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肿瘤医院DC-CIK治疗卵巢癌扩散难题
　 卵巢癌是女性生殖器官常见的肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。作为是常见的癌症之一，卵巢癌能够做早早发现会有很高的治愈率。但是由于早期症状并不明显，所以大部份的妇女当被发现是卵巢癌的时候，通常都已经扩散，成为较晚期的癌症。&&& 北京肿瘤医院()专家称卵巢癌无论在诊断和治疗上确是一大难题。多年来专家们对卵巢恶性肿瘤的病理形态，临床发生发展规律及治疗方案进行了许多的探讨，积累了大量的经验，生物治疗的前沿技术有生物细胞免疫治疗、基因治疗、癌症干细胞靶向治疗等，目前临床较成熟的是细胞免疫治疗，尤以CIK细胞及DC细胞治疗效果为最好。CIK细胞即细胞因子诱导的杀伤细胞，是从外周血、骨髓或脐血中分离出单个核细胞，经过一定时间培养而获得的一种免疫活性细胞。这种活性细胞通过实验室内诱导、增殖，大量回输到患者体内，可以在不损伤机体免疫系统结构和功能的前提下，直接识别和杀死存在于血液、淋巴中的肿瘤细胞，清除残留肿瘤病灶，调节和增强机体的免疫功能，其优点是：&&& 增殖速度快、具有杀瘤活性高。杀瘤谱广、对多种耐药肿瘤细胞同样敏感，对正常骨髓造血前提细胞毒性很小的优点。应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。 307医院是经总后卫生部批准的全军肿瘤中心，也是全军首个获准开展肿瘤细胞免疫治疗的机构，该院开展最新免疫细胞DC（激活免疫系统的抗原提呈细胞）-CIK（细胞因子诱导的肿瘤杀伤细胞）治疗，实现了关键技术上的重大突破！该中心的细胞免疫疗法是通过从患者体内提取外周血，采用美国专利技术进行体外抗原负载培养后，将其回输患者体内，激活并繁殖大量肿瘤杀伤及机体免疫细胞，比其它细胞疗法有效率增加5倍以上，在精确捕杀清除残留、微小肿瘤病灶同时，提升机体免疫力，防止癌细胞扩散和复发，有效治疗胃癌、肾癌、肺癌、结肠癌、肝癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌以及急慢性血液系统等各类恶性疾病。 北京307医院 北京肿瘤医院
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网站信息仅供参考，不能作为诊断及医疗的依据，就医请遵照医生诊断【论文】造血干细胞移植后淋巴细胞增殖症患者单个核细胞来源DC负载EBV抗原肽制备DC-CIK_百度文库
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造血干细胞移植后淋巴细胞增殖症患者单个核细胞来源DC负载EBV抗原肽制备DC-CIK目​的​：​以​造​血​干​细​胞​移​植​后​并​发​淋​巴​细​胞​增​殖​症​(​p​o​s​t​-​t​r​a​n​s​p​l​a​n​t​ ​l​y​m​p​h​o​l​i​f​e​r​a​t​i​v​e​ ​d​i​s​o​r​d​e​r​,​P​T​L​D​)​患​者​外​周​血​单​核​细​胞​培​养​诱​导​D​C​,​负​载​抗​原​肽​后​制​备​D​C​-​C​I​K​(​c​y​t​o​k​i​n​e​-​i​n​d​u​c​e​d​ ​k​i​l​l​e​r​ ​c​e​l​l​)​,​为​探​索​新​的​P​T​L​D​治​疗​方​法​奠​定​基​础​。​方​法​：​分​离​造​血​干​细​胞​移​植​后​E​B​V​(​E​p​s​t​e​i​n​-​B​a​r​r​ ​v​i​r​u​s​)​感​染​致​P​L​T​D​患​者​外​周​血​单​个​核​细​胞​,​贴​壁​细​胞​培​养​诱​导​D​C​,​悬​浮​细​胞​诱​导​C​I​K​;​负​载​E​B​V​抗​原​肽​L​M​P后​建​立​D​C​-
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同期刊文献DC-CIK对急性髓细胞白血病干细胞作用的研究--《兰州大学》2011年硕士论文
DC-CIK对急性髓细胞白血病干细胞作用的研究
【摘要】：目的：研究树突状细胞(DC)联合同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对急性髓细胞白血病细胞株KG-1a中白血病干细胞的杀伤及诱导凋亡作用,从而为细胞免疫治疗清除残存白血病提供理论基础和实验依据。
方法：采用Ficoll密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),静置培养3小时后,贴壁细胞用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素4(rh IL-4)诱导培养DC,悬浮细胞用重组人白介素2(rh IL-2)、重组人白介素1(rh IL-1)、重组人干扰素r(rh IFN-r)和重组人CD3单克隆抗体(rh CD3mAb)诱导培养CIK。将KG-1a细胞冻融物作为抗原负载DC,与同源CIK共培养作为实验组(pulsed-DC-CIK),无抗原负载的DC与CIK共培养作为对照组(DC-CIK),以CIK单独培养作为空白对照组。光镜下观察细胞形态学变化及增殖情况,流式细胞仪鉴定DC及CIK细胞免疫表型,流式细胞术检测各组对白血病干细胞(CD34+CD38-CD123+)的杀伤效应的前后比较,及DC-CIK对CD34+CD38-CD123+亚群诱导凋亡的比较。
结果：体外培养的DC具有典型的形态学表现及表型特点；培养12天时,pulsed-DC-CIK组、DC-CIK组及CIK组中CD3+CD56+比例依次升高,差异有统计学意义(P0.05)；对白血病干细胞的杀伤效应(CD34+CD38-CD123+亚群比例),pulsed-DC-CIK组与DC-CIK组杀伤效应最强,两组差异无统计学意义(P0.05),与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)；DC-CIK对KG-1a细胞有诱导凋亡作用,凋亡率由(2.34±0.74)%升至(12.27±1.01)%,差异有统计学意义(P0.05),但对其中CD34+CD38-CD123+细胞亚群无明显的诱导凋亡作用。
结论：DC联合CIK对急性髓细胞白血病干细胞有明显的杀伤作用,能诱导急性髓细胞白血病细胞株KG-1a细胞凋亡,但对白血病干细胞的诱导凋亡作用不明显,DC-CIK可作为清除残存白血病的重要方法,使治愈白血病成为可能,以此为细胞免疫治疗清除残存白血病提供理论基础和实验依据。
【关键词】：
【学位授予单位】：兰州大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2011【分类号】：R733.71【目录】：
中文摘要3-4
Abstract4-8
一. 白血病治疗现状8-9
二. 肿瘤干细胞及白血病干细胞9-10
三. 白血病干细胞的靶向治疗10-13
四. 过继性细胞免疫治疗(adoptive cellular immnuotherapy,ACI)13
五. 树突状细胞(dendritic cell,DC)13-14
六. 细胞因子诱导的杀伤细胞(etytokine-induced killer cell,CIK)14-19
材料与方法19-24
1. 研究对象19
2. 实验分组19
3. 观察指标19
4. 试剂、材料和仪器19-20
4.1 细胞株19-20
4.2 试剂20
4.3 仪器和材料20
5. 实验方法20-23
5.1 KG-1a细胞的复苏与培养20-21
5.2 KG-1a细胞冻融抗原的制备21
5.3 外周血单个核细胞的分离21
5.4 DC的培养21
5.5 CIK的培养21-22
5.6 DC和CIK体外共培养22
5.7 DC与CIK免疫表型检测22
5.8 CD34~+CD38~-CD123~+白血病干细胞杀伤检测22
5.9 CD34~+CD38~-CD123~+白血病干细胞凋亡检测22-23
6. 统计学方法23-24
1. KG-1a细胞株形态学观察及LSC表型鉴定24
2. DC形态学观察24-25
3. DC免疫表型分析25-26
4. CIK与DC共育前后增殖活性与免疫表型分析26-29
5. 杀伤前后KG-1a细胞中CD34~+CD38~-CD123~-细胞比例分析29-30
6. DC-CIK对KG-1a细胞及CD34~+CD38~-CD123~-细胞凋亡分析30-32
参考文献35-39
硕士期间研究成果39-40
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【参考文献】
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