乙肝病毒dna问题

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乙肝患者诊后咨询:病毒量
问题:
状态:就诊后
门诊/住院患者报到
找吕美德大夫就诊的1***患者,成功报到医生诊断疾病:乙肝门诊或住院患者:门诊最近一次就诊时大夫给的处置方案:检查及事项:病毒量
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吕美德大夫通知出停诊:2016年9月出诊时间是:9月2日、5日、12日、19日、23日、26日。全天出诊
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疾病名称:乙肝针刺伤&&
希望得到的帮助:谢谢
请医生给我一些治疗上的建议
病情描述:乙肝针刺伤,只做了简单消毒处理没及时打乙肝免疫蛋白,大概三天去查过乙肝五项结果显示全部阴性,这个结果有准确性么
疾病名称:乙肝&&
希望得到的帮助:请医生给我一些治疗上的建议
病情描述:乙肝患者用的凉席上有乙肝患者的汗液。没有乙肝抗体的人坐了凉席也有出汗会被传染吗?(表面没有创伤)但是感觉局部有些痒。就单独用盆接了一盆水用毛巾擦一下身体。然后现在我是在孕期,有乳汁...
疾病名称:乙肝40年,早期肝硬化&&
希望得到的帮助:恩替卡韦终身服用担心副作用,可否替换
病情描述:乙肝40年,早期肝硬化。5月突感胸闷气短,经检查为心脏瓣膜退行性脱垂,择期手术。医生要求先确诊肝部状况。肝部每年复查,正常,今年病毒活跃期,医生开了恩替卡韦,但据说这药不能停,会反弹,...
疾病名称:乙肝阳性,,能不能转阴,,今年29岁&&
希望得到的帮助:携带乙肝阳性,,二十几年了 怎么治疗
病情描述:乙肝阳性,,能不能转阴,,今年29岁,女,能不能治疗,,携带乙肝阳性,,二十几年了
疾病名称:乙肝抗体定量检查59 参考值是0-10 我去年检查滴数600多 咋降的这么快&&
希望得到的帮助:乙肝定量59 要打加强针?
病情描述:乙肝抗体定量检查59 参考值是0-10 我去年检查滴数600多 咋降的这么快 需要打加强针吗?我老公小三阳 婆婆也是乙肝
疾病名称:乙肝疫苗&&
希望得到的帮助:乙肝两对半检查报告
病情描述:乙肝两对半检查报告,需不需要再打加强针,打几针?
疾病名称:乙肝&&丙肝&&
希望得到的帮助:请医生给我一些治疗上的建议,1.请问医生25阳会变成乙肝吗?
2.25阳可以献血吗?影响入...
病情描述:乙肝打过疫苗,当时有阳性,但当时没注意是2阳还是25阳,医生说有抗体我就没注意。现在是25阳。
丙肝是我在无套高危97天的时候查的,antihcv和hcvrna均阴。
疾病名称:乙肝&&
希望得到的帮助:去年复查DNA定量在正常值内,最近半年谷丙转氨酶缓慢升高,是什么原因?这次又是和上次...
病情描述:乙肝十几年,经过治疗,DNA定量,肝功,B超都在正常状态。此后每半年复查一次肝功能和B超。
2014年ALT高出正常值两倍以上,又到医院治疗正常后,正常了一年,
最近检查:B超实质回声稍粗。...
疾病名称:乙肝&&
希望得到的帮助:请医生给我一些治疗上的建议
病情描述:乙肝大三阳,肝功能正常,没有什么反映。希望能治疗好
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吕美德大夫的信息
对各种病因的急、慢性肝病、尤其对各型病毒性肝炎、肝硬化、酒精性肝病、自身免疫性肝病及国内常见传染病的...
吕美德,男,吉林大学第一医院肝胆胰内科教授、主任医师,资深名医,1954年毕业于长春第一军医大学,从事肝...
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沁源县第二人民医院乙肝病毒携带者的治疗问题_科普知识_中国百科网
乙肝病毒携带者的治疗问题
    乙肝病毒携带者 -治疗问题 乙肝病毒携带者是否需要治疗,在医学界一直是一个存在争议的问题,按道理说,既然身体携带着乙肝病毒,那么乙肝病毒携带者治疗就是有必要的。但是,目前各种药物和治疗方法均不能有效清除已经整合到肝细胞内的乙肝病毒,各种抗病毒药物对于潜藏在肝细胞内的病毒,犹如隔靴搔痒,无法切中要害。加上乙肝病毒携带者集体免疫功能处于麻痹状态,对于各种治疗难以响应,就算乙肝病毒携带者治疗起来好像对牛弹琴,不起作用。另外,一些无症状携带者往往长期携带者也不一定有什么后果,甚至少数人免疫功能提高后还能自然转阴。乙肝病毒携带者是否需要治疗,一定要视患者具体情况而定,这样是因为乙肝病毒携带者情况十分复杂,其中少部分为非活动性的乙肝病毒表面抗原阳性携带者,但更多的携带者实际上处于不同疾病发展阶段的乙肝患者,其中不乏慢性活动性肝炎、早期肝硬化,甚至于个别的肝癌患者。这些患者表面上没有明显异常,但病情在暗中潜伏进展,到了一定时候才会显露出来,所以乙肝病毒携带者不可马虎,不能掉以轻心。绝对的“健康携带者”是不存在的。1、不需要治疗乙肝病毒携带者如果携带者化验检查肝功系列指标均正常,乙肝病毒复制指标为阴性,B超检查没有明显异常,肝穿刺检查提示肝脏组织炎症积分小于4分,证实该携带者为非活动性乙肝病毒携带者,暂时无需治疗。但是,仍然要进行医学观察,定期复查。2、需要抗病毒治疗如果携带者化验检查乙肝病毒复制指标为阳性(乙肝大三阳和乙肝病毒DNA阳性,肝穿刺组织学检查提示炎症程度超过2级,积分超过4分,需要进行抗病毒治疗。大量研究表明,乙肝病毒携带者进行肝穿刺组织学检查,只有少部分属于非活动性乙肝病毒携带者,而绝大多数都属于病情严重程度不等的乙肝患者,对这部分乙肝病毒携带者不能坐视不管,而应该根据具体情况,制定各自的治疗方案。
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乙肝病毒携带者关心的一些问题
全网发布: 22:57:53
发表者:王冶
(访问人次:7993)
  &很多人把乙肝病毒携带者误以为是慢性乙肝患者,这是不科学的。一般来说,对表面抗原阳性的人,如果症状不明显,化验肝功能正常,医学上称为乙肝病毒表面抗原携带者。这样的人不一定都是肝炎,所以不必要恐慌,只要在医生的指导下定期检查就可以了。& & &&目前,我国的乙肝病毒感染率约60%~70%;乙肝表面抗原携带率约占总人口的10%,以此计算,全国约有1.25亿人携带乙肝病毒,其中乙肝患者大约有3000万。乙肝病毒携带者中大部分属于病毒复制不活跃的,传染性比较弱,只有少部分病毒复制活跃,具有传染性。乙肝病毒感染可以有效预防。日本从1980年开始实行乙肝疫苗接种之后,乙肝病毒携带者由过去的10%~13%下降为0.8%~1.3%。我国从1992年对国人进行乙肝疫苗接种后,特别是对新生儿乙肝疫苗接种,乙肝病毒携带率已开始呈逐渐下降趋势。据推算,通过两三代人的不懈努力,乙肝病毒携带率可从目前的10%下降到1%以下。& & &&乙肝病毒的传播途径共有5条:一是血液传播,如输入含有乙肝病毒的血液等;二是生活上的密切接触,如共用一个饭盒、牙刷、毛巾、剃须刀等,但前提是有皮肤黏膜的破损;三是性传播,唾液、乳汁、精液、阴道分泌物等;四是母婴垂直传播;五是医源性传播,如使用不洁注射器、消毒不严格的内窥镜以及不卫生的修牙、补牙等,当然,有些非正规的“准医疗行为”比如纹身、文眉等美容操作,也具有较大的风险性。& & & 乙肝病毒家庭聚集现象比较常见,亲属之间容易相互传染。促成家庭聚集性传播的因素有三个:家庭成员本身对乙肝病毒免疫力低下;密切接触;母婴垂直传播机会多。多数乙肝患者都有这种现象。乙肝病毒无症状携带者,大部分只是体内残留病毒,而且复制不活跃,经临床做肝穿证实,对肝脏损害较少。乙肝病毒携带者绝大部分没有症状,只有少数人会有疲乏的感觉,经过休息之后即可消失。60%~70%的乙肝病毒携带者是通过各种查体发现的。在体检时,一旦查出携带乙肝病毒,应该到正规的传染病医院、肝病医院进行详细检查。对乙肝病毒携带者,没有任何症状者,第一,要进行动态观察。每隔3~6个月到医院检查一下;第二,养成良好的生活习惯,对肝脏有害的习惯要改变,比如饮酒、吸烟等;第三,自己心理上不要有压力,应该和正常人一样生活;第四,患其他疾病就诊时,要向医生通报自己的情况,告诉医生自己是乙肝病毒携带者。这样,医生在用药时会考虑药物是否对肝脏有损害。&&&&& 据统计,一般乙肝病毒标志物(俗称两对半)是“大三阳”者,经肝穿证实约有30%~50%是肝炎患者,而且男性多于女性。乙肝病毒复制活跃,对他人传染性也强,自己患乙肝的可能性也大。复制弱的,或不复制的,传染的可能性小,患肝炎机会少。“大三阳”病毒复制活跃,传染性强,“小三阳”病毒复制弱,病毒基本上复制不活跃,所以人们普遍认为“大三阳”病情重,“小三阳”病情轻。& & & 真正决定患者病情轻重的大致有以下三种情况:1.有一小部分“小三阳”患者,其乙肝病毒DNA仍然为阳性,提示病毒复制仍然活跃,且有可能是乙肝病毒发生变异的结果,患者的病情可能较重和发展更快,应加以注意。2.无论患者是“大三阳”还是“小三阳”,如果肝功能正常,又没有明显的症状,都称为乙肝病毒携带者,而不能诊断为乙肝患者。乙肝病毒携带者中,大多数人是在婴幼儿时期感染乙肝病毒,由于当时机体免疫系统发育尚未完全成熟,无力清除病毒,乙肝病毒容易与其长期共处,而成为慢性携带者的。3.无论是“大三阳”还是“小三阳”,如果肝功能出现异常,或有临床症状、体征的,如肝脾肿大等,则应该判定为乙肝患者,需要积极治疗。医学研究证明,经过一定的时间之后,每年有5%~10%的“大三阳”者自然转为“小三阳”。这对每个“大三阳”的人来说,都是一种病毒得到清除的机会。因此,建议“大三阳”者不必过分担心。也不要把“大三阳”转为“小三阳”作为终生追求的目标。& &&& 慢性乙肝的发展分为三步:肝炎、肝硬化、肝癌。在没有出现第二、三种情况下,绝大部分都能治好。临床症状消失,体征消失,肝功恢复正常。一般来说,进展到肝硬化和肝癌的很少,其原因是多方面的。& & & 乙肝病毒携带者是否需要治疗,要看病毒复制是否活跃。如果病毒复制特别活跃,也可以考虑用抗病毒药物治疗。目前,比较好的抗病毒药物HbeAg阴转、HBV-DNA阴转率可以达到30%~40%,最高可以达到40%~60%。被医学界公认的抗病毒药物有干扰素、核苷类似物等为数不多的几种。& & & 一般说来,凡肝功能正常者,一般不要轻易使用抗病毒药物治疗,因为肝功不高,抗病毒的治疗应答情况就不会特别显著,从而导致抗病毒治疗事倍而功半,并且还有导致病毒耐药的可能性。我常常打一个比方——两军对垒时,敌人躲在壕沟里并未露头,你一定要向它的阵地开枪,既浪费子弹,又让敌人有了警惕之心,真要打他,也得等他蹦跶起来了再说。
发表于: 22:57:53
王冶大夫的信息
副主任医师
乙型、丙型病毒性肝炎抗病毒治疗、肝硬化抗肝纤维化和脂肪肝、酒精肝、药物性肝损害以...
王冶,男,副主任医师,擅长乙型、丙型病毒性肝炎抗病毒治疗、肝硬化抗肝纤维化和脂肪...
王冶的咨询范围:→ 为什么自己在不知道的情况下会得乙肝病毒呢
为什么自己在不知道的情况下会得乙肝病毒呢
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健康咨询描述:
为什么自己在不知道的情况下会得乙肝病毒呢?而且没有经过任何药物的情况下会好,是为什么呢?
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副主任医师
擅长: 以内儿科为主的全科医疗,对脑血管疾病,糖尿病,风湿
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&&&&&&病情分析:&&&&&&乙肝病毒感染的人很多,您可能与感染乙肝的人有过密切接触,而自己不知道。人的身体是有免疫力的,有很多人感染乙肝病毒后没经过治疗,靠自身的免疫力就把病毒给杀灭了,所以自己就好了。&&&&&&指导意见:&&&&&&保护好自身的免疫力。保持心情舒畅,练达豁达乐观的心态和性格;生活要有规律,起居有常,保证足够的睡眠;加强体育运动锻炼,早晨跑步晚上散步;不要吃辛辣肥腻煎炸生冷硬过咸过酸食物,不要暴饮暴食,饮食以八分饱为宜。这些都做到了您一定会身心健康,不容易生病,感染了病菌也容易靠自身的免疫力杀灭病菌而不得病或得病了也容易痊愈。
擅长: 两性健康,避孕,月经不调,感冒,内科疾病,临床常见
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&&&&&&病情分析:&&&&&&您好,乙肝是可以通过一些饮食传染,在感染之后是没有什么不适的,现在来说是不可以治愈的,但是有些人是可以通过自身的免疫力恢复,这是最好的。&&&&&&指导意见:&&&&&&建议您还是不用担心的,您老公的情况是没有问题的。
擅长: 前列腺炎,睾丸炎,静脉曲张等男性疾病;消化系统疾病
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&&&&&&病情分析:&&&&&&您好,这个都是因为被别人传染导致的。但是因为可能小学或者小孩子的时候打过疫苗,身体有了抗体,所以可能把传染来的病毒杀灭了&&&&&&指导意见:&&&&&&这样的情况,说明你日常接触的人物里面有人有乙肝,而且有传染性,你就需要每年复查一下,看抗体滴度,再判断要不要打疫苗加强针
&&&&&&以上是对“为什么自己在不知道的情况下会得乙肝病毒呢”这个问题的建议,希望对您有帮助,祝您健康!
擅长: 主要骨伤科,特别是颈腰椎疾病,各种骨折等,中医内科
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&&&&&&病情分析:&&&&&&您好,乙肝病毒传染性极强,只要与携带乙肝病毒的人接触,边有可能感染乙肝病毒。&&&&&&指导意见:&&&&&&没有经过任何药物的情况下会好,是因为你已经自身产生了抗体。对于体质好的人来说,免疫力强,不用注射疫苗,当感染病毒时,身体会自发消灭病毒,产生抗体。望您安康。
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&&&&&&病情分析:&&&&&&你还,乙肝病毒主要通过血液和母婴传播,密切接触也有可能感染的,有45%的人是不明原因而感染的。&&&&&&指导意见:&&&&&&有的人感染乙肝病毒后通过自身的免疫,能够清除病毒,产生免疫力,而有的人感染后机体可以终身携带乙肝病毒,这与个人的体质有关,希望我的回答对你有所帮助
疾病百科| 乙肝
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& 乙肝病毒基因检测必须重视的几个问题
乙肝病毒基因检测必须重视的几个问题
&&&&导读:药师为您详细讲解健片(乙肝健片)价格、乙肝健片(乙肝健片)疗效和适用范围等相关产品信息,让大家明明白白地买药,安全放心地治疗。百济药师祝您健康! && 乙型肝炎病毒基因检测技术(包括定性和定量)尚不完善,有些问题甚至比较严重,亟待解决。近年来,随着基因检测技术临床应用范围的不断扩大,尤其是在病毒性肝炎的诊断和效果观察方面,基因检测所发挥的作用越来越大,因此,对基因诊断技术本身的要求也越来越高。本文根据我们的研讨积累和临床实践,对乙型肝炎病毒基因检测技术方面存在的几个问题提出一些个人看法,希望引起重视。&&& 一、要合理选择基因检测方法&&& 最常用的基因检测方法是杂交法和PCR法,两种方法各有优点,但各又有不尽如人意之处。比较肯定的是:杂交法的特异性优于PCR法,PCR法的敏感度胜过杂交法。&&& 目前在检验方面,膜斑点杂交技术正逐步被微孔板杂交技术取代,也正是由于在微反应板上操作要比在硝酸纤维膜或尼龙膜上简便和精确得多,杂交法基因检测技术再次受到青睐。美国原Chiron公司发明的bDNA定量检测技术在很短时间内得到普遍认可就是很好的例证。bDNA技术不仅操作简便,而且由于采用了信号放大探针,提高了灵敏度;更由于检测系统中的夹心探针系化学合成的寡核苷酸,特异性进一步提高[1,2]。由于成本过高,目前国内主要将bDNA技术用于HBV、HCV基因的定量分析。更多的检验部门仍采用膜斑点杂交法定性检测HBV基因。&&& 作为一种分子生物学研讨手段,自90年代初以来,PCR技术对生命医学的贡献和还将发挥的作用是无法估量的,大家熟知的、目前进展十分迅速的人类基因组计划,如果不依靠PCR技术来完成基因筛选、克隆和测序的工作,要在限定的时间内完成这样一个庞大的计划是不可能的。PCR技术不仅是一种研讨手段,更是一类多功能的检验技术。在用于临床实验室诊断方面,PCR有其独特的优点。相对而言,近几年来基因定量PCR发展速度更快,其中竞争PCR和荧光PCR似成为当前的焦点话题。国内已有数个试剂公司开发了定量PCR的产品(包括定量PCR仪)。&&& 无论是基因定性还是定量检测,是选择杂交法还是PCR法,我们应当避免人为的好恶,从技术条件、临床需要、检测成本等多方面综合考虑。由于经验和知识的局限性,临床医生更多关心的是检测的结果,对检测过程或检测技术本身可能存在问题缺乏了解。就HBV基因检测而言,有一个重要问题需要在此特别提出:基因组和基因检测的差别及其对临床诊断可能带来的影响。基因组和基因的关系可以简单地理解成基因组是一个整体,它由多个功能不同的基因组成,决定生物体的遗传性状;而基因是个体,表达某一种产物发挥作用,或具有调节功能。PCR法只能检测某一个基因,或某一个基因的一部分(称之为基因片段)。比如,HBV基因组全长3.2kb左右,PCR法一般只是选择S或C基因300&#bp的片段进行扩增。以后还将谈到,由于扩增时必须使用引物,引物3’端一个碱基的突变将导致假阴性结果。而杂交法(bDNA或酶联夹心杂交)检测的则是HBV的基因组[3]。48组短的寡核苷酸(碱基数30个左右)在不同位点与HBV DNA杂交,其中10组是捕获探针,其余为信号检测探针。在有点突变的情况下,通过杂交法仍能保证有效地捕捉到目的基因,包括不同HBV基因亚型,在敏感度范围之内,完全可以避免发生假阳性和假阴性的结果。&&& 二、要重视血清标本的正确处理&&& 蛋白酶裂解后酚氯仿抽提,已经成为分离和提取血清标本中HBV DNA的“经典”方法。最近几年,为简化操作过程,有人采用柱抽提法,更有一些试剂公司提供某种“保密”试剂(大多是蛋白酶之类的裂解物),投入血清后再煮沸数分钟,即可获得用于PCR的模板。我们认为,无论是经典方法还是各种改良法,都必须关注下面三个要点:第一,目的基因的得率;第二,操作程序的简繁程度;第三,材料和时间的消耗。&&& 我们比较了包括蛋白酶裂解-酚氯仿抽提、碱变性、柱抽提、加蛋白酶K裂解后煮沸和血清直接煮沸等7种血清标本处理方法,对PCR扩增效率的影响,结果发现,血清直接煮沸法的扩增效率最高;经典的蛋白酶裂解-酚氯仿抽提法,不仅操作过程烦琐,而且目的基因的得率较低;柱抽提法虽然简化了一些步骤,但耗材昂贵,而且得率明显低于直接煮沸法。我们也尝试了用血清标本直接作为模板进行PCR,结果扩增效率最差,可能是血清中未经灭活的某些成分抑制了Taq酶活性的缘故[4]。上述结果表明,血清直接煮沸法,不仅操作十分简便、省材省时,而且HBV DNA的得率最高(大于70%),是HBV基因检测过程中血清标本处理的最佳选择。&&& 从上述结果引出这样两个问题:第一,有没有必要采用套式(亦称巢式)PCR,以提高血清HBV DNA的检测率。如果能首先解决好处理标本过程中目的基因的得率问题,那么我们就可以取得事半功倍的效果,在一定范围内还可以提高PCR法的特异性。第二,由于不同的抽提方法,HBV DNA的得率不同,因此,如果没有统一的血清标本处理方法,那么基因定量检测的准确性如何得到保证呢?这个问题在作PCR定量时显得尤为突出(杂交法定量若采用血清抽提物来检测,同样存在这个问题)。定量PCR法的原理是把“反应管”中的目的基因指数级地扩增到一定水平,再通过产物杂交,并与设定的内参照对比,推算“反应管”内的目的基因含量,并不等于原待测标本内的真正含量,因此血清标本处理过程种的目的基因的丢失及丢失量均无法计算。荧光PCR同样会因标本处理不当,使得定量结果不可靠。&&& 综上所述,任何基因定量手段必须采取统一的标本处理方法,同时还必须对确认的最佳方法进行反复比较,以确定其目的基因的得率。我们推荐血清直接煮沸法,优越性已如前所述。&&& 三、要解决由于基因突变所致PCR法假阴性的问题&&& 1998年以前,在PCR技术普遍应用于HBV DNA定性检测的一段时间内,我们常发现,某些HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)病人,血清HBV DNA检测阴性,似与病情不符。最近,我们将这部分标本采用酶联杂交法,以及多对引物PCR法复测,发现绝大多数标本HBV DNA阳性,少数与敏感度不够有关,过去的结果是假阴性。为进一步探讨假阴性的原因,我们改变了原来用于PCR扩增的引物序列,即同时或分别去除两根引物3端的最后一个碱基,再对上述HBV DNA阴性标本行PCR扩增,结果阳性。&&& 众所周知,PCR引物设计必须遵循一定原则,选择待测目的基因的保守区序列来设计引物,是首先要遵循的原则之一。乙型肝炎病毒基因组的S区基因最保守,C基因次之。我们曾比较过S区和C区引物,对乙肝病人血清标本扩增结果,发现C区引物的阳性率为S区的70%左右。但即使是S区基因,也有一些突变频率较高的区域或位点。最早确认HBV基因扩增引物的作者,采用了经验性的方法,即选择多对S区基因引物,扩增大量乙肝病人的血清标本,筛选出阳性率最高的一对引物。因为是“最高”,不是全部,所以不可避免地存在漏检或假阴性。从整体上看,PCR的漏检率可能很低,但漏检如果发生在某一个具体病人则是100%。这里也同样产生了两个问题:第一,如果某一项检测技术不能百分之百地避免假阴性,那么我们还有没有可能采取更积极的措施,以最大限度地减少假阴性?第二,临床医生是否对HBV DNA检测技术的局限性有足够的认识?是不是仅凭一张检验报告的阳性或阴性结果,作出HBV感染是与否的判断?&&& 与经验医学不同,现代医学要求临床医生必须不断更新知识,必须随时掌握各种现代诊断技术的基本原理和应用范围;同时,保持与临床检验人员的经常性沟通也是提高和体现临床医生诊疗水平的一个重要方面。就HBV基因检测技术而言,我们认为,对有疑问的阴性结果,应当采用杂交或多对引物PCR等方法来补救。&&& 四、如何处理PCR产物污染的问题&&& PCR技术因灵敏度很高和操作相对简便而在临床上被广泛应用。理论上,每一反应管内只要有一个基因存在就可能被扩增至可观察水平,而在实际用于HBV基因检测时,灵敏度也达到了100个基因/ml的水平。灵敏度过高可能会导致假阳性率增加,这是任何检测技术无法避免的事实。在导致PCR假阳性的因素中,产物污染是最严重、但又是可以避免的因素之一。在如何正确使用PCR技术,以提高临床诊断水平这个问题上,我国曾为之付出过沉重的代价。防止PCR产物污染,以避免假阳性和提高PCR诊断技术的稳定性已成为急待解决的问题。因噎废食,禁止使用PCR技术显然是不明智之举,但良策是什么?出路在哪里?&&& 采用一种能识别核酸双链分子中的UTP并降解核酸的UNG酶,在下一次PCR之前对模板及其它反应物进行处理,可以防止因产物污染所致的假阳性。目前我国国家药政部门在接受PCR相关检测试剂盒申报时,已经把是否采用了UNG酶作为审批条件之一。但在现阶段还存在一些技术问题,其中UNG酶的活性保存非常重要。如果使用了失活的UNG酶,同时检验人员因为知道使用了UNG酶系统,而放松PCR产物的常规处理,将会导致更为严重的后果。另外,目前UNG酶的造价不低,每一检测人份的费用上升比较明显。但随着重组UNG酶生产和纯化技术的成熟,造价将会降低。今后,UNG酶及其相应的系统将成为常规PCR检测试剂盒的组份。&&& 然而,我们不能因为UNG酶系统的应用,而疏于PCR操作过程的规范化。事实上,自PCR技术诞生之日起,为保证实验研讨的顺利开展和临床检测的精确可靠,发明人就已经明确规定了应用PCR技术必须具备的实验室条件、人员技能和各种防污染措施。比如:具备三间可通风、进出有序和功能不同的工作室;各室配备专用移液器并不得互换使用;使用带过滤芯的一次性移液头;每次反应均要设置阴、阳性对照;检验人员必须接受专门训练,等等。我们的实践经验表明,只要严格按照上述规定操作,就完全可以避免产物污染所造成的假阳性。因此,我国今后仍必须在实验室管理方面加大力度,除了对试剂盒严格把关外,还要坚决取缔缺乏条件(包括实验室和人员条件)的检验机构开展常规PCR检测。&&& 五、基因定量检测不应该对灵敏度提出过高要求&&& 与反映机体疾病严重程度的某些生化指标不同,病原体基因检测结果的“有”和“无”(定性)要比“高”和“低”(定量)的意义更大。目前,对许多感染性疾病而言,血液和组织内病原体含量的高低与组织损伤程度、对治疗的反应性以及预后的关系等都未完全阐明。病原体基因定量分析只有在HBV、HCV、HIV等病毒感染方面的应用价值得到了肯定[5,6]。&&& 从技术角度考虑,灵敏度、特异性和精确度是考核基因定量分析方法的重要指标,最理想的是这三项指标均优;但从临床工作的需要来看,针对不同病人和疾病的不同阶段,对检测技术参数的要求有所侧重。以HBV基因定量为例,使用干扰素抗病毒治疗的病人,判断效果的重要手段之一是观察HBV基因含量的变化:在治疗后的最初13个月,病毒基因呈对数级地下降,往往预示有反应性;继之,至某一阶段降至杂交法的敏感度下面,最终病毒可能被完全清除。PCR定量技术可以把敏感度提高到检测每毫升100个拷贝的水平[7,8],但低于杂交检测cut-off值(如bDNA为700000拷贝/ml)的HBV基因量,即足以充分反映抗病毒治疗的效果,再进一步量化的意义不大,在一定时间内作定性检查即可。因此,我们认为,在建立和开发各种基因定量分析技术的过程中,不要脱离临床实际过于强调灵敏度。&&& 六、基因检测和免疫学检测技术具有互补性&&& 诊断HBV感染的免疫学研究是著名的“两对半”,又称之为HBV免疫标志物。过去由于无法对HBV感染作病原学检查,曾一度经津津乐道于分析“两对半”检测结果及其各种组合形式与感染状态、传染性及对治疗的反应性等问题之间的关系。最典型的例子莫过于把所谓“血清转化(serum conversion)”,即HBeAg消失,出现抗-HBe看作抗病毒治疗有效的标志,后来发现在这些发生了“血清转化”的病人中,有部分病人系病毒在药物(如干扰素)的选择或免疫压力下产生了前C基因突变,不表达HBeAg,但血清HBV DNA则阳性,甚至含量很高。病毒基因变异所致的一系列病毒表型的改变,向免疫学诊断提出了严峻的挑战。基因诊断(包括突变基因分析),技术很好地解决了这个问题。有人甚至捕捉到这样一个重要信息:在约6%的抗-HBs阳性HBV感染者的血清中,检出HBV DNA。使我们认识到,HBV S基因变异形成突变的包膜蛋白,使一贯被认为是保护型抗体的抗-HBs失去中和病毒的作用。&&& 以上我们从一个侧面阐述了基因检测的重要性,但我们不能因此而断言病毒基因检测可以取代免疫学检测。基因检测所显示的优越性也恰恰是它的缺陷之所在,因为我们只能通过它来判断病原体的有无和量的多少,至于病原体进入体内之后,机体作出了何种反应?程度如何?反应的结果如何?等等,基因检测结果不能对此类问题作出全面的回答。众所周知,感染后的免疫应答,包括体液和细胞免疫应答,是感染病学和免疫学的重要研讨内容,也是判断被感染者病情、治疗反应、预后,以及流行病学调查的重要依据。客观地讲,基因检测和免疫学检测技术在目前应当互补共存,绝大多数情况下两者缺一不可。& &&&&拥有300多种肝病用药,囊括乙肝、、脂肪肝、肝纤维化、肝硬化、胆道疾病等病种的多种主流药品及新药品。百济药师为您提供乙肝健片(乙肝健片)说明书、乙肝健片(乙肝健片)价格、乙肝健片(乙肝健片)疗效,以及日常护理指南。
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