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　　所有人都知道胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，而皮下注射是临床上胰岛素的传统给药方式。
　　而且为了模拟正常生理状态下的胰岛素分泌曲线，达到良好的血糖控制效果，各种速、中、长效型的胰岛素类似物注射剂被联合使用，俗称的“预混”。
　　虽然大多数的胰岛素及其类似物注射液目前已设计成预填充注射笔，大大改善了患者的使用体验，但是长期皮下注射常伴随疼痛、局部组织坏死、感染及神经损伤等不良反应。
　　其中最大的“不良反应”就是天天要打针：
　　为提高了糖尿病患者的用药体验，胰岛素的非注射给药系统在近几年得到广泛的研究。不打针，而是通过其他的方式将胰岛素送入血液中。
　　那一般有哪些方式呢？
　　胰岛素给药新剂型，包括口服、经鼻、眼睛粘膜、经肺、经皮、可注射原位凝胶和闭环给药。
　　看到了没有，胰岛素可不仅仅是只能注射进入体内，各种纷繁复杂的给药方式都在科学家的研究范围之内。
　　咱接下来看看
　　真的有非注射型的胰岛素药吗？
　　我们知道，现在的胰岛素都是通过基因重组技术(转基因)得到的胰岛素类似物，改变了人胰岛素中的部分氨基酸结构，具有速、中、长效降血糖的不同效果。
　　临床上通过联合使用具有不同降血糖效果的胰岛素类似物，从而以模拟正常人体内胰岛素的分泌模式，达到良好的血糖控制效果。
　　那这些基因重组胰岛素一般包括哪些呢？
　　诺和诺德公司研发的门冬胰岛素，商品名诺和锐(NovoLog)，为速效胰岛素。地特胰岛素，商品名诺和平(Levemir)，是长效胰岛素。
　　赛诺菲-安万特公司研发的谷赖胰岛素，商品名艾倍得(Apidra)，是速效胰岛素；甘精胰岛素，商品名来得时(Lantus)，是长效胰岛素。
　　礼来公司研发的赖脯胰岛素，商品名优泌乐(Humalog)，是速效胰岛素；优泌乐25(Humalog Mix 75/25)是由25％赖脯胰岛素和75％精蛋白锌赖脯胰岛素混合而成的注射液，是一种短中效结合的胰岛素
　　大概是这样：
　　从上图中这些已经上市的胰岛素列表可见，目前已经有一个非注射剂型上市，即MannKind公司的胰岛素肺吸入剂Afrezza 。
　　这个药是FDA批准其用于1型和2型糖尿病患者在就餐时间段的胰岛素给药，该药品不能替代长效胰岛素，而且具有肺吸入给药的所有不良反应，但它仍为数量庞大的糖尿病患者群提供了较方便的治疗方式。
　　所以非注射型胰岛素是存在的
　　那除了肺吸入剂外
　　还有哪些给药的方式呢？
　　正在进行临床研究的胰岛素新型递药系统如下图所示：
　　口服胰岛素
　　口服给药方便经济、完全无痛，患者依从性好，对于经常需要注射胰岛素的患者来说非常有诱惑力。
　　但作为相对分子量大、半衰期短、脂溶性差的多肽蛋白类药物，胰岛素直接口服会存在3个屏障：
　　①物理屏障，即胃肠道上皮细胞会阻碍胰岛素的吸收。
　　②化学屏障，即从高酸性的胃部环境到中性至微碱性的肠道环境的变化会导 胰岛素 内部结构破坏。
　　③酶屏障，即胃肠道中的蛋白酶会降解胰岛素，致其失活。
　　因此，目前研究中常利用脂质体、纳米粒、微球、微囊和凝胶等载体减少胃肠道环境对胰岛素的破坏和降解，并且添加促吸收剂促进其有效吸收，期望其能作为生物大分子的口服传递载体。
　　目前并没有口服胰岛素制剂上市。
　　经鼻给药
　　人体的鼻腔黏膜的表面积约为150cm2，黏膜细胞下有丰富的血管和淋巴管，胰岛素蛋白通过黏膜吸收后可直接进入体循环。
　　但与口服给药相似，鼻腔给药也存在一些障碍，包括鼻道对药物的清除、黏液层和鼻腔上皮细胞的阻碍和鼻腔内的酶降解等。
　　肺部吸收
　　肺部具有吸收表面积大(约140m2)、血管丰富、上皮细胞屏障较薄(肺泡柱状上皮细胞的厚度0.1～0.2mm )、膜通透性高和酶活性较低的特点，有助于药物快速吸收。
　　这样给药跟抽烟有点类似。
　　当然肺部吸收也有障碍：
　　覆盖在肺泡上皮细胞、厚度1~10微米的黏液是胰岛素经肺吸收的物理屏障，胰岛素会被黏膜中存在的巨噬细胞和多种代谢酶清除或代谢。
　　除生理因素外，影响胰岛素吸入的主要因素是颗粒尺寸。
　　随着药物颗粒大小不同，沉积部位也不同，直径1～3微米时主要沉积在肺泡或肺深部。
　　经皮给药
　　多肽、蛋白类药物的经皮给药须借助微针或离子导入技术。
　　微针可在皮肤的角质层和表皮层创建微米级、暂时性的亲水通道，帮助亲水性的小分子药物、多肽、蛋白质和纳米粒等透过皮肤，使药物通过真皮层吸收进入体循环。
　　勉强算是微创给药，没有打针这么疼。
　　可注射原位温敏水凝胶系统
　　虽然速效胰岛素与长效胰岛素的联合使用可控制血糖，但不能完全避免夜间或空腹时段低血糖的危险。
　　为解决该问题，实现单次注射后胰岛素的稳定、长效释放，科学家们等开发了可注射的原位温敏水凝胶缓释体系。
　　这套系统能够有效控制胰岛素的释放速度，糖尿病模型大鼠注射1次后，3个月内可维持基础胰岛素水平，且不会引起任何免疫反应，有望替代目前每天注射几次胰岛素的麻烦。
　　智能给药闭环
　　只能闭环胰岛素递药系统可模仿正常胰腺的功能，实现胰岛素递送速率和递送剂量的自我调节，减少患者血糖波动，并控制低血糖风险，与胰岛素泵类似。
　　目前大部分的闭环胰岛素是由聚合物生物材料开发而来，通过化学控制的方式实现。
　　胰岛素通常被包埋在葡萄糖响应型聚合物系统(如葡萄糖氧化酶、苯硼酸、葡萄糖结合蛋白)中。通过聚合物结构变化、聚合物降解或葡萄糖结合竞争，可调节胰岛素的释放速率。
　　眼粘膜、直肠粘膜给药也是正在研究的途径。
　　这就是胰岛素的其他给药途径
　　那现在上市的多吗？
　　这些非注射给药途径虽然能克服传统的皮下注射给药的缺点，有效改善糖尿病患者的用药顺应性和生活质量，但要真正实现临床运用，仍面临许多困难，所以很多药物仍然在进行临床试验。
　　所以我们只能等待它们通过严格的临床试验，然后被FDA或者CFDA批准之后方可遵医嘱购买，私下擅自用药不仅风险较大而且容易被骗。
　　比如口服胰岛素，目前并没有通过审批而上市的，但是淘宝上可是早就满天飞了：
　　这些东西还是不要去买了，被骗了钱还好说，万一有副作用或者西药添加造成肝肾损伤可就悔时已晚。
　　---参考文献---
　　李玉萍,孙利珍,熊向源,等.口服胰岛素载体的高分子生物材料[ J ].中国组织工程研究 , ):
Mo R, Jiang T, Di J, et al. Emerging micro- and nanotechnology based synthetic approaches for insulin delivery [J] . Chem Soc Rev ,2014,43 ( 10 ) :
　　王理群,詹晓平,陈少雄,毛振民. 胰岛素给药新剂型研究进展[J]. 中国医药工业杂志,6-1244.
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微针经皮给药系统的建立及其胰岛素给药研究
近年,全球糖尿病发病率呈快速上升趋势。胰岛素作为糖尿病治疗的主要药物,现有临床给药方式局限于多次注射(胰岛素或其类似物)和胰岛素泵；二者均为侵入式给药途径,易引发注射部位的肌肉萎缩、感染等副反应,导致糖尿病患者对胰岛素治疗的依从性差。开发非注射式胰岛素给药途径及制剂,提高患者的治疗依从性,成为国内外医药界共同关注的课题。　　
本课题从改变给药途径入手,采用微针经皮给药技术实现胰岛素非侵入式给药。经皮给药具有副作用少,易实现患者自主给药,治疗依从性高等优势,微针技术利用机械作用克服传统经皮给药中皮肤对胰岛素经皮渗透的屏障,可实现稳定的降血糖效果。本课题开发了新型微针经皮给药系统及胰岛素给药制剂,并对其胰岛素给药能力进行了深入研究。该成果将有助于突破现有胰岛素治疗的局限,提高糖尿病患者的生活质量。全文主要研究内容如下:　　
1.微针经皮给药系统的建立　　
开发了以实心微针阵列与辅助器件(进针器)组成的新型微针给药系统,以体外渗透试验评价了系统的给药能力。所述给药系统可实现微针对皮肤高效、可控的机械作用:针长150μm的实心微针刺入皮肤,致孔深度不超过100μm,模型药物(钙黄绿素)的渗透系数提高104倍。该给药系统生物安全性高,可通过优化作用时间和作用面积控制药物透过量。　　
2.胰岛素经皮给药的可行性研究　　
以糖尿病大鼠为动物模型,评价了常规胰岛素微针经皮给药的药效。研究发现,微针给药可实现稳定、缓释的药效:①糖尿病大鼠血糖稳定降低,微针给药面积增加可使药效成比例提高(R2=0.97)；②皮肤的储库作用延长了常规胰岛素的有效作用时间；体外试验证实,给药浓度对胰岛素经皮渗透的速率及缓释时间均产生影响。　　
3.胰岛素经皮给药制剂的配方研究　　
经处方研究、筛选优化,确定了胰岛素经皮给药制剂的配方。所述制剂为凝胶态:以0.6％的卡波姆971为基质,具有良好的渗透性和外观；以不同分子量的透明质酸钠组合和甘油为保湿剂,置于37℃非封闭环境下,6h失水率累积不超过10％·cm-2;以1.6％的丙二醇和10％的海藻糖为热保护剂；以0.65％的异丙醇作为促渗剂,经皮渗透性优于相同给药浓度的胰岛素溶液；防腐剂为0.2％的2-苯氧乙醇和0.1％的尼泊金甲酯。　　
4.胰岛素经皮给药制剂的工艺优化和性质研究　　
改进制剂工艺,将凝胶制备为冻干贴片以提高实用性。所得冻干贴片可快速复水后以凝胶形式给药于经微针预处理的皮肤,使大鼠血糖显著降低；药效动力学及药代动力学结果显示,增加微针给药面积可使胰岛素药效成比例提高(R2>0.99)。该冻干贴片在充氮避光条件下储存,4℃条件下储存3个月,失活17.89％±17.57％,25℃下放置3个月完全失活。
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微针在经皮给药系统的应用研究(论)
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decreased particle size can increase nanoparticles amount retained in skin. Compared with nude mice skin, micro needle on the human skin, the results of the promotion of the penetration of nanoparticles is more significant. In vitro melanoma cells to create a trial, the efficacy and safety of comprehensive evaluation, preferably whitening drugs. The results of arbutin on tyrosinase activity and notes restraint restraint melanogenesis and its consequences is better, the best security. The arbutin as anti pigment composed of model drug was to prepare the nanoparticles and preparation process by orthogonal test to optimize the nanoparticles, of preparation of load arbutin PLGA nanoparticle size within 200nm, zeta potential -30mv above can perhaps to form a stable colloidal solution, SEM observations outside the indecent roundness, Nianye small uniform, evacuation. Take ASIP covalent combined on the outer surface of the nanoparticles arbutin, targeted to melanocytes MC1R automatic target nanoparticles to construct in the coupling of EDC and NHS. The shape of the nanoparticles was round and round, and the evacuation was on average, and no aggregation of adhesion was produced. Take PE ASIP, observed in flow cytometry and confocal microscope, proved that ASIP has been connected with the outside nanoparticles. Through the process of in vitro cell experiment, confocal microscopy indecent test target to nanoparticles with target cell endocytosis process, 10min target to the nanoparticles can may identify and adsorbed on the outside of melanocytes, 2h have a large number
through flow cytometry detection demonstrate the targeted nanoparticles having a target of melanocytes in the MC1R receptor to superior performance. In vitro efficacy trials prove to ASIP retouching nanoparticles, and melanin cell MC1R receptor specific joint and antagonising alpha MSH receptor and joint and tightening the restraint by - MSH causes the tyrosinase activity and melanin decomposition growth and proliferation of melanocytes. And in the tyrosinase activity restraint, melanin decomposition restraint, Arbutin-NPs-ASIP consequences are better than the consequences of a single Arbutin or ASIP. Take ultraviolet C57BL mice skin shining and set up the skin pigment calm model. Through contrast group and experimental group of skin brightness change, skin melanin cell proliferation and skin melanin granule analogy, interpretation of target to nanoparticles with ASIP and arbutin double anti pigment calm目录:摘要9-11ABSTRACT11-13前言15-20第一部分 基于微针给药的纳米粒经皮递送机理研究20-53&&&&1 仪器与材料20-22&&&&&&&&1.1 仪器20-21&&&&&&&&1.2 材料与试剂21-22&&&&2 微针对纳米粒经皮给药的促透作用研究22-37&&&&&&&&2.1 双荧光纳米粒的制备和表征22-23&&&&&&&&2.2 香豆素-6 HPLC 分析方法的建立23-24&&&&&&&&2.3 包封率和载药量测定24&&&&&&&&2.4 纳米粒体外释放实验24&&&&&&&&2.5 离体皮肤的制备24-25&&&&&&&&2.6 微针阵列处理皮肤25&&&&&&&&2.7 皮肤样品测定方法的建立25&&&&&&&&2.8 透皮实验25-26&&&&&&&&2.9 结果26-37&&&&3 纳米粒特性对微针经皮给药的影响37-43&&&&&&&&3.1 纳米粒的制备和表征37-38&&&&&&&&3.2 纳米粒经皮给药38-39&&&&&&&&3.3 结果39-43&&&&4 人体皮肤中纳米粒经微针给药的经皮递送43-48&&&&&&&&4.1 皮肤的预处理43&&&&&&&&4.2 透皮实验43-44&&&&&&&&4.3 结果44-48&&&&5 小结48-49&&&&6 讨论49-50&&&&参考文献50-53第二部分 抗色素沉着药物的优选及载药PLGA 缓释纳米粒的制备表征53-71&&&&1 仪器与材料54-55&&&&&&&&1.1 仪器54&&&&&&&&1.2 材料与试剂54-55&&&&2 实验方法55-59&&&&&&&&2.1 抗色素沉着药物的优选55-57&&&&&&&&2.2 熊果苷纳米粒制备及表征57&&&&&&&&2.3 熊果苷HPLC 分析方法的建立57-58&&&&&&&&2.4 包封率的测定58&&&&&&&&2.5 载药量的测定58-59&&&&&&&&2.6 体外释放试验59&&&&3 实验结果59-68&&&&&&&&3.1 美白剂对细胞内酪氨酸酶活性抑制作用59&&&&&&&&3.2 美白剂对黑素生成的影响59-60&&&&&&&&3.3 美白剂对细胞增殖的影响60-61&&&&&&&&3.4 药效及安全性评价61-62&&&&&&&&3.5 熊果苷含量测定方法学结果62-63&&&&&&&&3.6 纳米粒中熊果苷的测定63-64&&&&&&&&3.7 载熊果苷纳米粒的制备工艺优化64-68&&&&&&&&3.8 体外释放实验68&&&&4 小结68&&&&5 讨论68-69&&&&参考文献69-71第三部分 靶向纳米粒的构建及体外靶向性评价71-87&&&&1 仪器与材料72-73&&&&&&&&1.1 仪器72&&&&&&&&1.2 材料与试剂72-73&&&&2 实验方法73-77&&&&&&&&2.1 小鼠ASIP 的重组和构建73&&&&&&&&2.2 ASIP 修饰的靶向纳米粒的构建73-74&&&&&&&&2.3 ASIP 接枝率的测定74-75&&&&&&&&2.4 靶向纳米粒的粒径分布与Zeta 电位75&&&&&&&&2.5 靶向纳米粒的表面形态测定75&&&&&&&&2.6 验证ASIP 与纳米粒偶联75-76&&&&&&&&2.7 靶向纳米粒的体外生物功能评价实验76-77&&&&3 结果77-84&&&&&&&&3.1 BCA 含量测定试剂盒标准曲线77-78&&&&&&&&3.2 BCA 含量测定方法的回收率和精密度测定78&&&&&&&&3.3 纳米粒上偶联的ASIP 的定量测定78&&&&&&&&3.4 纳米粒的形态与表征78-79&&&&&&&&3.5 流式细胞仪定性验证纳米粒偶联79-80&&&&&&&&3.6 共聚焦显微镜定性验证实验80-81&&&&&&&&3.7 靶向纳米粒的细胞内吞81-83&&&&&&&&3.8 流式细胞仪验证ASIP 的生物活性83-84&&&&4 小结84&&&&5 讨论84-85&&&&参考文献85-87第四部分 靶向纳米粒的体外药效研究87-98&&&&1 仪器与材料87-88&&&&&&&&1.1 仪器87-88&&&&&&&&1.2 材料与试剂88&&&&2 实验方法88-90&&&&&&&&2.1 ASIP 修饰纳米粒对细胞MC1R 受体的结合及对α-MSH 的拮抗作用88-89&&&&&&&&2.2 体外药效评价89-90&&&&3 实验结果90-95&&&&&&&&3.1 ASIP 修饰纳米粒对细胞 MC1R 受体的结合及对α-MSH 的拮抗 作用90-92&&&&&&&&3.2 体外药效评价92-95&&&&4 小结95&&&&5 讨论95-96&&&&参考文献96-98第五部分 刺鼠蛋白修饰载熊果苷纳米粒的体内药效评价98-109&&&&1 仪器与材料98-99&&&&&&&&1.1 仪器98&&&&&&&&1.2 材料与试剂98-99&&&&&&&&1.3 实验动物99&&&&2. 实验方法99-102&&&&&&&&2.1 色素沉着小鼠模型99-100&&&&&&&&2.2 皮肤亮度测定100&&&&&&&&2.3 Dopa 染色法-皮肤中黑素细胞染色100&&&&&&&&2.4 Masson Fontana 染色法-皮肤中黑素颗粒染色100-101&&&&&&&&2.5 统计分析101&&&&&&&&2.6 统计分析101-102&&&&3 实验结果102-106&&&&&&&&3.1 色素沉着小鼠模型102&&&&&&&&3.2 皮肤亮度变化102-103&&&&&&&&3.3 Dopa 染色法-皮肤中黑素细胞染色103-104&&&&&&&&3.4 皮肤中黑素颗粒染色104-105&&&&&&&&3.5 皮肤刺激性实验评价指标与结果105-106&&&&4 小结106&&&&5 讨论106-108&&&&参考文献108-109全文总结109-111综述:美白化合物的分类和筛选评价方法111-127&&&&1 美白化合物的筛选111-113&&&&&&&&1.1 酶测定和细胞的培养方法111-112&&&&&&&&1.2 重建人体表皮112-113&&&&&&&&1.3 动物模型113&&&&2 美白化合物的效能评价113-116&&&&&&&&2.1 体内人体试验113&&&&&&&&2.2 临床评估113-114&&&&&&&&2.3 仪器评价114-115&&&&&&&&2.4 分析方法115-116&&&&&&&&2.5 适用性测试116&&&&3 美白化合物分类116-121&&&&&&&&3.1 氢醌117&&&&&&&&3.2 对苄氧酚117&&&&&&&&3.3 对甲氧酚117-118&&&&&&&&3.4 熊果苷118&&&&&&&&3.5 皮质激素118&&&&&&&&3.6 维甲酸118&&&&&&&&3.7 壬二酸118-119&&&&&&&&3.8 曲酸119&&&&&&&&3.9 维 C 磷酸酯镁119&&&&&&&&3.10 烟酰胺119&&&&&&&&3.11 丁基间苯二酚119&&&&&&&&3.12 丝氨酸蛋白酶抑制剂119-120&&&&&&&&3.12 羟基酸120&&&&&&&&3.13 鞣花酸120&&&&&&&&3.14 白藜芦醇120&&&&&&&&3.15 甘草提取物120&&&&&&&&3.16 亚油酸和硫辛酸120-121&&&&参考文献121-127发表论文及参加的科研工作127-129致谢129分享到：相关文献|