君，已阅读到文档的结尾了呢~~
介绍黄芩苷的最佳提取方法。
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
黄芩苷提取工艺的研究
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口不同浓度溶剂对黄芩苷提取效率的研究_文档库
文档库最新最全的文档下载
当前位置： & 不同浓度溶剂对黄芩苷提取效率的研究
不同浓度溶剂对黄芩苷提取效率的研究
临床医学医学信息2013年9月第26卷4(中)MedicalInformation.Sept.2013.Vol.26
不同浓度溶剂对黄芩苷提取效率的研究
(南京中医药大学，江苏南京210023)
摘要：目的本文主要通过选取不同类型的溶剂，采用一定的方法提取黄芩苷并通过高效液相色谱仪测定其含量，从而优选出产率最高的溶剂类型，优选出黄芩苷提取率最高的提取溶剂。方法采用HPLC，测定不同类型溶剂通过回流法提取黄芩中黄芩苷的收率。结果黄芩经不同浓度乙醇提取后经测定使用70%的乙醇提取效果最好。结论在实际生产中，依照GMP的要求，可以使用70%的乙醇提取黄芩，从而提高产品质量。关键词：黄芩苷；提取溶剂；高效液相色谱法
StudyontheSolventsinExtractionofFlavonoidsfromScutellaria
(NanjingMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu210023,China)
Abstract：Objective:Thepurposeistostudytheextractionprocessofradixscutellariae.Method:TodeterminetherateofbaicalinfromthedifferenttypeofextractingsolventbyHPLC.Results:Thebesteffectofextractionprocessisby70%ethanol.Conclusion:Inthepraxisproduce,canusethe70%ethanoltoextractthescutellariaundertheinstructionofGMP,andimprovethequalityofproduct.
Keywords：ScuteUariabaicalens；Solvent；Highperformanceliquidchromatography(HPLC)
黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根[1]，它的主要有效成分为黄酮类化合物。现代药理研究表明，黄芩的药理作用主要来自于黄芩苷[2]，因此，黄芩中黄芩苷的提取是各类黄芩制剂制备和药理学研究的关键环节。本人综合分析了前人所做的相关研究，决定对黄芩提取过程中的溶剂进行单因素实验，并以黄芩苷为指标，采用HPLC的方法进行检测，旨在为生产实践中大规模提取黄芩苷提供理论依据。1仪器与试剂
1.1仪器岛津LC-20AT型高效液相色谱仪，恒温水浴锅（北京科伟永兴仪器有限公司），药材粉碎机，AE-240双量程分析电子天平（梅特勒-托利多上海有限公司），量瓶，烧杯等。1.2试剂黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所），乙醇（分析纯），磷酸（分析纯），甲醇（色谱纯）1.3药材黄芩，取自贵州汉方制药基地，经鉴定为唇形科植物黄芩。2方法与结果
2.1提取溶剂的选择分别用水，30%、50%、70%、90%浓度的乙醇提取[3]黄芩。提取后过滤，定容，按2.2的方法进行测定。
2.2色谱条件以18烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶磷酸=47∶53∶0.2为流动相；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2500[4]。2.3溶液制备
2.3.1对照品溶液的制备取在60℃减压干燥4h的黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成含60ug/mL的溶液，即得。
2.3.2供试品溶液的制备取黄芩中粉0.3g，精密称定，加乙醇40mL，加热回流3h，放冷，滤过，滤液置100mL量瓶中，用提取溶剂洗涤容器和残渣，洗液收稿日期：
滤入同一量瓶中，用甲醇定容，精密量取1mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.4线性关系考察精密吸取上述对照品溶液0.5uL、1uL、2uL、4uL、6uL、8uL、10uL，照上述色谱条件测定峰面积。以峰面积A为纵坐标，黄芩苷质量m为横坐标得线性回归方程：A=0602，（相关系数）=0.99998。表明在0．ug范围内黄芩苷质量与峰面积呈良好的线性关系。
2.5样品测定精密称取黄芩中粉0.3g，按2.3.2中“供试品溶液的制备”方法采用水和不同浓度乙醇进行提取，制得供试品溶液，精密吸取10uL，进样，测定黄芩苷含量，见表1。
不同提取溶剂提出的黄芩苷含量
水30%乙醇50%乙醇70%乙醇90%乙醇黄芩苷含量（%）
7.98.79.211.09.4
由2.5样品含量测定可知，用水提取黄芩效果最差，而采用70%的乙醇提取黄芩苷提取率最高。并且所得结果符合2010版药典规定的≥9.0%。
参考文献：
[1]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出社,2005:64.
[2]韩鲁佳,阎巧娟,江正强,等.黄芩苷提取分离方法及工艺研究[J]．农业工程学院学报,):200-203．
[3]程齐来,黄志勤,杨韶平.黄芩苷提取工艺中提取溶剂的研究[J].时针国医国药,.[4]佐发．黄芩的药理作用及临床应用[J]．时珍国医国药,.
结肠镜治疗急性阑尾炎的疗效探究
（临川区桐源乡卫生院，江西抚州344112）
摘要：目的探讨结肠镜治疗急性阑尾炎的疗效。方法本研究选取2011年1月~12月在我院就诊的90例急性阑尾炎患者进行临床研究。结果结肠镜治疗组患者的各项临床指标均显著优于手术治疗组和内科治疗组患者，三组患者临床治疗效果对比统计学差异明显（P<0.05）。结论由本次临床研究结果可见，结肠镜治疗急性阑尾炎具有较为满意的临床治疗效果，且治疗的可靠性和安全性较高，因而具有较高的临床应用价值。关键词：结肠镜；急性阑尾炎；临床疗效
本次临床研究对结肠镜治疗急性阑尾炎的临床疗效进行了分析，现将本次临行研究结果报道如下。1资料和方法
1.1一般资料本研究选取2011年1月~12月在我院就诊的90例急性阑尾炎患者为观察对象，男性46例，女性44例，患者年龄范围在18~72岁，平均（45.3±13.5）岁。所有患者均无慢性阑尾炎史，且无心脏病、肝脏病等脏器疾病。利用随机分组法将其分为内科治疗组、手术治疗组和结肠镜治疗组，每组30例，且两组患者各项临床资料对比无明显的统计学差异（P>0.05）。
1.2纳入和排除标准纳入标准：所有患者均接受体征、临床症状、病史和其他辅助检查。患者上腹部均存在疼痛症状，并逐渐向脐部转移，腹痛发生6~8h后向右下腹部转移。B超检查显示阑尾直径大于7mm，且压迫无法缩小，则可确诊为阑尾炎。患者腹部较为软平，无膈下游离气体和腹肌紧张。中性粒细胞和白细胞计数比例正常或增高。结肠镜检查显示阑尾出有脓苔或粪石，且阑尾开口处较为红肿。彩色多普勒超声检查发现，阑尾处急性坏疽性病变患者血流显著减少；急性化脓性阑尾炎和急性单纯性阑尾炎患者，阑尾壁有充血现收稿日期：
象，且血流信号较为丰富。
排除标准：①阑尾穿孔且膈下出现游离气体的患者；②彩超检查发现阑尾壁彩色血流消失或是显著减少，则确诊为急性坏疽性阑尾炎；③腹部有明显肌紧张、反跳痛和压痛的患者。
1.3方法所有患者及其家属均对治疗方法完全知情，并同意接受治疗。内科保守治疗组患者接受头孢西丁及甲硝唑补液、抗炎治疗。手术治疗组急性阑尾炎患者均接受开腹阑尾切除手术治疗。肠镜治疗组患者在完成肠道准备后，接受结肠镜检查和治疗，对于阑尾口出现阻塞、附近有脓苔和红肿的患者则可确诊为急性阑尾炎。所有30例患者中，22例患者阑尾口部位附着有脓苔，首先使用清水进行冲洗，若脓苔仍未脱落，则需使用活检钳将其彻底拨除，后使用吸引器完全吸出脓苔；8例患者出现粪石梗阻，首先将回盲处的部分气体完全吸除，从而降低回盲部压力，防止回盲部高压导致粪石粉碎并进入阑尾，后使用活检钳将粪石完全剥除。无论患者是否存在粪石或脓苔，均需在结肠镜引导下，对阑尾口处使用庆24万单位大霉素稀释液进行保留灌肠冲洗治疗，彻底吸净残余气体后将结肠镜退出。患者回到病房后，继续使用头孢西丁及甲硝唑进行补液、抗炎治疗。
Word文档免费下载：
Vol. 26 不同浓度溶剂对黄芩苷提取效率的研究胡 康 ( 南京中医药大学 , 江苏 南京 210023) 摘要 : 目的 本文主要通过选取不同类型的溶剂 , 采用一定的方法...方法采用高效液相色谱法,测定不同类型提取溶剂和不同浓度溶剂对黄芩中黄芩苷产率的影响。结果用30%乙醇提取黄芩中黄芩苷产率较高。结论该研究可以为生产中制定合理...使用超声波法从干燥的黄芩根中提取黄芩苷,提取过程分别采用水、60%乙醇和60%甲醇为提取溶剂。利用紫外分光光度法对黄芩苷的含量进行测定,通过对三种不同溶剂所提取...(论文) 摘要本文研究了不同提取溶剂对黄芩苷提取...对黄芩苷的浓度和质量进行测定,从而测出 每种溶剂中...因此,此法可用 于植物活性成分的提取,而且效率高,...超声黄芩苷的含量低40%左右”1,说明超声的次数和时间等因素对黄芩苷提取率有影 溶出效率与溶剂的极性具有明显的相关性——极性大的溶剂溶出效率高,极性小的溶剂...2. 2 色谱条件 参照 2005 版 药典对黄芩苷含量的...溶剂用量 B 提取时间 C 提取次数 误差 2 4 有...431 %。 通过验证实 验 , 黄芩苷的提取效率 都...具有流程简单,生产周期短,显著提高提取效率的 优点。...黄芩提取物中黄芩苷含量 由原来的 4%升至 20%～...热回流提取 3h、溶剂量为 12 倍时是黄芩苷的 ...李晓芳等[3]对黄芩苷用水提取工艺中的降解过程进行研究, 结果发现在以水为溶剂...提取效率和含量都较高,随着煎煮时问的缩短,特别是缩短第二次煎煮时间,效率虽有...表中看出,根据不同溶剂提取效率及安全性,选用 70%乙醇适宜为供试品的提取溶剂...5.2 在耐用性试验中,柱温、流速、不同的色谱柱对金银花颗粒中黄芩苷的含量 ...探讨不同提取溶剂、不同比例配伍对黄芩柴胡“药对”中主要药效成分黄芩苷含量的影响;方法:选用水和 70%的乙醇作为提取溶剂,参照I临床常用给药方法对不同比例配比(...采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺的制作方法
专利名称采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺的制作方法
技术领域本发明涉及中药发酵技术领域，尤其是一种采用中药发酵方法提高黄芩苷提取量的新工艺。
背景技术黄芩为唇形科多年生草本植物黄芩i^ctiwlleiriei baicalensis Georgi)的干燥根，又名山茶根、烂心草、黄金茶、子芩、条芩、枯芩等，最早收载于《神农本草经》，其性寒、味苦，归肺、胆、胃、大肠经。是我国常用的大宗药材之一，具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎， 用于治疗发热烦渴、肺热咳嗽、泻痢热淋、湿热黄疸、胎动不安和痈肿疮毒等症。现代药理学研究表明黄芩具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗过敏、抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、保护神经元细胞、抑制醛糖还原酶活性、阻止钙离子通道及细胞凋亡等作用，其主要活性成分为黄芩苷， 目前对黄芩苷的提取方法主要有水提酸沉法、醇提酸沉法、超声法等，采用这些方法提取时均为对黄芩药材进行特殊的前处理，但是对黄芩苷的提取率显得相对较低。中药材有效成分多存在于胞浆中，植物细胞壁是由纤维素、半纤维素、果胶质、木质素等物质构成的致密结构。在中药有效成分提取过程中，当胞浆中的有效成分向提取介质扩散时，必须克服细胞壁及细胞问质的双重阻力，使有效成分浸出受阻。微生物可利用中药中的成分为营养进行分裂、生长、繁殖和代谢，在代谢过程中分泌蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等几十种胞外酶进入培养基，使细胞破裂，细胞间隙增加，减小细胞壁、细胞问质等传质屏障对有效成分从胞内向提取介质扩散的传质阻力(葛喜珍2008)。现代发酵过程研究表明， 微生物菌群具有氧化、酯化、甲基化、羟基化、还原化等多种生物转化能力。中草药在发酵过程中还可能会伴随某些成分的分解转化而生成新的有效成分，这些新成分可能会增强其药理作用或出现新的药理作用。因此利用微生物进行发酵制药，不仅降低了用药成本，提高了药物有效成分含量及药物功效，还为开发新药提供了途径。相关研究表明，不同菌种、培养基、温度、湿度、发酵时间等条件是中药发酵的具体、关键因素。本发明利用已知的微生物菌将其选种培育，在控制条件下，利用该微生物菌对黄芩进行发酵处理，然后对黄芩中黄芩苷进行提取，较大地提高了黄芩苷的提取率。
本发明的目的是公开一种采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺，提高中药材黄芩中黄芩苷的提取率，以期克服上述现有技术上的不足。实现上述发明目的的技术解决方案如下一种采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺，包括发酵菌种绿色木霉菌的活化、种子培养、培养基的制备、中药材黄芩的发酵、 有效成分黄芩苷的提取步骤，步骤如下
(1)将绿色木霉菌种(菌种保藏号SICC 3. 607)接种于麦芽汁培养基上进行活化培养， 培养72小时，挑取菌落接种到含5ml麦芽汁培养试管中，28°C摇床培养48小时，然后转接到含300ml麦芽汁培养基的三角瓶中，150-300rpm/minJ8°C培养M小时；培养之后的菌种用无菌水配制成每毫升含107_9个分生孢子的悬浮液；
(2)称取一定量的黄芩干粉过40目筛，加适量蒸馏水浸泡12小时，按质量体积比(W/V) 加入磷酸二氢钾0. 3% 0. 5%、硫酸镁0. 2% 0. 4%、维生素B1O. 002% 0. 003%,蔗糖3%
5%，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7. 0，121°C灭菌20分钟，灭菌后置入发酵罐中；
(3)将活化后的绿色木霉菌孢子悬液按体积比(V/V)3% 7%比例，以孢子悬液形式加入发酵罐中进行培养以发酵黄芩；
(4)有效成分黄芩苷的提取步骤是将黄芩发酵物煎煮2次，每次30分钟，过滤除渣取滤液，用2mol/L盐酸调pH值1-2，沉淀1小时，取沉淀，加沸水洗涤两次，加乙醇洗涤一次， 挥尽乙醇后，得沉淀物黄芩苷。所述的采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺，其特征是所述发酵黄芩的控制条件为温度洸 30°C，转速150 300rpm/min，溶氧50 58%，培养时间6 8天。与现有技术相比本发明的优点与积极效果在于
1、本发明的研究证明了发酵也是传统中药材炮制的方法之一，中药成分的生物转化将成为中药创制新药研究的重要方面。2、本发明研究的工艺试验结果表明，所得黄芩苷收率达21% 23. 4%，比常规方法提高了 9. 0% 11. 6%左右。
具体实施例方式给出实施例，并对本发明做进一步的具体说明。本发明所要解决的技术问题是采用微生物菌发酵中药黄芩以提高黄芩中活性成分黄芩苷的提取率。具体技术原理是利用已知的绿色木霉菌，其菌种保藏号SICC 3. 607，在代谢过程中可分泌纤维素酶、半纤维素酶、 果胶酶等特点，这些酶能分解黄芩中细胞壁中纤维素、半纤维素，果胶质、木质等致密结构， 促使药物活性成分黄芩苷的最大限度的释放，从而提高中药活性成分提取量。其工艺包括发酵菌种绿色木霉菌的活化、种子培养、培养基的制备、中药材黄芩的发酵、有效成分黄芩苷的提取步骤，具体地还包括如下步骤
(1)将绿色木霉菌种接种于麦芽汁培养基上进行活化培养，28°C培养72小时，挑取菌落接种到含5ml麦芽汁培养试管中摇床培养48小时，然后转接到含300ml麦芽汁培养基的三角瓶中，150 300rpm/minJ8°C培养M小时；培养之后的菌种用无菌水配制成每毫升含107_9个分生孢子的悬浮液；
(2)称取一定量的黄芩干粉过40目筛，加适量蒸馏水浸泡12小时，按质量体积比(W/V) 加入磷酸二氢钾0. 3% 0. 5%、硫酸镁0. 2% 0. 4%、维生素B1O. 002% 0. 003%,蔗糖3%
5%，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7. 0，121°C灭菌20分钟，灭菌后置入发酵罐中；
(3)将活化后的绿色木霉菌孢子悬液按体积比(V/V)3% 7%比例，以孢子悬液形式加入发酵罐中进行培养以发酵黄芩，其发酵条件为温度26 30°C，转速150 300rpm/min， 溶氧50% 58%，培养时间6 8天；
(4)将发酵过的黄芩发酵物煎煮2次，每次30分钟，过滤除渣取滤液，用2mol/L盐酸调 PH值1-2，沉淀1小时，取沉淀，加沸水洗涤两次，加乙醇洗涤一次，挥尽乙醇后，得沉淀物黄芩苷即为黄芩的有效成分黄芩苷。实施例1 取黄芩干粉2. 5kg过40目筛后置50L发酵罐中，加20L蒸馏水浸泡12小时，再加蒸馏水至至25L。按质量体积比(W/V)加磷酸二氢钾75克、硫酸镁50克、维生素B1 0. 5克，蔗糖750g，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7. 0，121°C灭菌20分钟。绿色木霉菌用无菌水配成每毫升含IO9个分生孢子的悬浮液，取孢子悬液IL接种到培养基中，发酵培养温度，溶氧50%，150rpm/min振荡培养144小时。此发酵工艺能使黄芩苷的收率达22. 3%。实施例2:
取黄芩干粉2. 5kg过40目筛后置50L发酵罐中，加20L蒸馏水浸泡12小时，再加蒸馏水至25L。按质量体积比(W/V)加磷酸二氢钾125克、硫酸镁100克、维生素B1 0. 75克，蔗糖1250克，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7. 0，121°C灭菌20分钟。绿色木霉菌用无菌水配成每毫升含IO9个分生孢子的悬浮液，取孢子悬液0. 75L接种到培养基中，发酵培养温度 ^°C，溶氧50%，150rpm/min振荡培养144小时。此发酵工艺能使黄芩苷的收率达21. 6%。实施例3:
取黄芩干粉5kg过40目筛后置100L发酵罐中，加40L蒸馏水浸泡12小时，再加蒸馏水至最50L。按质量体积比(W/V)加磷酸二氢钾150克、硫酸镁100克、维生素B1 1克，蔗糖 1500克，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7. 0，121°C灭菌20分钟。绿色木霉菌用无菌水配成每毫升含IO8个分生孢子的悬浮液，取孢子悬液2. 5L接种到培养基中，发酵培养温度30°C， 溶氧58%，300rpm/min振荡培养168小时。此发酵工艺能使黄芩苷的收率达23. 1%。实施例4:
取黄芩干粉5kg过40目筛后置100L发酵罐中，加40L蒸馏水浸泡12小时，再加蒸馏水至最50L。按质量体积比(W/V)加磷酸二氢钾200克、硫酸镁150克、维生素& 1克，蔗糖2000克，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7. 0，121°C灭菌20分钟。绿色木霉菌用无菌水配成每毫升含IO9个分生孢子的悬浮液，取孢子悬液3L比例接种到培养基中，发酵培养温度 270C，溶氧53%，200rpm/min振荡培养144小时。此发酵工艺能使黄芩苷的收率达22. 7%。
1.一种采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺，包括发酵菌种绿色木霉菌的活化、种子培养、培养基的制备、中药材黄芩的发酵、有效成分黄芩苷的提取步骤，其特征在于，步骤如下(1)将绿色木霉菌种(菌种保藏号SICC3. 607)接种于麦芽汁培养基上进行活化培养，培养72小时，挑取菌落接种到含5ml麦芽汁培养试管中摇床培养48小时，然后转接到含300ml麦芽汁培养基的三角瓶中，150 300rpm/min，培养M小时；培养之后的菌种用无菌水配制成每毫升含107_9个分生孢子的悬浮液；(2)称取一定量的黄芩干粉过40目筛，加适量蒸馏水浸泡12小时，按质量体积比(W/V) 加入磷酸二氢钾0. 3% 0. 5%、硫酸镁0. 2% 0. 4%、维生素B1 0. 002% 0. 003%,蔗糖3%
5%，用2mol/L HCL调pH值至6. 8-7.0，121°C灭菌20分钟，灭菌后置入发酵罐中；(3)将活化后的绿色木霉菌孢子悬液按体积比(V/V)3% 7%比例，以孢子悬液形式加入发酵罐中进行培养以发酵黄芩；(4)将发酵处理过的黄芩发酵物煎煮2次，每次30分钟，过滤除渣取滤液，用2mol/L盐酸调PH值1-2，沉淀1小时，取沉淀，加沸水洗涤两次，加乙醇洗涤一次，挥尽乙醇后，得沉淀物黄芩苷。
2.根据权利要求1所述的采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺，其特征在于， 所述发酵黄芩的控制条件为温度26 30°C，转速150 300rpm/min，溶氧50 58%，培养时间6 8天。
3.根据权利要求1所述的采用中药发酵技术提高黄芩苷提取量的工艺，其特征在于， 所述发酵黄芩的发酵液中需加入磷酸二氢钾0. 3% 0. 5%、硫酸镁0. 2% 0. 4%、维生素 B1O. 002%
0. 003%,蔗糖 3%
本发明公开一种提高黄芩苷提取量的新工艺，属中药发酵技术领域。取一定量黄芩干粉过40目筛后置发酵罐中，加适量蒸馏水浸泡12小时。按质量体积比加磷酸二氢钾0.3%～0.5%、硫酸镁0.2%～0.4%、维生素B10.002%～0.003%，蔗糖3%～5%，用2mol/LHCL调pH值至6.8-7.0，121℃灭菌20分钟；活化后的绿色木霉菌用无菌水配成每毫升含107-9个分生孢子的悬浮液，以孢子悬液形式按体积比3%～7%比例接种发酵罐中培养发酵黄芩，发酵温度26～30℃，溶氧50%～58%，培养168小时。黄芩苷收率21%～23.4%，比常规方法提高9.0%～11.6%左右。
文档编号C12R1/885GKSQ
公开日日 申请日期日 优先权日日
发明者房春林, 李犹平, 李超, 杨海涵, 陈元坤 申请人:成都乾坤动物药业有限公司小木虫 --- 600万学术达人喜爱的学术科研平台
&&查看话题
黄芩苷对照品的制备
关键词：黄芩苷&&
& && &【摘要】 目的 简化黄芩苷提取纯化工艺，建立胃肠康颗粒剂中黄芩苷的含量测定方法。方法 通过超声提取酸沉、调节水溶液碱酸度除杂、甲醇超声助溶重结晶纯化工艺，获得黄芩苷对照品;并通过薄层层析、紫外光谱、红外光谱对其定性，HPLC法定量:色谱柱为Symmetry十八烷基键合硅胶柱，4.6mm×75mm，HPLC Column（Waters公司）;甲醇-水-磷酸（47:53:0.2）作流动相，检测波长278nm。结果 得到的黄芩苷对照品理化性质与标准品一致，含量达99.25%，得率4.12%。在0.058～0.58μg范围，样品含量与色谱峰面积线性关系良好（r=0.9950），加样回收率为98.80%～102.80%'
& && &关键词 黄芩苷 制备
& && &黄芩苷（Baicalin）是中药黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）中具有杀菌抗病毒作用的主要成分［1］，是黄芩素G位羟基与葡萄糖醛酸结合而成的苷［2］，具有很高的药用价值［3，4］。黄芩苷的提取方法已有不少报道［5～9］，但工艺都很繁琐，得率低，制取标准品就更为困难、因而黄芩苷标准品且价格昂贵，生产应用上要将其作为对照品进行质量控制就受到很大的限制。笔者试图寻找一种操作简单、得率高、纯度高的提取黄芩苷新工艺，以期能批量生产黄芩苷对照品。胃肠康颗粒的前身是中药散剂，由黄芩、黄柏、秦皮等药材组成，主要成分为黄芩苷和盐酸小檗碱，对细菌、病毒单独或混合感染产生的急、慢性肠炎等有效，主要用于水产养殖中鱼类肠溃疡、消化不良、胃肠不适或各种肠炎。该制剂是将多种中药原料，经粉碎过筛后直接混合而成，由于原料取材不一，有效成分含量不确定，影响疗效。此外，由于鱼类肠道细而短，药物在体内停留时间短，直接影响有效成分的吸收。因此，中药散剂用于鱼病的治疗效果欠佳。所以将其主要成分提取出来，并加入适当的赋形剂，制成颗粒剂，可大大提高其疗效，但由于各种药材的产地、品种、提取工艺等不同，直接影响样品质量，所以建立行之有效的监测方法，对生产工艺的确定和样品质量的控制具有重要指导意义。
& && &1 仪器与试剂
& && &1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪:Waters1525二元泵;Waters2487紫外检测器;色谱柱:Symmetry十八烷基键合硅胶柱，4.6mm×75mm，HPLC Column（Waters公司）;IR谱用AˉVATA R360傅里叶红外光谱仪（NicoLet），波长范围400～4600cm -1&&，KBr压片;7051型紫外分光光度计，波长范围5cm -1&&（上海天美科学仪器有限司）;BS201S电子天平（北京塞多利斯天平有限公司）;ShLOA快速水分测定仪（上海第二天平仪器厂）;数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）;三用紫外分析仪（2F-I型）;X4型显微熔点测定仪（北京光电设备厂，温度未校正）。
& && &1.2 试剂 乙醇，甲醇，甲酸，磷酸等均为分析纯试剂;薄层层析硅胶G（中国青岛海洋化工集团公司）;甲醇（色谱纯）;黄芩苷标准品（中国药品生物制品检定所）;胃肠康颗粒剂（福建金谷科技开发有限公司）。
& && &2 方法与结果
& && &2.1 黄芩苷对照品的制备
& && &2.1.1 黄芩苷粗品的提取
& && &称取已干燥黄芩粉末100g2份，分别以70%乙醇50℃超声提取2次，每次1h，滤过，将提取液减压回收乙醇至尽后，加蒸馏水100ml，用浓HCl调pH值为3～4，静置约0.5h，滤过，滤液在40℃用浓HCl调pH值至2.0，保温30min，静置12h后抽滤。将沉淀分别用水和95%乙醇洗涤2遍，干燥即得黄芩苷粗品。
& && & 2.1.2 黄芩苷的纯化
& && &将上述黄芩苷粗品研碎于烧杯中，加150ml蒸馏水加热至80℃时用40%NaOH调pH值为7.5使粗品完全溶解，再用浓HCl调节pH值至6.0，加95%乙醇260ml，静置后过滤。滤液再用浓HCl调pH值为2.0，静置冷却至黄芩苷完全沉淀，过滤后将沉淀用水洗涤至pH 值为7左右，再用95%乙醇洗涤，抽干即得较纯的黄芩苷样品。将此黄芩苷样品用300ml甲醇在50℃超声波下溶解，冷却沉淀，静置，过滤，弃去滤液。将沉淀在室温超声波下溶于甲醇中，5℃下静置逐渐析出淡黄色细针状结晶物，依此再重结晶1次，干燥即得纯化的黄芩苷样品。产率为4.12%。
& && &2.2 黄芩苷样品的定性分析
& && &2.2.1 黄芩苷样品溶液的配制精密称取黄芩苷样品6.10mg，用甲醇溶解并定容至100ml容量瓶中。
& && &2.2.2 黄芩苷标准品溶液的配制精密称取干燥至恒重的黄芩苷标准品5.80mg，用甲醇溶解并定容至100ml容量瓶中，即得标准溶液。
& && &2.2.3 薄层层析
& && &以硅胶G作固定相，以105℃烘箱活化30min，分别吸取黄芩苷样品溶液和标准品溶液各6μl，点样于已活化的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7:1:2）为展开剂进行展开，结果标准品与样品的R&&f 值相等，都为5.5/8.6，在365nm紫外灯下观察，只有一个荧光点，在硅胶板上喷1%FeCl 3 乙醇溶液只有一点显示深兰色，初步判断样品为黄芩苷，且不含杂质。
& && &2.2.4 电子光谱
& && &用黄芩苷样品溶液和标准品溶液进行UV谱扫描。得到两个谱图的结构完全一致，样品溶液无杂质峰，说明本试验得到的样品为黄芩苷且基本无杂质。
& && &2.2.5 红外光谱
& && &黄芩苷样品和黄芩苷标准品的IR谱如图1、2（略）所示。两个谱图的结构完全一致，可确认得到的样品为黄芩苷。图1 黄芩苷标准品IR谱图2 黄芩苷对照品IR谱2.2.6 熔点 测定黄芩苷标准品、本法得到的样品以及本样品与标准品混合物的熔点均为223℃～224℃，说明本法精制的样品纯度较高。
& && &2.3 HPLC法测定黄芩苷含量
& && &2.3.1 色谱条件
& && &色谱柱:Symmetry十八烷基键合硅胶 柱，4.6mm×75mm，HPLC Column（Waters公司）;流动相:甲醇-水-磷酸（47:53:0.2）;检测波长:278流速1ml/min。
& && &2.3.2 标准曲线绘制
& && &精密吸取“2.2.2”项上标准液进样，进样体积分别为1、2、4、6、8、10μl，在上述色谱条件下测定峰面积，得到黄芩苷标准曲线，直线方程为:Y=4024667X（Y为黄芩苷含量μg，X为色谱峰面积nm 2 ），回归系数r=0.9980。线性范围为0.058～0.58μg。
& && &2.3.3 进样精密度
　　精密吸取“2.2.1”项下的黄芩苷样品溶液进样，每次体积为5μl，记录色谱峰面积，进行进样精密度测定（表1），结果表明进样精密度良好。表1（略）进样精密度试验
& && &2.3.4 测定溶液的稳定性试验
& && &精密吸取“2.2.1”项下的样品溶液5μl，每间隔2.5h进样1次。共测定6次，色谱峰面积分别为07、09，平均峰面积为1206069，RSD为0.11%，表明测定溶液在15h内稳定。
& && &2.3.5 黄芩苷样品的含量测定
& && &根据“2.2.3”上的试验结果，人分面积的平均值，即1218277，代入标准曲线方程，经计算可得样品中黄芩苷的含量为99.25%。同时还测定了按文献法 ［7］制备芩苷样品，并与本法比较（表2）（略），结果表明，本法得到的黄芩苷样品纯度与文献得到的样品及标准品均很接近，可作为对照品使用。 表2（略） 不同样品测定结果
关于黄芩苷对照品的制备的相关话题在小木虫APP已经有6位虫友给出了详细回复。
赶快查看回复吧！
学术必备与600万学术达人在线互动！
扫描下载送金币
北京学而思教育科技有限公司 地址：北京市海淀区北三环甲18号中鼎大厦A座1层102室 电话：010-
浏览器进程
打开微信扫一扫
随时随地聊科研