肝癌多药耐药细胞株和细胞系HepG2/ADM如何建立?

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贡献者:gaomin0312
分类:药学
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内容简介:
自杀基因系统与重组 TNFα 联合杀伤肿瘤细胞
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nginx/1.4.1人肝癌HepG2/5-Fu耐药细胞株多药耐药与凋亡关系的研究--《中国现代医学杂志》2007年21期
人肝癌HepG2/5-Fu耐药细胞株多药耐药与凋亡关系的研究
【摘要】:目的探讨耐药株人肝癌细胞HepG2/5-Fu的耐药机制及耐药与细胞凋亡的关系。方法检测HepG2/5-Fu细胞株对不同抗肿瘤药物的敏感性,流式细胞仪分析HepG2/5-Fu细胞在5-Fu作用的凋亡情况以及对5-Fu的耐受分析,RT-PCR分析HepG2/5-Fu细胞株中凋亡相关基因p53、bcl-2、bcl-xl、bax等基因的表达情况。结果HepG2/5-Fu细胞与HepG2细胞相比除对5-Fu耐药外,对其它几种常用化疗药均有不同程度的耐药性。HepG2细胞中未经5-Fu处理的对照组、30μmol/L5-Fu组及150μmol/L5-Fu组的凋亡指数与对照组相比,凋亡分别增加了1.2倍和2.1倍,差异具有显著性(P0.05)。而经同样浓度5-Fu处理的HepG2/5-Fu细胞与其对照组相比,细胞凋亡变化不明显。经30μmol/L和150μmol/L5-Fu处理后,HepG2细胞与其对照组相比,呈现明显的G0/G1期增加,S期、G2/M减少,而HepG2/5-Fu细胞与其对照组相比细胞周期未见改变。PCR分析发现:与HepG2细胞相比,HepG2/5-Fu细胞耐药株bcl-xl、bcl-xs和bax的表达增高,而p53和cpp32的表达减少,特别是p53基因,表达明显减少。在人肝癌细胞HepG2和HepG2/5-Fu细胞mRNA水平均没有检测到bcl-2的表达。结论wtp53基因的突变与肝癌细胞的细胞周期的改变、耐药性的产生相关,是肝癌细胞HepG2/5-Fu产生多药耐药性的机制之一。
【作者单位】:
【关键词】:
【分类号】:R735.7【正文快照】:
原发性肝癌是我国恶性肿瘤死亡的主要原因之一,位于第2位,仅次于肺癌。虽然肝脏移植术、肝癌切除术及术后化疗药物的发展大大的改善了原发性肝癌的临床疗效[1],但原发性肝癌患者的5年生存率仍然低于50%,术后容易复发,且大部分患者在就诊时已经属于中晚期,丧失了手术治疗时机。
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京公网安备74号扶正祛邪含药血清对白血病耐药细胞株HL60/VCR细胞凋亡率的影响--《中华中医药学会第二届岐黄论坛——血液病中医药防治分论坛论文集》2014年
扶正祛邪含药血清对白血病耐药细胞株HL60/VCR细胞凋亡率的影响
【摘要】:目的:观察扶正祛邪中药复方含药血清对长春新碱诱导的急性早幼粒白血病耐药细胞株HL60/VCR细胞凋亡率的影响。方法:采用流式细胞术检测法,选择HL60/VCR细胞为靶细胞,观察不同浓度扶正祛邪含药血清对其凋亡率的影响。结果:经扶正祛邪含药血清处理的HL60/VCR细胞的凋亡率明显高于对照组,扶正祛邪含药血清高、中、低三个剂量间两两比较具有极显著差异(P0.001),以高剂量组最明显。结论:经扶正祛邪含药血清处理的HL60/VCR细胞凋亡率明显增加,说明扶正祛邪含药血清对白血病HL60/VCR耐药细胞的耐药逆转作用可能是通过诱导其凋亡而实现的。
【作者单位】:
【关键词】:
【基金】:
【分类号】:R733.7【正文快照】:
白血病多药耐药(multidrug resistance,MDR),是指白血病细胞同时对多种结构和不同作用机制的抗肿瘤药物产生耐受性,即白血病细胞对细胞毒药物失去敏感性,限制了抗肿瘤药物的疗效,是白血病化疗失败和白血病复发的主要原因[1]。寻找低毒、有效、多作用靶点的白血病多药耐药逆转
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DJ-1 shRNA表达载体的构建及其稳定转染人肝癌细胞HepG2细胞株的建立
发布时间:
【题 名】DJ-1 shRNA表达载体的构建及其稳定转染人肝癌细胞HepG2细胞株的建立
【作 者】刘顺芳 刘谨文 易继林 杨志芳 殷茜 李兴睿
【机 构】华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科 武汉430030
【刊 名】《中华实验外科杂志》2011年 第8期 页 共3页
【关键词】DJ-1 RNA干扰 癌,肝细胞
【文 摘】目的构建DJ-1 shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的人肝癌HepG2细胞株。方法合成DJ-1基因干扰序列,定向插入真核表达载体pGenesil-1质粒并测序鉴定;干扰质粒经脂质体介导转染人肝癌HepG2细胞,G418(450mg/L)有限稀释法持续筛选8周后,扩增获得稳定转染的细胞株;荧光显微镜观察转染扩增效率;逆转录.聚合酶链反应(RT—PCR)和Westernblot检测稳定转染细胞株的DJ-1 mRNA和蛋白的表达。结果测序证明DJ-1干扰序列及读码框完全正确,G418筛选后扩增细胞中稳定转染扩增百分率高达75.00%。稳定转染细胞DJ-1 mRNA表达下调,DJ-1蛋白抑制率为98.78%(P〈0.05)。结论成功构建DJ-1 shRNA真核表达载体,DJ-1 shRNA质粒稳定转染HepG2细胞株的建立,为以DJ-1基因为靶点的人肝癌基因研究提供实验基础。
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