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荧光光谱法检测乙肝病毒HBVDNA和凝血酶研究.pdf76页
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荧光光谱法检测乙肝病毒HBV．DNA和凝
血酶的研究
学位论文完成日期：
指导教师签字：
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青岛科技大学研究生学位论文
荧光光谱法检测乙肝病毒HBV-DNA和凝血
乙肝病毒是当前传染性很强的一种病毒，可引起慢性肝炎和肝硬化。因此，发
展一种高灵敏的和高选择性的检验乙肝病毒的方法成为热点课题之一。凝血酶是一
种常见的蛋白质，它在分子生物学中起着重要的作用，许多工作都致力于发展灵敏
度高的凝血酶传感器。核酸适体与靶分子之间分子的识别功能与抗体与抗原的识别
非常相似，作为一种新型的分子识别工具，可以与适配体作用的靶分子种类很多 包
括免疫原性弱及不具有免疫原性的物质和毒素 ，同时，核酸适体具有自身稳定性
强、易功能化修饰、变性复性快速、可逆标记和可作为优良的纳米器件等优点。因
此，核酸适体作为识别分子的分析技术得到迅速的发展。
本论文主要分为以下四个部分：
到溶液中，通过测定溶液的荧光强度来测定乙肝病毒 HBV-DNA 的浓度。考察了
缓冲溶液的种类、pH、反应时间等对反应体系荧光强度的影响，确定了最佳反应条
8．0，250mM
件：最佳缓冲溶液为TT缓冲溶液 pH
Tris．HCl，0．1％ V，Ⅳ Tween
min，DNA的最佳
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乙肝病毒DNA定量-HBV-DNA结果分析_乙肝大三阳
状态：就诊前
你父亲之所以的肝癌，主要原因还是乙肝病毒感染。座椅，目前很有抗HBV治疗的必要。另外，确实有传染性，但一般情况下，生活接触传染的几率并不大
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
状态：就诊前
（5月19日检查出乙肝大三阳（表面抗原、核心抗体及e抗体呈阳性）;5月30日彩超提示：肝实质回声不均、略增粗、增强，肝右叶回声略高，胆囊壁毛糙;5月30日肝功显示正常;5月30日甲胎蛋白+CEA+CA-199显示正常;5月30日乙肝病毒DNA定量-HBV-DNA显示5.79E+4IU/ml）---上述检查结果是2010年的事情，我爸得肝癌是2003年春天，金大夫您能肯定我父亲之所以的肝癌，主要原因是乙肝病毒感染的吗？这个很重要，望急回复。
乙肝病毒感染是引起肝癌的常见病因。建议你带父亲到专科医院请有关专家帮助你制订具体的治疗方案。肝癌发生已经很多年了，不明白为什么没有进行正规的内科治疗
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
状态：就诊前
金大夫：
您好！
我想您搞错了。我上面已经说了，我爸于2003年得肝癌，住院经药物介入治疗5个疗程康复。这之后每年都做肝功检查，及肝胆脾彩超检查无复发症状。
检出乙肝是近一个月的事，即日检查出乙肝大三阳（表面抗原、核心抗体及e抗体呈阳性）;随后于5月30日做彩超，结果：肝实质回声不均、略增粗、增强，肝右叶回声略高，胆囊壁毛糙;同时肝功化验显示正常，甲胎蛋白+CEA+CA-199化验显示正常，乙肝病毒DNA定量-HBV-DNA显示5.79E+4IU/ml
。医师鉴定为得过肝癌的肝正常表现，可能具有传染性，也不需要治疗，定期复查，平常注意点，尤其家有小孩。我想得到的帮助是：
就化验结果来看，上面医师所说对吗，我爸乙肝具有传染性吗，如果具有，需要治疗吗，需要治疗的话应选什么药，起居饮食需要隔离吗？非常感谢！
上面已经和你说过了，肝癌患者绝大多数病因是乙肝病毒，目前HBVDNA阳性且乙肝大三阳，并不会是近期感染，很可能爵士导致肝癌发生的原因。手术后为什么还不进行治疗。为什么要根据肝功是否正常才接受治疗。可以告诉你，肝癌患者的治疗是终生的。具体治疗方案请你一定到当地大医院请专家帮助你制订。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
状态：就诊前
谢谢，金大夫！！！
金瑞大夫通知停诊:本人九月29日至十月12日期间因故停诊。10月14日（周二）上午正常出诊
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:根据医院安排，9月8日（中秋节）周一上午本人增加一次门诊。尽量在8-10点期间就诊。
本人九月29日至十月12日期间因故停诊。10月14日（周二）上午正常出诊
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:本人九月29日至十月12日期间因故停诊。10月14日（周二）上午正常出诊
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:由于北京将召开APEC国际会议。根据医院要求，11月7日-12日放假。本人于11月2日（周日）补11月11日周二上午的门诊。请平日有咨询要求的病友朋友，可以选择11号上午就诊。根据患者少于平常。7号和11号放假不出门诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:由于北京将召开APEC国际会议。根据医院要求，11月7日-12日放假。本人于11月2日（周日）补11月11日周二上午的门诊。请平日有咨询要求的病友朋友，可以选择11号上午就诊。患者可能少于平常。7号和11号放假不出门诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:由于北京将召开APEC国际会议。根据医院要求，11月7日-12日放假。本人于11月2日（周日）补11月11日周二上午的门诊。请平日有咨询要求的病友朋友，可以选择2号上午就诊。患者可能少于平常。7号和11号放假不出门诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:由于身体原因，14日和18日暂不预约挂号。已经预约的有效。报歉！
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:由于本人身体原因，十一月十四号和十八号门诊限号。已停止电话预约挂号。已预约成功的仍然有效。尽量赶在上午十点之前就诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:根根据医院安排，元月2日（周五）上午本人出门诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:根根据医院安排，元月2日（周五）上午本人出门诊。元月4日（周日）上午出门诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:2月27日（周五）上午停诊。
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:4月3日（周五）停诊
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
金瑞大夫通知停诊:4月3日（周五）停诊;4月17日(周五）停诊
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
投诉类型：
投诉说明：（200个汉字以内）
金瑞大夫的信息
擅长治疗各型病毒性肝炎,脂肪肝,酒精性肝病,药物性肝病,肝炎肝硬化各种并发症(例出血,脾功亢进,腹水)肝癌等...
金瑞 北京佑安医院肝病消化中心主任医师 教授。
主要从事各型病毒性肝炎,脂肪肝,酒精性肝病,药物性肝病...
消化内科可通话专家
北京友谊医院
山东大学齐鲁医院
四川省第四人民医院
湘雅二医院
好大夫在线电话咨询服务目前我国有1.2亿人是乙型肝炎病毒携带者，乙肝患者约有1600万．乙肝病毒简称HBV，完整的HBV是由一个囊膜和一个含有DNA分子的核衣壳组成的病毒颗粒．乙型肝炎病毒的血清免疫学检查常检查下表中的五项指标（俗称“乙肝两对半”），请分析回答．序号检测对象中文名称相关物质及检出的意义1HBsAg表面抗原包绕在乙肝病毒最外层．单独的HBsAg无传染性2HBsAb表面抗体人体产生，保护肝脏3HBeAgE抗原乙肝病毒的“内部零件”，标志着乙肝病毒正在复制，有明显的传染性．4HBeAbE抗体表明病毒复制的终止或仅有低度复制，传染性消失或有轻微的传染性5HBcAb核心抗体乙肝病毒的“核心零件”（HBcAg）的抗体，它表示乙肝病毒在复制（1）人体产生HBsAb和&HBeAb的细胞是浆细胞，当得过乙肝且痊愈不久的病人再次感染乙肝病毒时，能够产生上述细胞的细胞是记忆B细胞，二次免疫应答的特点是又快又强．（2）在两对半检测中，如果出现1、3和5阳性即为“大三阳”．此时乙肝病毒处于正在复制状态，有（有/没有）显著的传染性．（3）上世纪六十年代初，美国遗传学家布卢姆伯格偶然从一位澳大利亚血友病患者血液中发现一种抗原，命名为“澳大利亚抗原”简称“澳抗”，后证明其为乙肝病毒的衣壳，因此获得了1977年的诺贝尔医学和生理学奖．根据所学知识，你认为澳抗的来源可能是HBV入侵肝细胞后留在细胞外的蛋白质外壳颗粒或HBV入侵的肝细胞裂解后未组装的过剩的蛋白颗粒．（4）乙肝的传播途径与艾滋病相似，主要的传播途径有性传播、血液传播、母婴传播等三条．艾滋病病毒主要攻击人体的T细胞．【考点】；．【分析】人体发生体液免疫时，产生抗体的细胞是浆细胞，再次感染相同的抗原时由于记忆细胞抗原迅速增殖分化为浆细胞产生大量的抗体．病毒是由蛋白质的外壳和核酸构成．【解答】解：（1）从表中可知HBsAb和HBeAb都属于抗体，人体产生抗体的细胞是浆细胞；得过乙肝且痊愈不久的病人再次感染乙肝病毒时，属于二次免疫，此时能产生浆细胞的细胞是记忆B细胞和B细胞，二次免疫的特点是抗体产生又快又强．（2）从表中可知，当出现3、5时病毒的蛋白质和DNA正大量合成，因而此时有显著的传染性．（3）在细胞免疫过程中，是效应T细胞与靶细胞密切接触，激活靶细胞内溶酶体酶，最终使靶细胞裂解死亡；由题中知：“澳抗”为乙肝病毒的衣壳蛋白，在乙肝病毒侵染细胞时，蛋白质外壳留在细胞外面，可成为澳抗的来源，乙肝病毒中有侵染性的是DNA．（4）乙肝的传播途径主要有性传播、血液传播、母婴传播．HIV病毒主要攻击人体的T细胞．故答案为（1）浆细胞&&&&&记忆B细胞&&&又快又强（2）正在复制&&&&&&&有（3）HBV入侵肝细胞后留在细胞外的蛋白质外壳颗粒（4）性传播、血液传播、母婴传播&&&&T【点评】本题主要考查免疫应答和病毒的结构，意在取暖迅速对相关知识点的识记、理解和运用．声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。答题：　难度：0.80真题：1组卷：0
解析质量好中差乙肝病毒DNA定量-HBV-DNA结果分析
男 | 30个月
时间： 22:48:54
健康咨询描述：
做肠镜前，化验出乙肝大三阳（表面抗原、核心抗体及e抗体呈阳性），经进一步化验、检查，医师鉴定为肝癌康复后的正常表现，可能具有传染性，也不需要治疗，定期复查，平常注意点，尤其家有小孩。
曾经的治疗情况和效果：
5月19日检查出乙肝大三阳（表面抗原、核心抗体及e抗体呈阳性）；5月30日彩超提示:肝实质回声不均、略增粗、增强，肝右叶回声略高，胆囊壁毛糙；5月30日肝功显示正常；5月30日甲胎蛋白+CEA+CA-199显示正常；5月30日乙肝病毒DNA定量-HBV-DNA显示5.79E+4IU/ml.病史:2003年得肝癌，经药物介入治疗5个疗程康复。之后每年都做肝功检查，及肝胆脾彩超检查无复发症状。
想得到怎样的帮助：就化验结果来看，上面医师所说对吗，我爸乙肝具有传染性吗，如果具有，需要治疗吗，起居饮食需要隔离吗？非常感谢！那位医师能帮我解惑？（感谢医生为我快速解答——该。）
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帮助网友：157702称赞：20916
病情分析：根据你的描述你上述情况属于乙肝病毒携带者，大三阳的问题，目前来说上述检查结果显示存在中等量病毒复制，的确存在传染性指导意见：上述情况的话，可以积极选择药物抗病毒治疗，并定期复查肝功能及乙肝病毒DNA，保持正常的话，是不需要担心的，平时养成良好的生活习惯，清淡饮食调节，避免刺激，辛辣，烟酒等食物调节好，应该没有问题的，你们家属的话，可以选择2对半检查看看，没有抗体的话，及时注射产生就行
我想再问一下，积极选择药物抗病毒治疗中药好还是西药好，哪样药物对副作用小，定期复查肝功能及乙肝病毒DNA，一般多长时间为好，乙肝病毒DNA是定量检查吗，定量结果多少为正常，是不超参考值范围吗，家属2对半检查指的是什么？谢谢！！！
06:12医生回答：
可以选择西药调理，拉夫米定还是不错的，积极增加抵抗力吧，一般来说复查的话，半年复查一次比较理想，身体存在不适时也应该及时就诊复查
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