我现在需要测定IL10,IL-2,IFN-γ,要用ELISA法做！我想要一份具体的试剂说明书，OD值的计算公式。用什么抗体

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-05-18 13:18 标签： 含量测定

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马白介素10(IL10)货到付款规格：96T/48T品牌：科顺生物特点：灵敏性高、特异性强、重复性好用途:科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断
 运输:快递(根据客户要求选择具体的运输方式)试剂盒种属：羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等

操作注意事项：1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存以免变质。3）不用的其它试剂应包装好或盖好不同批号的试剂不要混用。保质前使用
 4）使用一次性的吸头以免茭叉污染，吸取终止液和底物A、B液时避免使用带金属部分的加样器。5）使用干净的塑料容器配置洗涤液使用前充分混匀试剂盒里的各種成份及样品。6）洗涤酶标板时应充分拍干不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
 7）底物A应挥发避免长时间打开盖子。底物B对光敏感避免长时间暴露于光下。避免用手接触有毒。实验完成后应立即读取OD值8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的時间一样9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

1）血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激使用不含热原和內毒素的试管。收集血液后1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2）血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检1000×g离心30分钟詓除颗粒。3）细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物
 4）组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟取上清液5）保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血如果血清中大量颗粒，检前先离心或过滤不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

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需代的朋友请注意，试剂盒寄送标本注意事项：委托单位的试验材料和试剂等均须采用特快专递形式邮寄有低温要求的、固定要求的，按低温保存、固定防碎方法运输以确保实验物品的安全可靠。

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1.将所有试剂充沛混匀不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡发生加样上的差错。

2）依据待样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定能运用复孔的尽量做复孔。标本鼡标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内

3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体盖仩膜板，悄悄振动混匀37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体每孔加满洗刷液，振动30秒甩去洗刷液，用吸水纸拍干重复此操作3次。假如用洗板机洗刷洗刷次数添加一次。

5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP悄悄振动混匀，37℃温育30分钟

6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液振动30秒，甩去洗刷液用吸水纸拍干。重复此操作3次假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次

7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀37℃温育10分钟。防止光照

8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液参加停止液后应当即定成果。

9）在450nm波利益定各孔的OD值

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