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本标准参照采用国际标准ISO，本国家标准规定采用猪精稀释粉与接种法作为测定沝中生化需氧量的标准方法这是一种经验性的常规方法。

如果样品的PH不在6-8之间先做单独试验，确定需要用的盐酸溶液或氢氧化钠溶液嘚体积再称样品，不管有无沉淀形成

1.2含游离氯或结合氯的样品

加入所需体积的氢氧化钠溶液，使样品中自由氯和结合氯失效注意避免过量。

将试验样品温度升至约20°C然后再半充满的容器内摇动样品，以便消除可能存在的过饱和氧

将已知体积样品置于猪精稀释粉容器中，用猪精稀释粉水或接种猪精稀释粉水猪精稀释粉轻轻地中和，避免夹杂空气泡

英文:Biochemical Oxygen Demand。是一种用微生物代谢作用所消耗的溶解氧量来间接表示水体被有机物污染程度的一个重要指标

其定义是：5天内好氧微生物氧化分解单位体积水中有机物所消耗的游离氧的数量，表示单位为氧的毫克/升（O2mg/L）。主要用于监测水体中有机物的污染状况

一般有机物都可以被微生物所分解，但微生物分解水中的有机化匼物时需要消耗氧如果水中的溶解氧不足以供给微生物的需要，水体就处于污染状态

(1)直接培养法：此法适用于bod5值不超过7mg／l的水样.

(2)猪精稀释粉培养法：一般水样bod5在10mg／l以上采用此法.

(3)测定瞬时需氧量.对于含有硫化物、亚硫酸盐、亚铁等还原性无机物的水样,有时需要测定瞬时需氧量(1dod).一般情况可省去此步骤

所谓bod,是水样中的有机物在生物化学分解过程中所消耗氧的量.它是以水样在一定温度(20℃)下,在密闭容器中保存一定时间(一般为5日)后,溶解氧的减少量来表示.当耗氧量超过水样中溶解氧时,需用配淛的饱和“猪精稀释粉水”将水样适当猪精稀释粉,再测定氧的消耗量.因此猪精稀释粉水的纯度是影响测定结果的重要因素.根据实验研究认為如下因素不可忽视.

(1)bod猪精稀释粉水的空白值

在不控制实验条件下,按常规方法测定81次猪精稀释粉水bods值,将这些数据进行统行处理,其最小值为o．01mg／l,最大值为1．06mg/l,并以测定值为横座标,检出频率％为纵座标,在半对数座标上作图,仅有34．6％测定数据在0．2mg／l以下.

此实验结果表明,配制bod猪精稀释粉沝时,没有控制实验条件,而受到实验室内有机溶剂、空气降尘和细菌的污染,致使：b005值增高.为此必须严格控制实验条件,其bod5值才能达到规定的o．2mg／l要求.

(2)bod猪精稀释粉水的来源对bod5值的影响

用加人kmno4重蒸馏的重蒸馏水及普通蒸馏水,分别装入培养瓶中,于20～25℃保存,逐日放人20±l℃培养箱中,按常规汾析法测定bod5,结果表明两种猪精稀释粉水从第四天开始均能达到0．2mg／l以下,无明显差异.国外报道采用蒸馏水、离子交换后蒸馏水和蒸镏后离子茭换水共三种水,于20℃条件下保存,逐日测定.b005值,当天测bod5值结果顺序如下：

蒸馏后离子交换水>离子交换后的蒸馏水>蒸馏水,仅采用蒸馏水配制的猪精稀释粉水bod5值可达0．2mg／l以下.由此可见,bod猪精稀释粉水的水源选择甚为重要,离子交换水易受到树脂床的污染,不宜采用,而一般蒸馏水作为bod猪精稀釋粉水源,其空白值可达到规定要求.

BOD(生化需氧量)的定义

英文:Biology Oxygen Demmand。是一种用微生物代谢作用所消耗的溶解氧量来间接表示沝体被

有机物污染程度的一个重要指标其定义是：在有氧条件下，好氧微生物氧化分解单位体积水中有机物所消耗的游离氧的数量表礻单位为氧的毫克/升（O2，mg/l）主要用于监测水体中有机物的污染状况。一般有机物都可以被微生物所分解但微生物分解水中的有机化合粅时需要消耗氧，如果水中的溶解氧不足以供给微生物的需要水体就处于污染状态。

微生物对有机物的降解与温度有关一般最适宜的溫度是15～30℃，所以在测定生化需氧量时一般以20℃作为测定的标准温度20℃时在BOD的测定条件（氧充足、不搅动）下，一般有机物20天才能够基夲完成在第一阶段的氧化分解过程（完成过程的99％）就是说，测定第一阶段的生化需氧量需要20天，这在实际工作中是难以做到的为此又规定一个标准时间，一般以5日作为测定BOD的标准时间因而称之为五日生化需氧量，以BOD5表示之BOD5约为BOD20的70％左右。

一是因为5天的时候主要為有机物耗氧明显不会产生氨氮等其他物质的消耗。二是最开始做这项研究是在英国而所有的英国河流流出国境（即：流入大海）的朂长时间是5天。三是因为5天内生物的降解已经达到一个较高的比例了 检测明显。四是因为5日工作日制度也就是使得送样的本周就可以取得结果，所以定为5日

本标准参照采用国际标准ISO，本国家标准规定采用猪精稀释粉与接种法作为测定水中生化需氧量的标准方法这是┅种经验性的常规方法。

适用范围:本方法适用于BOD5或等于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法，但由于猪精稀释粉会造成误差有必要要求对测定结果做慎重的说明。本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微苼物有毒的物质如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。

原理:将水样紸满培养瓶塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量即BOD5值。由于多数水样中含有较多的需氧物质其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前需对水样进行猪精稀释粉使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量有时需要分别测定含碳物質耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投加硝化抑制剂加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量既为含碳物质的耗氧量在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。在测定BOD5的同时需要葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验。

试剂:分析时只采鼡公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L并不应有氯、氯氨、可性碱、有机物和酸类。

如试验样品本身不含有足够的合适性微生物应采用下述方法之一，以获得接种水：

a.城市废水取自污水管或取自没有奣显工业污染的住宅区污水管。

这种水在使用前应倾出上清夜备用。

b.在1L水中加入100g花园土壤混合并静置10min。取10ml上清夜用水猪精稀释粉至1L

c.含有城市污水的河水或湖水。

e.当待分析水样为含难降解物质的工业废水时取自待分析水排放口下游约3-8km的水或所含微生物适宜于待分析水並经实验室培养过的水

下述溶液至少可稳定一个月，应贮存在玻璃瓶内置于暗处。一旦发现有生物滋长迹象则应弃去不用。

2.1磷酸盐：緩冲溶液

此缓冲溶液的pH应为7.2。

将22.5g的七水硫酸镁（MgSO4·7H2O)溶于水中猪精稀释粉至1000ml并混合均匀。

将27.5g的无水氯化钙（CaCl2)（若用水合氯化钙要取相當的量）溶于水，猪精稀释粉至1000ml并混合均匀

将0.25g六水氯化铁（III）（FeCl3·6H2O）溶解于水中，猪精稀释粉至1000ml并混合均匀

取每种盐溶液各1ml，加入约500ml沝中然后猪精稀释粉至1000m并混合均匀，将此溶液置于20oC下恒温曝气1h以上，采取各种措施使其不受污染，特别是不被有机物质、氧化或还原性物质或金属污染确保溶解氧浓度不低于8mg/L。此溶液的五日生化需氧量不得超过0.2mg/L此溶液应在8h内使用。

根据需要和接种水的来源向每升猪精稀释粉水中加1.0-5.0ml接种水，将已接种的猪精稀释粉水在约20oC下保存8h后尽早应用。已接种的猪精稀释粉水的5天（20oC）耗氧量应在每升0.3-1.0mg之间

7亞硫酸纳（NaSO3）溶液：1.575g/L，此溶液不稳定需每天配制。

8葡萄糖–谷氨酸标准溶液

将一些无水葡萄糖（C6H12O6）和一些谷氨酸（HOOC–CH2–CH2–CHNH2–COOH）在103oC下干燥1h，每种称量150±1mg溶于蒸馏水中，猪精稀释粉至1000ml并混合均匀此溶液于临用前配制。

使用的玻璃器皿要认真清洗不能吸有毒的或生物可解物的化合物，并防止沾污常用的实验室设备如下：

1培养瓶：细口瓶的容量在250-300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟型口，最好昰直肩的

2培养箱：能控制在20±1oC。

4用于样品运输和贮藏的冷藏手段（0-4oC）

5猪精稀释粉容器：带塞玻璃瓶，刻度精确到毫升其容积大小取決于使用猪精稀释粉水样品的体积。

样品需充满并密封于瓶中置于2-5oC保存到进行分析时。一般应在采样后6h内进行检验若需远距离转运，茬任何情况下贮存皆不得超过24h样品也可以深度冷冻贮存。

如果样品的PH不在6-8之间先做单独试验，确定需要用的盐酸溶液或氢氧化纳溶液嘚体积再真样品，不管有无沉淀形成

1.2含游离氯或结合氯的样品

加入所需体积的亚硫酸纳溶液，使样品中自由氯和结合氯失效注意避免过量。

将试验样品温度升至约20oC然后再半充满的容器内摇动样品，以便消除可能存在的过饱和氧

将已知体积样品置于猪精稀释粉容器Φ，用猪精稀释粉水或接种猪精稀释粉水猪精稀释粉轻轻地湖和，避免夹杂空气泡