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检测抗肿瘤药物的内在活性活性时如何防止细胞大量死亡。
检测抗肿瘤药物的内在活性活性时如何防止细胞大量死亡。
来源:蜘蛛抓取(WebSpider) 时间:2011-11-23 01:46 标签:
药物的内在活性
细胞毒性是由细胞或者化学物質引起的单纯的细胞杀伤事件不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。有时需要进行特定物质细胞毒性的检测比如药物的内在活性筛选。 细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测常用以下几种方法: MTT、XTT法:利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化然后通过酶标仪进行检测 LDH的方法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性 其它酶方法:洳检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等 细胞增殖能力分析试剂盒 原理:正常细胞代谢旺盛其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值从而检测到细胞增值状态 熒光素发光法细胞生存能力检测 原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中,AK具有激活ADP生成ATP当细胞受损后,细胞膜發生破损AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光通过化学发光仪可以定量进行检测。 LDH法细胞毒性检测 原理:LDH(乳酸脱氢酶)是一种稳定的蛋白质存在于正常细胞的胞质中,一旦细胞膜受损LDH即被释放到细胞外; LDH催化乳酸形成丙酮酸盐,和INT(四唑盐类)反应形成紫色的结晶物质可通过500nm酶标仪进行检测。通过检测细胞培养上清中LDH的活性可判断细胞受损的程度 "细胞毒性" 英文对照 cytotoxic; cell toxicity; cytotoxicity; "细胞毒性" 在学术文献中的解释 1、根据欧洲标准化组织CEN1992年30号文件的定义,细胞毒性是指由产品、材料及其浸渍物所造成的细胞死亡、细胞溶解和细胞生长抑制 文献来源 2、细胞毒性是指该物质对培养细胞的毒性通常用P--388LulZ0白血病细胞或KB腫瘤细胞作体外试验.检验海洋天然产物的细胞毒性常利用海胆受精卵观察样品对其细胞分裂的抑制作用 文献来源 3、强其细胞毒性並促进这两种细胞增殖又称为细胞毒性
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