时间分辨荧光免疫荧光定量定量检测报告单

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时间分辨荧光免疫分析技术
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目录1 拼音shí jiān fēn biàn yíng guāng miǎn yì cè dìng2 英文参考timeresolvedfluorescenceimmunoassay,TR-FIA3 概述以常用作为标记物的测定往往受成分、试管、仪器组件等的本底荧光,以及激发光源的杂射光的影响,使受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定(timeresolvedfluorescenceimmunoassay,)是针对这缺点加以改进的一种新型技术。
4 时间分辨荧光免疫测定的基本原理时间分辨荧光免疫测定的基本原理是以铕(Eu)螯合物作荧光标记物,利用这类荧光物质有长荧光寿命的特点,延长荧光时间,待短寿命的本底荧光完全后再行测定,所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光,从而有效地消除非本底荧光的干扰。TR-FIA的测定原理见图17-4。以双夹心法为例的测定见图17-5。其中增强液的是使荧光信号增强。因为免疫反应完成后,生成的-抗体-铕标记物复合物在弱碱性中,经激发后所产生的荧光信号甚弱。在增强液中可至pH2~3,铕很容易解离出来,并与增强液中的β-二生成带有强烈荧光的新的铕螯合物,大大有利于荧光测量。
图17-4 TR-FIA测定原理示意图
图17-5 双抗体夹心法TR-FIA反应程序示意图
时间分辨荧光免疫测定使用的仪器
时间分辨荧光免疫测定所用检测仪器为时间分辨荧光计,与一般的荧光分光光度计不同,采用光源(每秒闪烁1000次的氙灯),照射后即短暂熄灭,以设备延缓时间,待非特异本底荧光衰退后,再测定样品发出的长镧系荧光。检测灵敏度可达0.2~1ng/ml。相关文献
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时间分辨荧光免疫定量检测报告单
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HBsAg124.310ng/ml
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HBeAg1.470NCU/ml
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