您现在所在的位置： ->& > 女性检查出梅毒怎么治好！
来源：本站
编辑：联创兄弟
更新日期： 11:51:22
【梅毒治疗专家王进生】在梅毒螺旋体人工培养尚未获得成功的情况下，基因克隆（即DNA重组）技术的出现为该病原的研究开辟了一条新的途径。应用基因工程技术目前已制备出多种重组梅毒螺旋体抗原，这些抗原的制备对梅毒发病机理的探讨、疫苗的研制、以及血清学诊断试验的建立与应用具有重要意义，为梅毒的预防和控制提供了更加有效的手段。
梅毒是一种临床表现极为复杂，几乎可累及全身各器官的性.病。尽管本世纪40代年发现了治疗梅毒的理想药物青霉素，但目前该病在全球仍然是一项重要的公共卫生问题。目前尚未解决梅毒的病原体梅毒螺旋体的人工培养问题，从而阻碍了对TP致病机理探讨、疫苗研制、以及梅毒血清学诊断技术开发等方面的深入研究。80年代初，随着分子生物学技术的发展，特别是基因工程（DNA重组）技术的出现使梅毒螺旋体的研究进入一个新的阶段，目前，TP的全部基因组DNA序列已经被解析。通过重组TPDNA的克隆以及在大肠杆菌中的表达，制备出多种重组TP抗原，为梅毒的研究提供了一条新的途径。现就近10年来有关重组T抗原的研究现况进行复习。
二、重组TP抗原的特性及制备
目前已重组的TP抗原有近20多种，如TpN15、TpN17、TpN19、TpN29～35（TpD）、TpN44.5（TmP A）、TpN47、TpN35(Tmp C)等[3]。现将其中部分有应用前景的重组TP抗原分述如下:
（一）TP15kD抗原[4]：15kD蛋白是一种脂蛋白，首先由Hensel等1985年分离鉴定，它在TP膜蛋白中的含量相对较少，但在免疫印迹试验中与人梅毒血清间显示了超强的反应性，同时对实验梅毒兔的淋巴细胞有很强的增生反应，表明15kD蛋白不仅具有较强的体液免疫原性，而且有较强的细胞免疫原性，但Centurion-Lara等实验表明，此蛋白对TP感染没有任何免疫保护性。重组15kD抗原基因由Norgard 等用特异的单克隆抗体从TP基因库中筛选得到。其最新报道的表达质粒pMALc2，该质粒在DNA插入位点的上游含有麦芽糖结合蛋白基因，使表达的融合蛋白易于分离和提纯。
（二）4D抗原：4D抗原是分子量分19kD的一种TP外膜蛋白，Radolf等[6]研究发现无论是自然状态还是重组4D蛋白都由二巯键交叉相联成寡聚结构，且耐蛋白酶，表明4D抗原可能在TP外膜保持完整结构中起着非常重要的作用。重组TP4D抗原首先由Feniger等在E oli RRI大肠杆菌中表达和分离提纯[7]。Borenstein等用肌注和静脉注射的方法探讨了重组TP 4D抗原对实验性梅青的影响，显示以4D抗原免疫动物后能够改变实验梅毒的病程，表明4D抗原免疫实验动物后，可对感染梅毒产生部分保护的作用。提示重组TP抗原是制备疫苗的又一可能径。
（三）TP24kD抗原：此重组蛋白是以质粒pUC8为载体在大肠杆菌中表达的一种分泌蛋白，具有很强的免疫原性，其编码TP24kD抗原的DNA序列仅存在于致病性的TP基因中，而非致病性TP中不存在此DNA序列，提示TP24kD抗原与TP的致病性相关，但与TP致病性的关系有待进一步研究。Hsu等人的实验发现，重现24kD的表达可以改变大肠杆菌的生长形态，出现与一般大肠杆菌不一样的扁平粗糙的菌落和丝状样生长，表明24KD抗原与TP的生长特性相关。
（四）TmP A和TmP B：TmP A是一个分子量为42kD的TP膜蛋白。Schouls[等构建了能在大肠杆菌K-12中大量表达该重组蛋白的质粒载体pPLc245。Ijsselmuiden等[10]用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）法探讨了重组TmPA抗原在血清学诊断中的意义，通过对148例未治疗和167例已治疗的梅毒血清以及190例非梅毒血清进行了检测，其敏感性分别为：
一期梅毒76%、二期梅毒100%、早期稳性梅毒98%，在治疗后1年以内的梅毒患者中，其抗TmPA的滴度明显下降，这表明TmPA不仅在梅毒血清诊断中有意义，而且可望用于梅毒治疗效果的监测。TmP B基因位于TmPA基因下游[9]。Schouls等人的实验表明，抗TmPB抗体渡度随着梅毒患者的治疗呈下降趋势，因而可望用于梅毒治疗的监测。但单独用TmpB抗原不适宜作血清学诊断，因为梅毒患者血清的很大一部分对TmpB不起反应。Wicher等用重组TP抗原对豚鼠进行免疫，结果发现，重组TP抗原中只有TmPB可以改变梅毒的病程，提示重组TmPB抗原在疫苗制备中可能有一定的意义。
（五）TP47kD抗原：该蛋白为TP整合性膜蛋白抗原，1986年Norgard等在大肠杆菌中首先克隆及表达了重组47kD抗原。多中心研究发现，此蛋白有很强的免疫原性，在TP中含量非常丰富，且为致病菌特有的蛋白。Chamberlain等采用含有依赖T7 RNA多聚酶的表达载体，建立了高效表达重组47kD的系统，并对此重组抗原与自TP中分离得到的自然47kD蛋白进行了生物学分析与比较，结果表明这两种来源的47kD抗原其生物学特性相同，均为含蛋白脂质，其疏水性可能与致病性有关。为了探讨疏水性结构与抗原性的关系，Weigel等[14]表达了非酰化的亲水性重组47kD抗原，通过免疫印迹试验对116例不同期的梅毒血清进行检测，表明亲水性重组47kD抗原的抗原性保持不变，说明酰化结构与抗原性无关。
三、重组TP抗原在血清学诊断中的应用
尽管Fujimura等用ELISA检测了不同重组抗原的免疫反应性，发现G17的反应性比M47、S42和G15都高。但近年来的应用研究趋向于将2种或2种以上的重组抗原联合使用，综合两种或多种抗原的不同特性，从而使其具有更高的特异性和敏感性。
（一）15kD与47 kD组合：目前认为15 kD和47 kD是两种抗原性最强的TP蛋白，Zrein等对以重组15 kD和47　kD为抗原的酶免疫试.剂盒ELISyph-rG的敏感性和特异性进行了评价。在TPHA检测阳性的血清中，其ELISyph-rG结果和TPHA抗体滴度之间的相关性为0.94。在对VDRL方法检测为阴性的1822份正常健康自愿者血清（其中440份血清用TPHA检测为阴性）检测后，结果在这1822份血清中用ELISyph-rG法检测出4份阳性血清。用FTA-ABS和WB法对阳性血清进行进一步确证发现，其敏感性达100%，特异性大于99.8%，认为以重组15 kD和47 kD为抗原的ELISyph-rG法可代替VDRL和TPHA法，适合用于大样本的筛检。
（二）15 kD、17 kD、47 kD组：此3种TP抗原存于梅毒的整个病程中[18]，包括晚期稳性梅毒。尤其对于伴有HIV感染的梅毒患者在抗TP的含量低于一般梅毒患者的情况下亦能检测到抗47 kD抗体。Gerber等[3]人对3种重组抗原的联合应用进行了研究，结果表明18例梅毒
患者中，17例患者在整个病程中均可检测到抗体，而42例正常人血清中无1例抗体阳性，提示这种检测方法有很高的敏感性和特异性。Young等[18]对这3种重组蛋白为抗原的酶免疫试.剂盒ICE Syphilis(immune-capture EIA)进行了评价，并与自然TP为抗原的试.剂盒Captia SelectSyph-G、TPHA、FTA-ABS及VDRL进行了比较，结果显示ICE Syphilis的特异性明显高于Captia SelectSyph-G(分别为99.8%与99.2%，P〈0.02〉，其敏感性也明显高于Captia SelectSyph-G、FTA-ABS及TPHA（分别为99%～100%，P〈0.01，91.4%～92.4%，92.4%和97.1%〉。在15例伴HIV感染的梅毒患者中，血清ICE Syphilis检测结果均为阳性，而Captia SelectSyph-G检测结果出现3例阴性。由此可见，ICE Syphilis 检测方法的高特异性及高敏感性将为梅毒的筛检测提供一种理想的手段。
等还建立了应用这3种重组蛋白为抗原的快速检测梅毒的胶乳凝集方法Syphilis Fast ，并通过检测1518份随机血清标本，对Captia SelectSyph-G和VDRL的特异性进行了比较，以及在99份各期梅毒血清和15例筛检阳性的血清中对其敏感性进行了评价，其特异性（99.8%）明显高于Captia SelectSyyph-G（99.2%）和VDRL（99.1%）（P〈0.02〉，但其敏感性与Captia SelectSyph-G间没显著性差异（分别为93%和92.1%），但这两种方法的敏感性均显著高于VDRL（46.5%）(P〈0.001〉。由此可见，Syphilis Fast法可望成为一种特异性高、检测速度快、操作简便的梅毒筛检方法。
[20]认为，对有关人群进行梅毒筛检是控制和预防梅毒的重要措施之一。目前常规用于梅毒筛检和诊断的血清学试验主要有两种，一种是对脂类抗原的非螺旋体试验方法（如VDRL、RPR），另一种是特异性梅毒螺旋体试验（如TPHA、FTA-ABS）。前者敏感性和特异性不高，存在着假阳性和假阴性，而后者最大的问题是抗原来源的缺乏，尚未得到解决。因为TP目前还不能人工培养，其用于诊断试验的TP主要通过兔睾丸接种获得，这既需要一定的实验室条件，又费时、费力、费材料。因此探讨重组TP抗原的梅毒血清学诊断中的应用是制备重组抗原的主要目的之一，重组蛋白的制备使我们能够在实验室里得到不同目的抗原，这一方面为建立现有梅毒血清学诊断的替代方法提供了条件，同时又为建立特异性和敏感性更高的诊断新方法奠定了基础，如通过重组抗原制备单克隆抗体，以建立检测梅毒抗原的方法，将为神经梅毒、早期隐性梅毒的实验室诊断提供新的手段。同时通过对不同重组抗原的结构，以及生物学和免疫学的分析，可以达到筛选TP致病因子和开发TP疫苗的目的，为TP的预防和治疗提供更加有效的手段
声明：文章内容仅供参考，具体治疗及选购请咨询医生或相关专业人士。您若对该稿件内容有任何疑问或质疑，请即与漯河网联系，本网将迅速给您回应并做处理。电话：010-
业务合作热线：段志琴 QQ
Tel： 顾敏 QQ：广州网| 佛山网| 深圳网| 东莞网| 珠海网| 中山网| 惠州网| 江门网| 肇庆网
广州大洋网| 大连天健网| 中国宁波网| 深圳新闻网| 青岛新闻网| 武汉长江网| 南京龙虎网| 重庆华龙网| 沈阳网| 济南舜网| 长春信息港| 杭州网|
星辰在线| 合肥在线| 石家庄新闻网| 金阳时讯| 银川新闻网| 海口晚报| 乌鲁木齐信息港| 新桂网| 厦门网| 西安新闻网| 哈尔滨新闻网| 胶东在线|
太原新闻网| 郑州中原网| 中国兰州网| 南昌新闻网| 泉州网| 温州网VDRL_百度百科
关闭特色百科用户权威合作手机百科
收藏 查看&VDRL本词条缺少名片图，补充相关内容使词条更完整，还能快速升级，赶紧来吧！
VDRL，性病研究实验室实验(venereal disease research laboratory test)的英文缩写，是检测梅毒螺旋体的一种方法。外文名venereal disease research laboratory test发明人美国Pangborn
美国Pangborn等发现一种研究实验室抗原（VDRL），是从牛心肌中提取的心磷脂，适量加入胆固醇及卵磷脂以提高敏感性，通常称这种抗原为心拟脂抗原。VDRL试验属于微量玻片法，是唯一推荐用于检测脑脊液反应素的试验，对诊断神经梅毒具有重要价值，可作定量及定 性试验，操作简单，试剂及对照血清已标准化，费用低。但对一期梅毒敏感性不高。梅毒螺旋体一旦感染人体，人体迅速对被损害的宿主细胞以及梅毒螺旋体细胞表面所释放的类脂物
质作出免疫应答，在3～4 周产生抗类脂抗原的抗体（反应素）。这些抗体主要是IgG 和IgM 型混合
抗体。非梅毒螺旋体抗原试验是使用心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原的絮状凝集试验。反应素与
心磷脂形成抗原抗体反应，卵磷脂可加强心磷脂的抗原性，胆固醇可增强抗原的敏感性。心磷脂、
卵磷脂遇水形成胶体溶液，胆固醇遇水形成结晶。当抗原与抗体（反应素）混合发生反应时，后者
即粘附胶体微粒的周围，形成疏水性薄膜。由于摇动、碰撞，使颗粒与颗粒互相粘附而形成肉眼可
见的颗粒凝集和沉淀，即为阳性反应。如遇到非梅毒血清，因体液中的白蛋白多于球蛋白，而白蛋
白对胶体颗粒有保护作用，形成亲水性薄膜，即使同样摇动、碰撞，由于抗原颗粒周围没有粘附免
疫球蛋白的作用，不能形成较大颗粒，无肉眼可见的凝集和沉淀，因此为阴性反应。VDRL、USR、
RPR 和TRUST 等试验均为此类试验，它们所采用的抗原成分相同，敏感性和特异性基本相似。1.材料：a. VDRL 试剂盒：含VDRL 抗原（0.5mL）；VDRL 缓冲液，pH6.0±0.1，其配方为中性福尔马林0.5 mL，
Na2HPO4 0.037g，KH2PO4 0.17g，NaCl 10.0g，蒸馏水1000mL；标准针头（60±1 滴/mL），直径14mm
漆圈玻片；VDRL 试验结果图片。
b. 其他：0.85% NaCl 溶液（等渗盐水）；可调水平旋转器。
B1.2.2 VDRL 抗原配制方法：
a. 吸取0.3mL VDRL 缓冲液置30mL 小瓶；
b. 吸取0.3mL VDRL 抗原迅速滴入小瓶内VDRL 缓冲液中（约4 秒钟），随后摇动10 秒钟，使之混
c. 立即加2.4mL VDRL 缓冲液，盖上瓶盖，来回颠倒摇动小瓶10 秒钟约30 次，即为VDRL 抗原，
此抗原只能用1 天。a. 血清标本需 56℃灭活30 分钟备用；
b. 吸取 0.05mL 血清放入玻片圈内，将血清涂开至整个圈内；
c. 用标准针头加入 1 滴抗原；
d. 将玻片置旋转器上摇动 4 min，180±5 次/min，立即置10×10 倍显微镜下观察。经 VDRL 定性试验为阳性、弱阳性，可疑反应或阴性但临床怀疑为梅毒者，需做定量试验，前
者需明确抗体滴度，后者为排除“前带现象”。
a. 在反应板 1～8 孔各加等渗盐水0.05 mL；
b. 吸取 0.05 mL 血清标本（血清已灭活）置第1 孔与等渗盐水混匀，吸取0.05 mL 稀释液至第2 孔
混匀，再吸取0.05 mL 至第3 孔，如此连续稀释至第8 孔，弃0.05 mL 稀释液。稀释度为原倍、1:2、
1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128，必要时可稀释至更高倍数。
c. 每个稀释度加入抗原 1 滴；
d. 旋转速度和时间同定性试验。大或中等大小的絮状物，液体清亮: 3+~4+ 强阳性反应;
絮状物较小，液体较清亮: 2+ 阳性反应;
絮状物较小，均匀分布，液体混浊 1+ 弱阳性反应;
抗原颗粒稍粗，无凝集 ± 可疑;
抗原颗粒均匀，针状细小: – 阴性反应。
新手上路我有疑问投诉建议参考资料 查看