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解脲支原体培养及药敏分析
解脲支原体培养及药敏分析
试剂 解脲支原体分离、鉴定、计数、药敏试剂盒由珠海丽珠试剂有限公司生产，配有3大类9种常用抗菌药物药敏试剂条，分别赋有高（H）、低（L）2种浓度药物， 依次为强力霉素（DOX，8.4mg/L），美满霉素（MIN，8.4mg/L），交沙霉素（JOS，4.1mg/L），克拉霉素（CLA，8.2mg /L），罗红霉素（ROX，4.1mg/L），阿奇霉素（AZI，8.2mg/L），氧氟沙星（OFL，8.4mg/L），左旋氧氟沙星 （LEV，8.2mg/L），司帕沙星（SPA，4.1mg/L）。
标本采集 用无菌湿棉签收集标本，要求患者取材前1周内未用过任何抗生素类药物，标本2h内送检。
接种与培养 （1）滴加稀释液到培养基中，充分摇匀，待完全溶解后加稀释液到规定刻度线处。（2）加50&l培养基入空白孔中。（3）接种分泌物标本:将采集标本的拭 子插入培养基中挤压旋转数次后弃掉拭子。（4）充分摇匀后量取50&l培养基分别接种到拭子条余下的各孔中，将剩余培养基连同拭子条一同置于 35℃～37℃孵育箱中培养，24h后观察。
　　（1）空白孔阴性（-）试验有效，判断余下各孔。空白孔阳性（+）则表示污染，试验无效。
　　（2）如对照孔阳性（+），有Uu生长。对照孔阴性（-），则判 定Uu阴性（-）。
　　（3）药敏判断:敏感L（-）、H（+）;中介L（+）、H（-）;耐药L（+）、H（+）。
(责任编辑：博爱医院)
1．标本采集：用含无菌生理盐水的藻酸钙棉试子，伸入男性尿道2～4cm，轻轻转动取出分泌物；女性先用无菌的脱脂棉擦去阴道内粘液，用无菌的藻酸钙脱脂棉试子插入宫颈内1～2cm处旋……
气候变化、环境污染、高速生活工作节奏让您身处亚健康状态，了解常见易发疾病的原因、症状表现及危害，有效的预防保健；症状严重的患者需进行检查后找专业医师诊治。
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试剂 解脲支原体分离、鉴定、计数、药敏试剂盒由珠海丽珠试剂有限公司生产，配有……
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副主任医师
毕业于黑龙江牡丹江医学院五官专业。从事耳鼻咽喉科临床工作近40年，...
&地址：深圳市罗湖区红岭中路2056号151例解脲支原体培养药敏分析--《中国麻风皮肤病杂志》2013年05期
151例解脲支原体培养药敏分析
【摘要】：正为了解支原体对常用药物的敏感性,本文进行了支原体培养和药敏试验。进而依据药敏结果,指导临床合理用药,更好的控制非淋菌性尿道(宫颈)炎的发生。1临床资料1.1一般资料泌尿生殖道支原体感染183例来自医院性病门诊,男87例,女96例,根据诊断标准,确诊为非淋菌性尿道(宫颈)炎。年龄19~59岁,症状为尿道刺痛,晨起尿道口有分泌物,白带增多,外阴瘙痒,下腹部隐痛等。1.2检测方法①标本采集:男性患者
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R446.5【正文快照】：
为了解支原体对常用药物的敏感性,本文进行了支原体培养和药敏试验。进而依据药敏结果,指导临床合理用药,更好的控制非淋菌性尿道(宫颈)炎的发生。1临床资料l.i一般资料泌尿生殖道支原体感染183例来自医院性病门诊,男87例,女96例,根据诊断标准,确诊为非淋菌性尿道(宫颈)炎。年
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解脲支原体培养基的改良研究
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解脲支原体的培养是不是没有培养出来就应该
病情描述：
解脲支原体的培养是不是没有培养出来就应该是阴性？假如是阴性会不会出药敏报告单？ 解脲支原体的培养是不是没有培养出来就应该是阴性？如果是阴性会出药敏报告单吗？
医生提醒：微信加医生为好友，快速帮您诊断
医生建议：这个问题还是要详细了解不要太过担心，一切皆可以解决，请相信我们可以帮助你们解答你们的问题
医生回答:你为什么这样问，如果支原体没有培养出来是没有办法做药敏试验的
追问:一个星期前我去一个广告上的小男科门诊，那里的医生说的
医生回答:这个最好去正规医院检查比较准确
追问:血液检测准确吗
医生回答:血液和分泌物检查
追问:我们这里都是用血液检查的，检测不了分泌物
医生回答:你是什么不舒服
追问:尿道口有点红，不疼不痒，我也看不出肿不肿
医生回答:这个必须检查分泌物，到大医院吧，门诊没有仪器检查的，明白吧
追问:我在县第一医院检查的血液，有三次了，都是阴性
医生回答:医生怎么说
追问:医生说好像是支原体，开了半个月的阿奇霉素和头孢
医生回答:好像？没有病历吗，哪里的医生开的？
追问:没有病历，县医院皮肤科
医生回答:怎么可能没有病历，晕
追问:他只是看了一下血液检测结果，因为我有点红，他说是有症状，说应该是解脲支原体
医生回答:吃完药没有，吃完就去找他复诊
追问:一个月以前就吃完了
医生回答:复诊检查结果是阴性就不用吃药了，多喝水
追问:这几天我自己吃的左氧氟沙星，用的妇炎洁清洗，症状减轻了不少
医生回答:不要相信小广告
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支原体培养的操作与方法
核心提示：支原体常用培养基为PPLO,很多公司都有出售.但血清 (常用马血清或猪血清)和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Frey#
&支原体常用培养基为PPLO,很多公司都有出售.但血清 (常用马血清或猪血清)和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Frey's培养基，常用的微生物实验技术书上都可以查到的。可以自己配制的。在液体培养基中通常要加入酚红做指示剂的，当培养基由红色变为黄色时，即可判定支原体的生长程度。要强调一点，支原体的分离可能不太容易，那么要多盲传几代。液体培养基变黄后，在固体培养基上单克隆，以纯化分离的菌。
所有解脲，人型，肺炎，生殖道支原体培养基 ，均为液态，不知道homiao要分离哪种支原体，需要哪种支原体?
1、培养 ：支原体的培养37℃即可，当然，初次培养37℃，5%-10%co2效果更好。其中，解脲支原体生长比较快，用我所培养基，接种量104- 105ccu，培养16-18h即可达到对数生长期。人型，肺炎，24-48h即可达到对数生长期。
2、鉴定：主要靠菌落染色、生化反应及特异性生长抑制试验等.
(1)Dienes菌落染色　　Dienes染色液：　　美蓝 2.5g　　天青-Ⅱ 1.5g 　　麦芽糖 10g 　　碳酸钠 0.5g 　　蒸馏水 100ml
染色时，直接吸染色液覆盖菌落，1min后，用生理盐水洗去染色液，低倍镜下可见支原体菌落呈蓝色，而其他菌菌落不着色。
(2)生化反应
根据不同采样部位及对底物的分解或者作为能源，可以鉴别不同支原体。
解脲支原 分解尿素不分解精氨酸，生成NH3使培养基的ph升高，酚红指示剂变红。
人型支原体分解L-精氨酸不分解尿素，生成NH3使PH值升高，酚红指示剂变红。
肺炎和人型支原体分解葡萄糖，使pH降低，酚红指示剂由红变黄。
(3)在含0.002%美蓝的培养基中肺炎支原体能生长且将美蓝还原而退色，其他口腔、唾液或发酵支原体均被抑制生长，此法可鉴定肺炎支原体。
(4)分子生物学鉴定
由于支原体的基因文库已建立，通过pcr扩增和基因探针技术可以对支原体进行鉴定。
如果要自己配制培养基，现提供几种配方：
基础培养基：Hayflick培养基(PPLO培养基)，牛心粉 50g 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 加14g琼脂粉为固体培养基
(1) 肺炎支原体培养基
基础培养基 70ml　　牛血清 (灭活) 20ml　　25%的酵母浸液 10ml　　50%葡萄糖 1-2ml 0.4　　酚红 0.5ml　　制霉素 0.001g　　青霉素 10万IU　　pH 7.8
(2)人型支原体培养基
基础培养基 70ml　　马血清 20ml 25%的酵母浸液 10ml　　30%L-精氨酸 0.33ml　　0.4%酚红 0.5ml　　制霉素 0.001g　　青霉素 10万IU　　pH 6.3
(3)解脲支原体培养基
基础培养基 70ml　　马血清 20ml　　25%的酵母浸液 10ml　　30%尿素0.33ml　　0.4%酚红 0.5ml　　制霉素 0.001g　　青霉素 10万IU 　　pH 6.0
注：由于支原体能在人工培养基上生长，但是营养要求较高，需要提供胆 固醇和酵母才能生长。以上配方中，马(牛).血清提供胆固醇，酵母浸液提供酵母。
编辑：songjiajie2010