸道粘膜的感受器反复遭到刺激,条件反射似的将这种刺激传入神经纤维,再传到延髓咳嗽中枢,引起的咳嗽。
过敏性咳嗽的症状特点
持续或反复发作一般都会超过 1 个月以上,有些患者只表现在夜间,尤其是后半夜咳嗽,或清晨咳嗽、运动后咳嗽,临床无感染征象,查体无明显阳性体征。如果患者还经常出现不伴发热的“感冒”症状,如打喷嚏、流鼻涕、鼻痒、眼痒等,尤其在婴幼儿期有湿疹等个人过敏史者,更应该注意有无过敏性咳嗽的存在。同任何过敏性疾病一样,过敏性咳嗽还有个最大的特点就是会随着气候的变化、环境的变化、生活习惯的变化等,反复发作,迁延难愈!
楼主还是去医院检查下比较好!
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回答时间: 13:10:38
能引起过敏症的物质数以千计,它们存在的空气、食物、饮料、药物、甚至可接触到的日用品中,而这些物质便叫做“过敏原”分为以下几类:
  1、食物过敏原:食物过敏原可以是一些普通的食物和饮料,如海产类、果仁类、草莓类、香料、牛奶、啤 酒或含有酒精的饮料均可能成为引起最常有的皮肤过敏症状------荨麻疹。
  接触性过敏原:
  2、 有毒物质过敏:接触有毒的常春藤和有毒的橡树及金属(镍)和染料引起。还有一般的日用品如香水、指甲油、化妆品及橡胶。过敏的部位会呈现类似荨麻疹的红疹及瘙痒。
  3、空气过敏原:
  散播于空气的过敏原,因其可以远播而引起的多种过敏症。其中花粉、霉菌和藻类都会引起最常见的一种鼻敏感症----枯草热,枯草热的季节由春天开始直至秋天。其他散播于空气中的过敏原有尘螨、动物皮毛、工业污染废料以及在潮湿环境中生长的霉菌。
  4、注入性过敏原: 除了某些注射药物外,还包括昆虫叮咬、大黄蜂和蜜蜂等的刺蛰。
  传统医学界对过敏没有很好的根治手段,大量的黄胺类、激素类的药物运用只是起到缓解症状的作用而且副作用极大,过敏病人都是在一次次的长年累月的反复发作中缓解症状,身体的免疫能力日趋低下,极为痛苦。
  在7月8日全球首个“世界过敏日”里,中华医学会会长钟南山院士指出,中国有两亿多人患过敏性疾病,脱敏已是公认疗效显著的疗法。
  钟南山院士介绍,目前全球有22%的人群患有过敏性鼻炎、哮喘、湿疹等过敏性疾病,并以每10年23倍的速度增加,预计2010年将达到全球人口的40%。依此类推目前中国有两亿多人患有过敏性疾病,应引起重视。
  诱发过敏反应的抗原称为过敏原。过敏原是过敏发生的必要条件。引起过敏反应的抗原物质常见的有种,医学文献记载接近2万种。它们通过吸入、食入、注射或接触等方式使机体产生过敏现象。常见的过敏原如下:
  A、吸入式过敏原:如花粉、柳絮、粉尘、螨虫、动物皮屑、油烟、油漆、汽车尾气、煤气、香烟等。
  B、食入式过敏原:如牛奶、鸡蛋、鱼虾、牛羊肉、海鲜、动物脂肪、异体蛋白、酒精、毒品、抗菌素、消炎药、香油、香精、葱、姜、大蒜以及一些蔬菜、水果等。
  C、接触式过敏原:如冷空气、热空气、紫外线、辐射、化妆品、洗发水、洗洁精、染发剂、肥皂、化纤用品、塑料、金属饰品(手表、项链、戒指、耳环)、细菌、霉菌、病毒、寄生虫等。
  D、注射式过敏原:如青霉素、链霉素、异种血清等。
  E、自身组织抗原:精神紧张、工作压力、受微生物感染、电离辐射、烧伤等生物、理化因素影响而使结构或组成发生改变的自身组织抗原,以及由于外伤或感染而释放的自身隐蔽抗原,也可成为过敏原。
  治疗顽固性过敏最有效的措施是寻找出过敏诱发因子(过敏原),但要在2万种不同的诱发因子中准确地找到致病因子犹如大海里捞针。最新权威实验证实:过敏人群体内自由基数量比非过敏人群高许多!自由基对人体免疫系统侵害是过敏体质形成的基础,还会直接氧化人体的肥大细胞和嗜碱细胞,导致细胞膜破裂释放出组织胺,产生过敏反应。因此,改善过敏体质就要清除自由基。
  全球首个广普脱敏因子,具有广普消炎药诞生一样的划时代意义。从此医院仅能查100种以内过敏原,无法查出3000多种主要过敏原的治疗瓶颈被突破,过敏原复杂的患者终于有了一种广普的脱敏治疗方案。过敏专家多年临床总结的过敏不同类型的不同临床治疗方案,可以广普性的彻底脱敏治疗。
  自由基来源于两个渠道:一是在机体本身氧化代谢过程中不断产生;二是环境污染、辐射、不良生活习惯等,也会不断产生自由基。自由基可称万恶之源,百病元凶。人体的老化、许多疾病的产生都与其密切相关。自由基所形成的脂质过氧化物,能够损害生物膜,破坏细胞,阻碍正常的新陈代谢,加速衰老,并能引起诸如免疫失衡,过敏,顽固皮炎,鼻炎,结膜炎,哮喘,湿疹,高血压、心肌梗塞、糖尿病、肝炎、痛风、肾炎、白内障等多种疾病。
  在目前医院的检测中,仅仅查50-100种过敏原是远远不够全面的,但我们可以通过广普脱敏因子系列彻底改变自身的过敏体质。
  世界卫生组织WHO在其关于免疫脱敏治疗的指导性文件中明确指出,“免疫脱敏治疗是唯一可以彻底治疗过敏性疾病的根本性治疗方法”.
  国际过敏研究权威组织也提出,“使用高品质的标准化脱敏制剂,同时应该使用最佳的过敏症治疗方案,包括清除过敏原、患者免疫修复、过敏并发炎症适当的对症药物治疗、标准化脱敏制剂免疫治疗,简称“四合一的四联疗法”方案。
  常见的过敏性鼻炎过敏原
  由于国外的空气干燥,适合粉尘浮游,因此国外引发过敏的过敏原以花粉为主;而台湾气候湿热,年均温在摄氏廿六度左右,湿度大于六十%,是最适宜尘蹒繁殖的气候,因此台湾常见的过敏原即为尘蹒;会引起过敏的包括尘蹒本身的成分、尘蹒的尸体,以及它的分泌物。
  尘蹒属蜘蛛形纲,灰尘中的蹒有数百种,它的大小约○?一七至○?五公厘,肉眼无法看出。是以人或动物脱落的皮屑、指甲、毛发为主食,喜好生长于床褥、枕头、地毯、衣服、有毛的玩具,因此很适合在台湾的环境中生长,在夏末秋初时繁殖最多,也是气喘病人最容易发作的季节。而值得注意的是,一般认为国内患者最易过敏的是以粉尘蹒、屋尘蹒(DPDF)为主,但据马偕医院小儿科针对百余位过敏指数的患儿所做的检测显示,有近廿名患者对这两种尘蹒并不会过敏。
  其实国内常见的尘蹒有五种,除上述两种尘蹒外,最近引起注意的为热带五爪蹒,但一般的尘蹒测试并未包括热带五爪蹒,因此即使一般测试结果显示尘蹒没有反应者,也要注意热带五爪蹒的可能。而蟑螂也是不容忽视的过敏原。
  除尘蹒外,空气污染中的废气如臭氧、汽机车排放废气、烟味及油漆、杀虫剂等具有挥发性气体的化学刺激物,以及玉米、花生、豆类等产品保存不佳时产生的黄曲毒素,或是潮湿孳生的霉茵丝等,都会引发过敏;另外,像寄生虫如蛔虫、钩虫寄生时,会使寄主产生嗜酸性白血球增多,也会诱发过敏症状;而情绪压力,以及妇女怀孕时因荷尔蒙的变化,或是发生卵巢机能失调时,也可能诱发过敏。
  此外,冷空气促使副交感神经兴奋,也易使过敏性鼻炎患者发作。
  这些也是引发过敏性鼻炎的常见过敏原:
  ⑴屋内灰尘:主要指存在室内,尤其是留存于居室内的陈旧尘土,实为多种过敏性鼻炎过敏原的混合物,除含有织物纤维及垫料外,还含有几乎下述各种吸入过敏原。
  ⑵螨:此种类较为复杂,尘螨是一种八只脚的节肢动物,肉眼根本看不见,只得需用低倍的显微镜或放大镜仔细观察才能发现。成为过敏性鼻炎的过敏原主要是屋尘螨、粉尘螨和宇尘螨。屋尘螨广泛存在于屋尘中,尤其是床垫料、枕垫料、地毯和窗帘中,与人接触密切,喜温暖潮湿。尘螨以动物的皮屑为生命来源,包括人、家中小动物、蟑螂、老鼠、棉制品或衣服等所代谢脱落的毛、发、皮屑,所以床垫、地毯、长毛衣服、绒毛玩具等地方容易捞到它们,但它们不喜欢塑胶物质环境。想要彻底清除,是一件非常困难的事。唯一的方法就是保持干燥,将湿度控制在50%以下,并将家里整理得一尘不染,才有根除的可能。
   ⑶昆虫:蟑螂、蚊、蝇、蜂、蛾、蝶等的鳞、毛、蜕皮、脱屑、残骸、分泌物及排泄物等等均可视为致敏的过敏原。对人们来说,蟑螂会引发过敏的物质,就是它们所生产出来的代谢物,而且它们的唾液与身体的分解物也是过敏性鼻炎的过敏原。经过人体吸入后被分解成较小的蛋白质,造成过敏的症状。还需注意的是,蟑螂走过的地方如食物、餐盘等物品,若使用时没有先清洗干净,吃了用了都会引起过敏反应。
  ⑷羽毛:主要是家禽及观赏鸟类的羽毛,与屋尘螨关系密切。因后者可潜藏在其中生长繁殖。
  ⑸上皮:猫、狗、兔等及家畜的上皮脱屑,唾液、尿等排泄物均具抗原性,且脱屑比毛的抗原性更强。近年来饲养宠物者日渐增多,由动物皮毛致敏者屡见不鲜,尤以儿童居多。
  ⑹花粉:为引起花粉症的致敏原。有较明显的区域性及季节性。多为风媒花,其粉粒多而细小,重量轻,极易随风飘散,据测在洋面及高空均能收集到花粉颗粒。常见的有蒿属、豚草、苋科、藜科等以及槭树、云杉、构树、柏树、杨、柳、梧桐及向日葵等,而以豚草和蒿致敏性最强。因此户外活动后,洗澡很重要。
   ⑺真菌:其无处不有、无时不在,不但通过吸入途径,还可通过食入、接触、注入等途径进入人体。常见致敏真菌有间链孢霉、单孢枝霉(亦称着色芽生菌)、锈霉、黑粉霉、蠕孢霉、曲霉、青霉、根霉、镰刀霉、念珠菌、酵母及蘑菇孢子等。
   ⑻化学物质:如洗涤剂中的各种酶类,塑料工业中使用的甲苯二异氰酸脂(TDI),各种燃料燃烧后释放出的二氧化硫等。食物中常见致敏原如面料、奶、蛋、鱼、虾、花生、大豆及某些水果、蔬菜等。接触物有化妆品、假首饰、油漆等致敏原。
   ⑼职业变应原:药物工作者可能对番泻叶、石松或肥皂草根过敏,蓖麻子可引起严重的过敏性鼻炎和支气管哮喘,实验室接触昆虫的人员可能对蚱蜢、科罗多甲虫和蟑螂发生特异性反应。
   ⑽空气污染:此类可大致分为室内与室外两个方面,因为在室内的时间多出室外。因此,主要是以防范室内空气污染为主。
常见的检查有:斑贴试验、点刺试验、皮内、皮外试验等等。建议楼主去正规医院接受正规检查。
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回答时间: 10:21:44
过敏性咳嗽  儿童 过敏性咳嗽
  在医院儿科门诊中,每天都碰到一些因咳嗽来就诊的孩子,家长反映说,孩子咳嗽已一个多月了,咳嗽多在夜间或凌晨,呈阵发性,无气喘及发热,胸部X线摄片及血液检查均无明显异常,先后使用多种抗生素及止咳药,效果都不明显。以往这部分病儿常被诊断为“感冒”或“支气管炎”。近年来随着医学事业的不断发展,国内外学者发现,这些病儿可能患了过敏性咳嗽,临床上称为咳嗽变异性哮喘,它是一种以咳嗽为主要临床表现的隐匿性哮喘。 目前有数据显示,工业化明显的城市、沿海发达地区的过敏性咳嗽的患者逐年增加,说明环境对过敏性咳嗽的影响非常明显。
  预防:防治过敏性咳嗽,应避开诱发因素:相关内容,很多文章里都有描述,这里就不再重复。
  这里主要谈谈父母都关心的治疗:目前医学界对过敏性咳嗽的治疗都有一个共同的认识,由于过敏性咳嗽与哮喘的本质相同,所以治疗方法也基本等同于哮喘的治疗。
  一旦确诊,父母应该了解如下内容:
  1。治疗时间:根据粗略统计显示,基本控制住病情的时间和比例如下:4-6个月能基本控制住病情的约占30% 7-12个月能基本控制住病情的约占50% 1-2年能基本控制住病情的约占10% 2年以上能基本控制住病情的约占10%。(基本控制住病情,不代表孩子完全痊愈,只是一次患病后治疗到基本不咳嗽的时间)。所以父母们要有一定心理准备。
  2。中西药配合:患病后,则可采取针对性治疗,千万不要盲目滥用抗生素。中西药配合治疗,效果明显。
  3。用药:急性期用西药进行控制,缓解期用中西医配合治疗,西药的治疗方法,国内目前的用药方法与用药种类都比较一致。中药的选择则因地区用药习惯而异。
  西药目录如下:
  抗炎药: ①糖皮质激素 强的松 布的奈德
  ②抗白三烯 扎鲁司特 齐留通
  ③炎症介质阻释药 色甘酸钠 酮替芬
  ④炎症介质拮抗剂 非索非那定
  支气管扩张药: ①β2 受体激动剂 特布他林 沙美特罗
  ②黄嘌呤类 氨茶碱
  ③抗胆碱药 异丙阿托品
  目前最常使用的商品名如:顺尔宁、普米克、艾畅、美林、西克劳、西舒美、开瑞坦、舒喘灵、非那根、沐舒坦 信必可都保。。。等。
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回答时间: 12:42:36
过敏性咳嗽的人会在接触到过敏原的短时间内突发咳嗽,解除与过敏原的接触后一段时间可以恢复。是因为机体受过敏原刺激后诱发了肥大细胞、嗜碱性粒细胞释放组胺、白三烯等炎症介质,此类患者血常规检查有时可见嗜酸性粒细胞升高。建议楼主到医院详细检查,必要时可以做过敏原检测。
还要提醒楼主注意的是,要排除是否是咳嗽变异型哮喘,本人在临床上见过不少类似的患者,进行支气管激发试验后发现很多患者的变异率都大于百分之二十,可以诊断为咳嗽变异型哮喘。但是很多人都在以前被忽略了。如果是咳嗽变异型哮喘。就一定要按哮喘规范治疗才行。
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回答时间: 13:31:59
想要知道自己的过敏源是什么,可以去医院进行一套专门针对过敏源测试的一个服务,不过这个过程是很痛苦的,如果你可以给个大概过敏范围的话可以减少很多过程,不过还是很痛苦的,因为要一种一种的去试,知道找到哪个是你的过敏源为止!
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回答时间: 22:45:09
首先到医院确定过敏原,在接受治疗,要不还会有类似症状出现。
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回答时间: 13:29:56
确认应该是有困难的。不过可以用的抗过敏的药,要是有效就支持过敏。
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回答时间: 13:30:07
同意gradzhang 的观点
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回答时间: 09:56:11
了解,长知识了,最好到医院查一下!
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回答时间: 11:26:21
他们打的很全了,祝楼主早日康复吧!
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回答时间: 12:53:26
查找过敏原,痰液找嗜酸细胞。血象看看嗜酸细胞是否增多。
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回答时间: 13:12:19
介绍的非常全面,谢谢了~
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回答时间: 14:48:35
个人以为过敏性咳嗽的说法好像不太规范吧,因为没在教科书上见过这种说法,可能是我孤陋寡闻吧。楼主的情况是否也有可能是咳嗽变异型哮喘呢,做个支气管激发或舒张实验看看吧,或者是否是单纯的慢性咽炎,或者过敏性鼻炎,形成了鼻后滴漏呢
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回答时间: 13:55:34
你的情况首先需要排除因细菌或病毒引起的咳嗽,然后考虑涂料聚酯原因。也需要注意两者的兼有。
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回答时间: 11:07:52
最好到医院检查一下,找到过敏源。
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屋尘螨,粉尘螨过敏会导致过敏性哮喘吗?_过敏性哮喘
状态:就诊前
状态:就诊前
屋尘螨,粉尘螨过敏会导致过敏性哮喘吗?
状态:就诊前
如果小儿对食物过敏是不是马上能显现?
我的小孩三岁做过皮肤点测检查发现对螨虫过敏,还被诊断为哮喘。这种情况还要做食物性过敏检测吗?
1.哮喘的规范治疗是长期药物吸入;
2.哮喘病人约有50%为粉尘螨过敏,这种过敏会诱发哮喘的发作,故应进行脱敏治疗;
3.需要做食物过敏检测。
大夫郑重提醒:因不能面诊患者,无法全面了解病情,以上建议仅供参考,具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行!
状态:就诊前
谢谢高医生,谢谢!
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状态:就诊前
高医生,为什么我的小孩吃过哮喘药之后晚上睡觉老是哭闹,浑身不舒服,这样正常吗?是这样吗?
吃的什么药?
哮喘的治疗一般应以吸入药物治疗为主。
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状态:就诊前
小儿哮喘,用完哮喘药后烦燥,哭闹。
状态:就诊前
高大夫,请问这个正常吗?是吃药引用的吗?应该怎么办?
吃的药有辅舒酮,顺尔宁,支气管扩剂,脾氨肽冻干粉,开瑞坦。
治疗哮喘的药物应以雾化吸入为主。
口服可以有顺而宁。一般不会有不适症状。
大夫郑重提醒:因不能面诊患者,无法全面了解病情,以上建议仅供参考,具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行!
高远赋大夫通知停诊:好消息:
2014年12月南京军区总医院儿科将在南京军区总医院汤山疗养区增加一个“儿童肾脏病诊疗与康复中心”(床位在50张左右),将大大缓解患者看病难的问题,此“儿童肾脏病诊疗与康复中心”是全军儿童肾脏病创新研究基地的本部(江宁区汤山街道温泉路5号),两地互转方便快捷,设有班车接送,环境优美,有适合儿童肾脏病的活动空间,对康复有极大的帮助!!也可解决门诊不能报销(对复诊患者更方便)与来宁住宾馆的问题!!
大夫郑重提醒:因不能面诊患者,无法全面了解病情,以上建议仅供参考,具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行!
高远赋大夫通知停诊:因外出执行任务,9月17日、9月19日两次门诊停诊。请各位病友相互转告,抱歉!
2014年12月南京军区总医院儿科将在南京军区总医院汤山疗养区增加一个“儿童肾脏病诊疗与康复中心”(床位在50张左右),将大大缓解患者看病难的问题,此“儿童肾脏病诊疗与康复中心”是全军儿童肾脏病创新研究基地的本部(江宁区汤山街道温泉路5号),两地互转方便快捷,设有班车接送,环境优美,有适合儿童肾脏病的活动空间,对康复有极大的帮助!!也可解决门诊不能报销(对复诊患者更方便)与来宁住宾馆的问题!!
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高远赋大夫通知停诊:因外出开会,10月15日门诊停诊。敬请各位病友相互转告,抱歉!
2014年12月南京军区总医院儿科将在南京军区总医院汤山疗养区增加一个“儿童肾脏病诊疗与康复中心”(床位在50张左右),将大大缓解患者看病难的问题,此“儿童肾脏病诊疗与康复中心”是全军儿童肾脏病创新研究基地的本部(江宁区汤山街道温泉路5号),两地互转方便快捷,设有班车接送,环境优美,有适合儿童肾脏病的活动空间,对康复有极大的帮助!!也可解决门诊不能报销(对复诊患者更方便)与来宁住宾馆的问题!!
大夫郑重提醒:因不能面诊患者,无法全面了解病情,以上建议仅供参考,具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行!
高远赋大夫通知停诊:因外出开会,11月14日门诊停诊。敬请各位病友相互转告,抱歉!
2014年12月南京军区总医院儿科将在南京军区总医院汤山疗养区增加一个“儿童肾脏病诊疗与康复中心”(床位在50张左右),将大大缓解患者看病难的问题,此“儿童肾脏病诊疗与康复中心”是全军儿童肾脏病创新研究基地的本部(江宁区汤山街道温泉路5号),两地互转方便快捷,设有班车接送,环境优美,有适合儿童肾脏病的活动空间,对康复有极大的帮助!!也可解决门诊不能报销(对复诊患者更方便)与来宁住宾馆的问题!!
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高远赋,男,儿科副主任,教授,中共党员。南京军区优秀中青年科技人才。现任中国医师协会儿童肾脏病专家委...
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用PCR技术对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测
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用PCR技术对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测
【摘要】:近几十年来,各种变态反应性疾病如过敏性鼻炎、皮炎、支气管哮喘和变应性结膜炎等的流行呈逐年上升趋势[1],已成为全球性的健康问题[2]。变态反应性疾病是接触变应原后人体产生的一种免疫病理反应过程[3]。现有资料证明[4],尘螨是引起变态反应性疾病最重要的变应原之一。而尘螨中又以粉尘螨(Dermatophagoides farinae,Df)和屋尘螨(Dermatogoides pteronyssinus,Dp)数量最多、分布最广、危害最大[5-7]。但是一方面屋尘螨和粉尘螨的分布不完全相同,另一方面两者又常在同一环境中同时存在,因此了解某一地区或环境中尘螨的种类和优势螨种,对过敏性疾病的诊断、预防和治疗是非常重要的。本研究尝试用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)技术对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测。
由于粉尘螨和屋尘螨在室内分布广泛,并且二者在形态上非常接近,用传统的方法进行鉴别或检测存在困难或较为麻烦,因此本研究尝试用PCR的方法对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测。
(1)粉尘螨和屋尘螨DNA提取用酚-氯仿法分别提取粉尘螨和屋尘螨的DNA
(2)随机引物PCR扩增用设计的六条随机引物RP1、RP2、PR3、RP4、RP5和PR6单独或两两配对,对两种尘螨DNA进行PCR扩增。通过比对同一引物扩增两种尘螨结果,验证随机引物PCR方法是否能够对两种尘螨进行鉴别。
(3)测序从随机引物PCR反应结果中选择了三条具有鉴别及检测粉尘螨和屋尘螨潜力的DNA扩增条带进行测序和分析。
(4) PCR引物设计根据测序结果,设计特异性引物用于粉尘螨和屋尘螨的鉴别及检测。
(5) PCR扩增粉尘螨和屋尘螨用新设计的引物分别对粉尘螨和屋尘螨DNA进行PCR扩增。
(6) PCR反应的特异性用新设计的屋尘螨引物扩增粉尘螨DNA,粉尘螨引物扩增屋尘螨DNA,观察这些引物的特异性。
(7) PCR反应的敏感性对粉尘螨和屋尘螨的DNA模板进行稀释,取稀释后的DNA模板进行PCR扩增反应,以初步估计该检测方法的敏感性。
(8) PCR检测方法的优化通过减少循环中的各部分反应时间和减少反应循环数两种方式对PCR反应条件进行优化,缩短检测所需时间。
(1)粉尘螨和屋尘螨DNA提取获得的粉尘螨和屋尘螨DNA OD260/OD280分别为1.86和1.78,表明其具有较高的纯度,可进一步用于PCR实验。
(2)随机引物PCR扩增六条引物单独或配对进行PCR反应共九种情况的扩增结果比对可见,同一引物扩增粉尘螨和屋尘螨时扩增条带均存在不同程度的差别。提示随机引物PCR方法可用于两种尘螨的鉴别。其中,RP1、RP3配对扩增,粉尘螨在500bp和750bp左右均有明显条带;而屋尘螨仅500bp左右条带较清晰,无大于500bp的扩增产物出现。因此选定这对引物的扩增产物进一步用于两种螨的鉴别和检测研究。
(3)测序测定了三个大小分别为502bp、666bp和500bp DNA片段的序列结构,同源性分析未发现与之高度同源的序列。
(4) PCR引物设计根据测序结果,共设计三对特异引物:两对为扩增粉尘螨引物f1、f2及f3、f4,预计扩增产物长度分别为478bp和657bp,扩增屋尘螨引物p1、p2的预计扩增产物长度为328bp。
(5) PCR扩增粉尘螨和屋尘螨f3、f4及p1、p2引物PCR扩增粉尘螨和屋尘螨的产物长度与预期大小一致,而f1、f2扩增无明显条带出现。故f3、f4及p1、p2可用于两种尘螨的鉴别和检测。
(6) PCR反应特异性用上述两对引物进行交叉PCR扩增,无论是粉尘螨还是屋尘螨均无明显条带出现。表明引物具有较好的特异性。
(7) PCR反应敏感性用新设计的引物进行PCR可从相当于1.5只尘螨的DNA模板中扩增出粉尘螨和屋尘螨相应的目的条带,表明该检测方法具有较好的敏感性。
(8) PCR检测方法的优化缩短循环中各部分反应时间后,粉尘螨和屋尘螨均可扩增出目的条带;将循环次数从45减少至35或40后,二者仍然可以扩增出目的条带。
(1)本研究结果表明:选用适当的随机引物和进行引物的配对筛选,可建立随机引物PCR技术方法,从基因水平上对粉尘螨和屋尘螨进行有效鉴别。
(2)测定了三个粉尘螨和屋尘螨的DNA片段,经同源分析无与之高度同源序列,因此这三个片段有可能是新的基因片段。另外,粉尘螨和屋尘螨由同一对随机引物扩增产生的、大小非常接近(约500bp)的产物,测序发现二者并非相同或相似的DNA片段。
(3)新的特异引物用于两种尘螨的扩增有较好的效果,并具有从环境样本中对二者进行鉴别和检测的潜力。
(4)PCR检测方法的优化结果提示粉尘螨和屋尘螨的PCR检测反应时间可通过优化而缩短,达到快速检测的目的。
【关键词】:
【学位授予单位】:广州医学院【学位级别】:硕士【学位授予年份】:2011【分类号】:R440【目录】:
摘要4-7ABSTRACT7-11英文缩略语11-12技术路线12-13前言13-18第一部分 随机引物PCR 对粉尘螨和屋尘螨进行初步的鉴别18-31 材料与方法18-22 结果22-29 讨论29-31第二部分 设计特异性引物对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测31-36 材料与方法31-33 结果33-35 讨论35-36小结36-37参考文献37-41尘螨的鉴别和检测技术研究进展41-47 参考文献44-47在读期间论文发表情况47-48致谢48-49
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