性生活时间短为什么？?？Rna

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-04-09 06:12 标签： 性生活时间越来越短

mRNA是hnRNA再删减去内含子形成的而hnRNA又昰DNA上某个目的基因转录而成的，所以mRNA显然要比DNA短小

但是没有说其他RNA一定比DNA短

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生物化学与生物物理进展 Prog．Bioch哪．Biophys． 1．2．3 钾5 mmol／L氯化镁的 shRNA表达载体构建．．s以I过夜酶切 mmo儿亚铁氰化钾，2 D—PBS1 pAvU6+27，核酸纯化法回收酶切产物后再用 g／LX—gal)1m1并在37℃温育过夜．次日 m1 X6ロI过夜酶切，核酸回收Cm处理，1％琼脂每孔加入2 D—PBS润洗在倒置显微镜下观察 糖电泳鉴定．将1．2．2中经磷酸化的shIⅢADNA双细胞，并估计蓝色细胞(p．gal阳性)的比例．每孔 链与具．s以I及x60 随机计数100个细胞共计数6个培养孔．以上过 I粘末端的pAVu6+27载体用 T4 DNA连接酶过夜连接，连接产物转化DH50【感 程独竝重复3次p—ga邯日性细胞占总细胞百分比 受态细菌，氨苄青霉素(100g／L)LB平板抗性筛选．的平均值代表该细胞株的转染效率． 1．3．4干扰质粒的脂質体转染．采用6孔板或 次日挑取阳性克隆在含氨苄青霉素(100∥L)的 35 LB培养基中250r／min37℃震荡培养14～16h，小 I 量提取质粒随后用X^oI及B伽H37℃双酶切 6h，2％琼脂糖电泳鉴定．阳性克隆载体送上海生工 s仃eptomycinPS)培养．0．25％胰酶用于消化细胞， 常规计数、冻存数码荧光倒置显微镜01yIIlpus h后 Ix71用于细胞形态观察并攝像． 1．3．2转染条件的优化．pCMVp．gal质粒可用于监 测转染条件、确定转染效率及作为荧光素酶活性检 两者比例为1：8， 转染组均用 测的内参使用．转染前对髓怼93H、HeLa细胞psh—pGL3， 株的转染条件进行优化即确定最佳脂质体试剂和 性检测依据Luciferase DNA的量．转染前一天，胰酶消化并计数细胞 Assay 24孔板接种，使其在转染日密度为85％～90％．对程序pCMVp．gal分析同上． OPTI．MEM 1．4 于每孔细胞，分别使用50¨1 I培养基 RNAi的半定量RT．PCR检测 收获预定时间点的培养細胞用T地01提取

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