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大鼠睾丸组织支持细胞生殖细胞长期共培养的精子发生分析及猪精原干细胞的体外初步探究.ashx.pdf文档全文免费阅读、在线看 68页
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内蒙古大学
硕士学位论文
大鼠睾丸组织支持细胞/生殖细胞长期共培养的精子发生分析及
猪精原干细胞的体外初步研究
姓名:刘林洪
申请学位级别:硕士
专业:动物学
指导教师:吴应积
大鼠睾丸组织sGc长期共培养的精子发生分析及猪精原干细胞的体外初步研究
大鼠睾丸组织支持细胞/生殖细胞长期共培养的精子发生分析及猪精
原干细胞的体外初步研究
虽然对精子发生过程的研究取得了很多进展,但是体内体外研究模型的缺
乏导致依然有众多问题未得到解决。哺乳动物的精子发生是通过复杂的增殖分
化过程最终产生精子。睾丸发育、成熟与精子发生的研究受限于模式动物,对
大型家畜和人的研究很少。睾丸体外生殖模型的发展为体外研究睾丸的精子发
生分子机制和睾丸毒理学提供实验工具。但是,很多已建立的模型都无法真正
模拟体内的复杂的生化分子及功能性相互作用,从而导致其研究价值有限。
精子发生过程发生在生精上皮,包含三个过程。第一.精原干细胞
(Spe咖atogonial
形成前细线型初级精母细胞。形成DNA联会复合体后,前细线型初级精母细胞
进一步完成减数分裂形成2个次级精母细胞,最后形成圆形精子细胞。第三闾形
精子细胞完成变态过程,成为长形精子。
纯化导致研究SSCs的增殖更新分化很困难。虽然在体内通过形态学可以鉴定和
完善的体外SSCs培养鉴定体系对于研究SSCs的增殖更新十分关键。
内蒙古大学
硕士学位论文
1.大鼠睾丸曲细精管组织支持细胞/生殖细胞长期共培养与精子发生分析
本实验已经建立了大鼠睾丸曲细精管组织支持细胞/生殖细胞长期共培养体
系。采用大鼠睾丸组织块培养法,将15日龄的大鼠睾丸组织,用含10%标准胎牛
细精管组织块迁移到培养皿上,在不添加任何生长因子的情况下维持体外精子
发生至圆形精子细胞超过2.5个月。在培养1—2周时,可观察到从曲细精管中游离
出的支持细胞贴壁生长;生殖细胞在支持细胞附近贴壁生长。从共培养两周开
始,体系中能一直观察到各级精母细胞和精子细胞,说明体系中存在有精原干
细胞不断地进行减数分裂分化为精母细胞和精子细胞。
2.大鼠睾丸曲细精管组织支持细胞/生殖细胞长期共培养中各类细胞的鉴定
以及SOx9阳性细胞存在。这些结果例证了体系中同时存在精原干细胞、精母细
胞、精子细胞和支持细胞。这一结果进一步弥补了形态学观察上的不足,表明
了组织块和共生的支持细胞为生殖细胞的增殖和分化提供了营养因子和调节因
子。实验中建立的体外共培养体系可用于雄性生殖分子机制研究和环境毒理学
3.猪精原干细胞的分离纯化及长期培养
本实验以10周斯格猪为研究对象,利用两步酶消化法分离得到睾丸曲细精
管细胞悬液,根据精原干细胞与体细胞及各级分化生精细胞的贴壁能力及对细
胞外基质粘附力的不同,将猪精原干细胞进行差异贴壁纯化。统计表明:每29
大鼠睾丸组织sGC长期共培养的精子发生分析及猪精原干细胞的体外初步研究
殖能力,是一种高效的猪SSCs分离纯化方法。
串状的SSCs细胞克隆形态不变。而且可在体外任意培养时期进行冷冻保存,解
冻后可迅速恢复生长。
此外,本实验运用睾丸冰冻切片免疫荧光染色对斯格猪睾丸内SSCs的形态
及定位进行了检测,并证实用于体外分离培养的猪精原干细胞鉴定的标记基因
对长期培养的猪SSCs进行蛋白水平的鉴定。经细胞免疫荧光分析,体外分离培
基因蛋白质产物。为下一步猪SSCs的研究奠定基础。
关键词:大鼠,支持细胞/生殖细胞体外共培养体系,猪,精原干细胞
内蒙古大学
硕士学位论文
LONG-TERMC
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高达破坏者3实用零件出处一览
时间: 11:55:40 来源: 作者:Van♂ 热度: 236 次
《高达破坏者3》由于在2代的基础上对不少零件都添加的有用的效果,因此感觉需要更多的时间来刷刷刷,从目前刷到的一些零件中整理出下面这些比较实用的,汇总说说效果和出处。
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HP自动恢复型零件:
ナノスキン
每秒回复HP2000
倒A高达及倒X的头部部件(Head)、手臂部件(Arms)、腿部部件(Legs)
自己修復型マイクロマシナリーテクノロジー
每秒回复HP1500
每秒回复HP1000
EX动作时间延长型零件:
ツインドライヴシステム
00系的三红时间+15秒
00R、00高达七剑的太阳炉
GNドライヴ
00系的三红时间+10秒
擬似太陽炉
00系的三红时间+5秒
放熱フィン
00系的三红时间+5秒
射击残弹量up :
ダブル?パック
射击武器残弹量上升30%
高达TR-1海兹尔的腿部部件(Leg)
可选择性装备残弹回复速度up:
ハイパーデュートリオンエンジン
可选择性装备残弹回复速度上升20%
命运、传说、强袭自由高达的躯体部件(Body)
可选择性装备残弹量up:
パワーエクステンダー
可选择性装备残弹量上升30%
强袭高达躯体部件(Body)
自机部件防脱落耐性:
関節シーリング
自机部件防脱落耐性上升25%
全装甲高达头部部件(Head)
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游戏平台:
游戏类型:动作
游戏版本:日版中文版
游戏标签:
玩家评分:37
k73评分:44
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