临床上哪些疾病诊断证明书的辅助诊断手段采用ELISA方法

内容提示:MDRV+S基因组序列分析及σCELISA診断方法的建立

文档格式:PDF| 浏览次数:1| 上传日期: 03:01:02| 文档星级:?????

天津医科大学 硕士学位论文 骨Ⅰ型胶原羧基端降解产物ELISA方法建立与应用 姓名:孙云 申请学位级别:硕士 专业:免疫学 指导教师:姚智 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的:骨I型胶原的降解产物是骨吸收的特异性指标我们选用人工合成I型胶 原仅1链C末端8肽序列为监测标记,建立了测定尿中成熟I型胶原降解产物 (CTX)的固相酶联免疫方法通过测定其在尿液中的浓度来反映骨吸收的状 况,应用于代谢性骨病和骨质疏松的临床诊断、观察治疗效果并可用于骨代 谢的基础研究。本研究中建立的ELISA方法在国内尚无该类检测产品问世。 并且分析其同I型胶原氨基端产物(NTX)测定方法的相关性并评价其临床检 测意义。 方法:首先在分析I型胶原C端结构的基础上人工构建合成具有半抗原性质 的短肽。采用碳二亚氨(EDC)将其与载体蛋皛偶联采用背部皮下注射的方法 免疫兔子。在白兔血中抗体含量峰值时提取抗血清,获得多克隆抗体依据 竞争性抑制原理,建立酶聯免疫检测方法测定尿液中的游离I型胶原羧基端 降解后产物。该方法可以定量的检测尿中CTX的含量并用尿肌酐值校正。 结果:1.本法灵敏度80u g/L组内变异系数5.2%,组间变异系数9.6%本研 究通过测定238例不同年龄、性别个体的尿中I型胶原的降解产物含量,并与 性比较相關性较好(R=0.5-0.7)。 2.应用本检测方法观察了300例不同年龄段人群尿中I型胶原的降解产物 的含量结果表明:尿中CTX/Cr比值随年龄增长而下降。儿童阶段2—3岁含量 最高此后随年龄增长比值下降,在14—16岁时达到最高值而后下降,20—30 岁和30-40年龄段含量基本相等绝经期妇女尿中CTX含量有┅增高趋势,但 不显著绝经期后妇女尿中CTX含量降低,与绝经前年龄组的CTX含量比较没 有统计学意义 代谢的主要形式,前胶原在细胞外的斷裂的多肽物是观察骨代谢的直接实验指 天津医科大学硕士学位论文 标测定其C一端降解产物是一种有效的骨吸收评价指标。本试验建立測定尿中 CTX的ELISA方法在国内尚未见报道。 研究结果显示此测定方法同N端降解产物的免疫检测方法具有较好的相 关性证明应用人工合成多肽ELISA法,测定尿中CTX的含量方法经济、简 便、重复性好,是一种理想的测定骨吸收值的临床新手段 同时,本研究结果表明14岁以前的骨吸收及骨转换的速度最快是骨形成 与吸收重要时期。青春期后至成年期骨转换率下降 关键词:骨吸收 I型胶原I型胶原羧基交联肽酶联免疫检测骨质疏松 Ⅱ 天津医科大学硕士学位论文 Abstract of

我要回帖

更多关于 疾病诊断证明书 的文章

 

随机推荐