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中铁十一局二公司格巧高速公路混凝土养护土工布150g/m2询价单
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询价时间:****年04月05日 09:46
报价截止:****年04月07日 09:41
采购类型:价格协议(长期采购)
价格有效期:(略)- (略)
交货期:自下单后3天内交货至指定地点
距离报价结束还剩1天
报价收费: 10.0 ?
**** 大企业采购业务将从 **** 年 09 月 12 日起,对线上部分品类采购报价收取相应报价费用。[]
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混凝土养护土工布150g/m2
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填写您所关注的产品关键词,以便我们将优质招标、项目及时发送至您的邮箱。(9)电热恒温干燥箱DHG.9031(上海跃进医疗器械厂) (10)各种规格微量加样器 (11)TGF.Bl兔多克隆抗体 美国SANTACRUZ公司
(12)CyclinDl鼠单克隆抗体美国SANTA CRUZ公司 (13)SP9000试剂盒:北京中杉金桥生物技术有限公司 (14)DAB试剂盒:北京中杉金桥生物技术有限公司
TGF.pl与CyclinDl的SP免疫组织化学染色步骤
操作均在同样条件下进行,均严格按照试剂盒说明书方法染色。 (1)将切片置于60。C烤箱烘烤1小时(防止脱片),常温纯二甲苯液中脱蜡
2次,每次10mira (2)将脱蜡后的切片依次置于浓度为100%、95%、75%的乙醇溶液中各 lmin,逐级脱水,再用自来水冲洗至载玻片清洁透明,蒸馏水漂沈2次,每次
lmin:
(3)微波炉抗原热修复:在染色缸中缓慢加入作为抗原修复缓冲液的枸橼 酸缓冲液,将染色缸置于微波炉内,中火加热约2min,使缸内液体温度达到92 —98℃左右,间断性停止加热使温度维持在此范围内15min(此步骤十分关键,
决定以后切片阳性染色程度),然后室温下自然冷却;
(4)抗原修复后,PBS(磷酸缓冲液)浸泡3次,每次5min: (5)置入3%过氧化氢溶液中10min,阻断内源性过氧化物酶; (6)PBS(0.01M,PH7.2)浸泡3次,每次5mira (7)甩除多余液体,每张切片滴加山羊血清50ttl,室温封闭内源性生物素 10min以减少非特异性染色; (8)甩除多余液体,擦干周围水分,每张切片分别滴加TGF.pl兔多克隆抗 体、CyclinDl鼠单克隆抗体,4。C冰箱中过夜: (9)PBS浸泡3次,每次5min; (10)甩出多余的PBS液;每张切片滴加50ttl生物素化的第二抗体,37℃ 水浴孵育30mira (11)PBS浸泡3次,每次5mira (12)甩出多余的PBS液,每张切片滴加501.tl辣根酶标记链酶卵白素工作 液,37℃温箱孵育30min:
材料与方法
(13)PBS浸泡3次,每次5min; (14)甩出多余的PBS液,每张切片滴加509l新鲜配制的DAB显色剂, 显微镜下控制显色3"-"10min,PBS冲洗终止显示; ’(15)苏木素复染2min,自来水冲洗15min,温水蓝化lmin; (16)80%酒精,90%酒精,100%梯度酒精脱水各min,干燥,二甲苯透明, 中性树胶封闭。
2.4对照设置
用PBS代替一抗按照上述步骤染色作为阴性对照;用已知TGF—p1, CyclinDl阳性切片分别作为阳性对照。
2.5免疫组织化学染色结果的判定
应用德国Leica病理图像分析系统,在不知任何背景资料的情形下,采用双盲 法进行判定,光镜(x400)下观察阳性细胞的数量,以胞浆或者胞核出现棕黄 或棕褐色物质为阳性细胞。每例均随机选择10个不重复、不重叠的高倍视野,按 照TGF—Bl或Cy。linDl的阳性细胞数占视野中总细胞数的平均百分比分计数。 (1)TGF.Bl结果判断【91 ‘TGF.Bl蛋白定位于细胞胞浆,胞浆出现棕黄色或棕褐色颗粒状物质为阳性 细胞,切片中无阳性着色和阳性细胞数小于10%为阴性(.),阳性细胞数在10%以 上为阳性(+)。
(2)CyclinDl结果判州1
CyclinDl蛋白定位于细胞胞核,胞核内含棕黄色或棕褐色物质弥漫或颗粒 状物质即为阳性细胞,切片中无阳性着色和阳性细胞数小于10%为阴性(.),阳性 细胞数在10%以上为阳性(+),即过表达。
2.6统计学处理 本研究的实验数据建立SPSSl6.0数据库,采用SPSSl6.0软件采用#检验
进行统计分析,相关性分析采用配对计数资料Spearman相关性分析,以P<O.05 认为差别有统计学意义。
钴 田 =日7卜
TGF.pl、CyclinDl蛋白在不同甲状旁腺组织中的表达
TGF—pl TGF.Dl蛋白的阳性物质定位于细胞浆内,呈棕黄色或棕褐色颗粒状。在正
3.1.1
常甲状旁腺组织中可见少量TGF.BI阳性表达,甲状旁腺腺瘤组织及癌组织中均 有TGF.Dl阳性表达。lO例正常组织中4例TGF.pl阳性,43例腺瘤组织中21 例阳性,6例癌组织中4例阳性,见附图3.1,3.2,3.3。 甲状旁腺癌组织中TGF.Dl阳性表达率高于甲状旁腺腺瘤组,甲状旁腺腺瘤 组TGF.p1阳性表达率高于甲状旁腺正常组织,但甲状旁腺癌组织、甲状旁腺腺 瘤组织、正常甲状旁腺组3组比较差异无统计学意义(P>O.05),见表3.1。
TGF.pI在不同甲状旁腺组织中的表达
(1)正常组与腺瘤组比较(f=o.023 P>0.05)(2)正常组与癌组组比较
(Fisher精确检验P>0.05)(3)腺瘤组与癌组比较(z2=o.146
3.1.2 CyclinDl P>0.05)
CyclinDl蛋白的阳性表达表现为胞核内含棕黄色或棕褐色物质弥漫或颗粒’ 状物质.在正常甲状旁腺组织中阳性细胞少,均匀。lO例正常组织中1例 CyclinDl阳性,43例腺瘤组织中27例阳性,6例癌组织中5例阳性。CyclinDl 蛋白在正常甲状旁腺组织中几乎不表达,在腺瘤及癌组中散在分布,见附图
3.4,3.5,3.6。
甲状旁腺癌组织中CyclinDl阳性表达率高于甲状旁腺腺瘤组,但差异无统
计学意义(胗0.05);甲状旁腺腺瘤组CydinDl阳性表达率及甲状旁腺癌组织阳
性表达率均高于甲状旁腺正常组织,差异均有统计学意义(尸<0.05),见表3.2。
CyclinDl在不同甲状旁腺组织中的表达
(1)J下常组与腺瘤组比较(矛=5.119 P<O.05)(2)正常组与癌组组比较 (Fisher精确检验P<O.05)(3)腺瘤组与癌组比较(Z=o.708
P>0.05)
TGF—pl、CyclinDl蛋白的相关性分析 TGF.pl、CyclinDl在甲状旁腺腺瘤组织表达的相关性分析
3.2.1
43例甲状旁腺腺瘤组织中TGF?pl、CyclinD均表达为阳性者15例,均为阴 性者13例。TGF.pl阴性而CyclinDl阳性9例,TGF-pl阳性而CyclinDl阴 性6例。二者的表达呈正相关(P<O.05),见表3.3。
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TGF-β1和CyclinD1在甲状旁腺肿瘤中的表达和意义
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TGF-β 信号传导通路及其生物学功能
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大蒜素通过部分阻抑TGF—β1介导的Smads信号改善压力超负荷大鼠心肌反应性纤维化
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