尿绒毛膜促性腺激素检查与临床意义
尿绒毛膜促性腺激素检查与临床意义
　　【摘要】探讨尿绒毛膜促性腺激素检查方法及临床意义。免疫学方法简便、快速、灵敏、特异性强。人绒毛膜促性腺激素(hCG)可用于早孕诊断。正常育龄妇女hCG升高提示早孕。作为绒毛膜上皮细胞癌、葡萄胎的早期诊断指标。可用于对绒毛膜上皮细胞癌、葡萄胎手术后化疗效果观察，是有效随访监测的手段。
　　【关键词】尿绒毛膜促性腺激素;临床意义;检查
　　血液和尿液hCG检测方法非常多，如酶联免疫吸附试验(ELISA)、电化学发光免疫试验、放射免疫试验、乳胶凝集抑制试验、血凝抑制试验等。而目前临床上应用最为普遍的是尿液的单克隆抗体胶体金试验[1]。对2012年～2013年检测100例尿绒毛膜促性腺激素临床检查及临床意义。
　　一、资料与方法
　　1.1 一般资料 对2012年1月～2013年12月尿绒毛膜促性腺激素检测100例。均为女性，年龄22～46岁，平均28岁。尿液以r/min离心10min。晨尿hCG水平最高，接近血清水平，通常收集晨尿送检。
　　1.2 方法 酶联免疫吸附法，包被固相载体用的&-hCG基McAb。根过氧化物酶(HRP)标记的&-hCG基的McAb。在HRP反应体系中作底物(供氢体)的四甲基联苯胺(TMB，目测呈兰色或邻苯二胺(OPD，呈现黄色)。在已包被抗&-hCG亚基McAb的聚乙反应板微孔中加最适浓度(说明书指定)酶标记抗&-hCG亚基McAb 0.1ml，立即加尿或血清0.1ml。轻轻抖动反应板，或于混匀器上混匀30s，再置37℃20min。甩去孔内反应物，以蒸馏水冲洗6次，晾干。加底物溶液0.1ml，室温放置5min，观察。蓝色(底物为TMB-H2O2时)或黄色(底物为OPD-H2O2时)为阳性，无色为阴性。如需定量，可同时做一标准系列浓度，结果以IgC对吸光度值作图，待测样本浓度可从曲线中查出。
　　二、结果
　　HCG&5mIu/mL18例，HCG 5.1～2000mIu/ml58例，HCG mIu/ml23例， mIu/mL1例。
　　三、讨论
　　HCG检测的方法早期应用生物学检测，目前正被简便、快速、灵敏、特异性强的免疫学方法代替。胶乳凝集抑制试验(LAT)以HCG作为抗原注入兔子体内，使其产生相应抗体，当这种抗体与HCG抗原相遇时发生免疫反应，但此反应不能为肉眼所见。利用化学方法将HCG抗原交联在聚苯乙胶乳颗粒上，制成HCG胶乳抗原，此胶乳抗原与HCG抗体结合，产生肉眼可见的胶乳颗粒状凝集。本法操作简便、价格便宜、快速(5min)、试剂易得[2]。但因灵敏度低(100～500IU/L)、特异性不高而趋淘汰。单克隆双抗体酶免疫法首先将&-HCG单抗包被聚乙酶标板小孔底部，加入被检尿液(或HCG的标准品)，被检样品中HCG抗原与包被在小孔底部的抗体结合，再加入特异性的酶标&-HCG抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。洗去过量的未结合酶标抗体，加入酶作用底物及显色剂显色，颜色的深浅与被检尿液中HCG含量成正比。此法灵敏度(20～50IU/L)高，可定量，临床常用，适合批量检测。不足是操作较复杂，所需时间较长。单克隆抗体胶体金标记免疫层析法，在试带(纤维素膜)的特定位置，分别包被羊抗鼠IgG抗体、羊抗人HCG抗体，呈上下两条线排列;另外试带上还含有均匀分布的胶体金标记人&-HCG单抗、胶体金标记的鼠IgG抗原。检测时将试带浸入被测尿液后迅速取出，由于层吸作用，尿中的HCG抗原先与胶体金标记的人&-HCG单抗结合，移行至特定位置即羊抗人HCG抗体检测线时，形成金标记&-HCG单抗-&-HCG抗原D羊抗人HCG抗体的双抗体夹心式复合物，试带即显1条紫红色线为阳性;同时金标记鼠IgG抗原随尿上行至羊抗鼠IgG抗体时，形成金标记鼠IgG抗原与羊抗鼠IgG抗体复合物，试带也显1条紫红色线，为阴性对照即质控线。本法简便快速(1～15min)、特异性强、灵敏度高(10～25 IU/L)，可半定量，在受精后7～10d即可作出诊断，故临床应用广泛。试带显红色是由于胶体金的作用，胶体金是氯化金与还原剂反应形成的一种胶体颗粒，其表面带有负电荷，能吸附带正电荷蛋白质，被吸附在胶体金颗粒表面的蛋白质(抗体)活性不会改变，它的颜色随颗粒大小呈红色到紫色变化[3]。放射免疫用闪烁计数器测定，灵敏度可达&21U/L，如果用于血清中HCG含量的测定，其结果比尿液标本更准确、更稳定。由于放射免疫测定需放射性核素标记，且放射性核素易污染环境，所需时间长(2h)，本法只适用于研究工作，临床不常用。
　　妊娠后尿液hCG浓度增高，一般妊娠后35～40天时，hCG浓度可达到200ng/L以上，常用的尿hCG检查即可得到阳性结果。滋养层细胞肿瘤如葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮细胞癌患者尿中hCG含量明显高于正常孕妇;滋养层细胞肿瘤治疗后，尿内hCG含量明显下降。流产诊断和监察，自然或非自然原因终止妊娠后，检测结果仍然提示弱阳性，先兆流产和不全流产呈阳性。完全流产呈阴性。诊断异位妊娠和宫外孕：hCG多为阳性，宫外孕破裂后大部分患者转为阴性。非滋养层肿瘤如畸胎瘤、睾丸间质细胞癌、卵巢癌、子宫颈癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、肺癌同样会引起hCG浓度增高，因此检测结果必须由医生综合其他临床症状及其他实验室指标后方可进行综合分析鉴别。
　　采集hCG阳性且尿蛋白定性为阴性的尿液3～4份，混合后存放在4℃冰箱内保存过夜。取出后离心，取上清液以化学交联抗原和配套的抗血清做稀释试验，测定hCG的效价。按所测定效价低1倍的稀释度为准，以生理盐水稀释尿液到此浓度，作为阳性对照质控物。每批试验应该设定阳性和阴性对照，对照试验达到预期的结果时才能使用该批号尿试带，进行检测和签发报告。阳性对照也可采用质控液。每份尿液最好做双份检查，即以原浓度尿液和倍量稀释后的尿液同时检查，两者同为阳性时为真阳性，可发结果;原浓度阳性，稀释尿液为阴性时，可能为弱阳性反应或促黄体生成激素(LH)增高等引的假阳性反应。
　　[1] 郎江明.临床免疫诊断学.广州：广东科学技术出版社，8.
　　[2] 张迎春，贾翠英，王娟.血清&-HCG检测异位妊娠的诊断意义.放射免疫学杂志，)：167.
　　[3] 林敏.人绒毛膜促性腺激素检测及临床应用.检验医学与临床，1-282.
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<div class="ds-thread" data-thread-key="608778" data-title="尿绒毛膜促性腺激素检查与临床意义" data-image="">& β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)测定
β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)测定
　　β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)：绒毛膜促性腺激素(HCG)αβ，由合体滋养细胞合成。分子量为36700的糖蛋白激素，由α，β两个不同亚基组成，α亚基与垂体分泌的FSH（卵泡刺激素）、LH（黄体生成素）和TSH（促甲状腺激素）等基本相似，故相互间能发生交叉反应，而β亚基的结构各不相似。　　β-HCG于β-LH结构相近，但最后24个氨基酸延长部分在β-LH中不存在。所以在临床应用β-HCG亚基的特性做特异抗体用作诊断以避免β-LH的干扰。HCG在受精后第6日开始分泌，受精后第7日，就能在孕妇血清中和尿中测出，可用于早期妊娠的诊断。至妊娠8~10周血清浓度达到高峰，约50-100kU/L，持续10日后迅速下降，中、晚妊娠时血浓度仅为高峰时的10%，持续至分娩，一般于产后1-2周消失。1）但α-亚单位为垂体前叶激素所共有。2）β-亚单位是人绒毛膜促性腺激素所特异的。 完整的人绒毛膜促性腺激素全部是由胎盘绒毛膜的合体滋养层产生。
血清0.4ml、冷藏（2~8°）
< 5.00IU/L化学发光法
HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义，对与妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。 1、诊断早期妊娠：孕后35～50天HCG可升至大于2500 IU/L。60～70天可达80000 IU/L，多胎妊娠者尿HCG常高于一胎妊娠。 2、异常妊娠与胎盘功能的判断： ① 异位妊娠：如宫外孕时，本试验只有60%的阳性率，在子宫出血3天后，HCG仍可为阳性，故HCG检查可作为它与其它急腹症的鉴别。HCG常为312～625 IU/L。 ② 流产诊断与治疗：不完全流产如子宫内尚有胎盘组织残存，HCG检查仍可呈阳性；完全流产或死胎时HCG由阳性转阴性，因此可作为保胎或吸宫治疗的参考依据。 ③ 先兆流产：如尿中HCG仍维持高水平多不会发生难免流产。如HCG在2500 IU/L以下，并逐渐下降，则有流产的或死胎的可能，当降至600 IU/L则难免流产。在保胎治疗中，如HCG仍继续下降说明保胎无效，如HCG不断上升，说明保胎成功。④ 在产后4天或人工流产术后13天，血清HCG应低于1000 IU/L，产后9天或人工流产术后25天，血清HCG应恢复正常。如不符合这一情况，则应考虑有异常可能。 3、滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测 ① 葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌及睾丸畸胎瘤等患者尿中HCG显著升高，右可达10万到数百万IU/L，可用稀释试验诊断如妊娠12周以前1：500稀释尿液呈阳性，妊娠12周以后1：250稀释尿液呈阳性，对葡萄胎诊断有价值。1：100～1：500稀释尿液呈阳性对绒毛膜癌也有诊断价值，如男性尿中HCG升高，要考虑睾丸肿瘤如精原细胞癌、畸形及异位HCG瘤等。 ② 滋养层细胞肿瘤患者术后3周后尿HCG应&50 IU/L，8～12周呈阴性；如HCG不下降或不转阴，提示可能有残留病变，这类病例常易复发，故需定期检查。 4、其它更年期、排卵及双侧卵巢切除术均可致黄体生成素升高，因LH与HCG的α肽链组成相同而使采用抗HCG抗体的妊娠试验阳性，此时可用β～HCG的单医学教育 网收集 整理克隆二点酶免疫测定鉴别。内分泌疾病中如脑垂体疾病、甲状腺功能亢进、妇科疾病如卵巢囊肿、子宫癌等HCG也可增高。近年来发现恶性肿瘤如畸胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等血中HCG也可升高，因此将HCG看作是癌标志物之一。但必需结合临床情况及其它检查结果综合分析结果综合分析判断。
1、育龄妇女如有停经，常先查尿HCG，如测试为阳性，应做B超检查确定是否宫内妊娠，排除异位妊娠，并做相应处理。 2、如疑为异位妊娠、葡萄胎、绒毛膜癌、宫内死胎、先兆流产等，应查B超及相应检查，必要时动态观察血β～HCG明确诊断，并在妇产科医师指导下进行处理。 3、如疑为生殖胚胎细胞肿瘤，可查血HCG，AFP、LDH等肿瘤标志物及做相关的影像学等检查。
一、抽血前的注意事项1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。2、体检前一天的晚八时以后，应开始禁食12小时，以免影响检测结果。3、抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩，增加采血的困难。二、抽血后应注意1、抽血后，需在针孔处进行局部按压3-5分钟，进行止血。注意：不要揉，以免造成皮下血肿。2、按压时间应充分。各人的凝血时间有差异，有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫，可能会因未完全止血，而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些，才能完全止血。如有出血倾向，更应延长按压时间。3、抽血后出现晕针症状如：头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水，待症状缓解后再进行体检。4、若局部出现淤血，24小时后用温热毛巾湿敷，可促进吸收。三、检验前请告知医生近期用药情况及特殊生理改变。
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通用名：人绒毛膜促性腺激素（&-HCG）快速定量检测试剂盒（胶体金法）
商品名：H-SPOT
英文名：Diagnostic Kits for Rapid quantitative Determination of
human choriogonadotropin (&-HCG) by DIGFA method
1、早孕的诊断及早期胚胎发育的监测；
2、保胎和流产时HCG定量检测的重要意义；
3、 宫外孕的辅助诊断；
4、 HCG定量检测对滋养层疾病的诊断与跟踪；
5、HCG定量检测可用于滋养层疾病的疗效观测及预后判断；
6、HCG定量检测可作为肿瘤标志物的应用。
Qpad和U-touch
1.&尿液标本：尿液标本应经过滤预处理，个别尿液过滤后背景仍呈不同程度红色，绝不能报阳性结果，可在冰箱冷却后再过滤。
2.&血清标本：新鲜血清标本不需预处理，冰冻或4~8℃存储血清应离心后取上清使用，以确保背景白。严重溶血或脂质血会使背景呈红色，使定量结果偏高，不宜使用。
HCG& (mIU/ml)
HCG& (mIU/ml)
100～10000
摘自：Clinical Laboratory Guide to Test. Edited, Norbert W.Tietz, Third Edition, W.B.Saunders Company,
&1995,Philadelphia
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