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版权所有& CopyRight , , All Rights Reserved不同产地和生长年限三七花蕾中总皂苷及单体皂苷的含量测定-中药对照品知识-中国兽药网整理_检验技术_生产质量管理_资讯生猪养殖-兽药行业资讯-兽药_中国兽药网,,网上兽药都
不同产地和生长年限三七花蕾中总皂苷及单体皂苷的含量测定-中药对照品知识-中国兽药网整理
不同产地和生长年限三七花蕾中总皂苷及单体皂苷的含量测定
&&&&nbsp三七花蕾是五加科植物三七(Panax Notoginseng (Burk)F．H．Chen) 的干燥花蕾(F1ower buds of Panax notoginseng (Burk)F．H．Chen)。主产于云南文山壮族苗 族自治州。研究发现，三七地上部分与地下部分所含皂 苷成分不同，三七花是三七全株中人参皂苷含量最高的 部位，达13％以上，以人参二醇型皂苷，即Rb族皂苷为 主[1_2]。本文对三七主产区云南文山不同产地、生长年限 三七花蕾中总皂苷和单体皂苷Rbl、Rb3的含量进行了 测定，为三七花的质量评价及开发利用提供依据。
&1 仪器与材料
&三七花(分别采自文山县、砚山县、麻栗坡县、邱北 县)；人参二醇对照品(批号1 1)、人参皂苷 Rbl对照品(批号0319)、人参皂苷Rb3对照 品(批号0501)。均由中国药品生物制品检定 所提供。甲醇、乙腈为色谱醇，其余试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。
&隽 卜可见1分光光岗十 V 8453 Agilent Technologies)； Agilent 1100高效液相色谱仪f配有在线脱气机 JP， 四元泵DE 自动进样器 PE， 柱温箱DE，DAD 检测器 DE)；旋转蒸发仪(上海中生科技有限公司)； HHS型电热恒温水浴锅；FA1004N分析天平(上海精 密科学仪器有限公司)；AG135分析天平(Mettler T0 led0)。
&2 方法与结果
&2．1 总皂苷的含量测定
&2．1．1 吸收波长的确定
&分别精密吸取适量人参二醇 对照品溶液、芦丁对照品溶液、葡萄糖对照品溶液、三七 花蕾总皂苷样品溶液，至磨口具塞试管中，热水浴挥干 溶剂，加5％香草醛冰醋酸溶液(新配置)0．2 ml，高氯酸 0．8 ml，于60℃恒温水浴15 min，立即取出置冰水浴内 冷却，加冰醋酸5．0 ml摇匀，以相应试剂为空白，紫外分 光光度仪上扫描。
&结果表明，人参二醇对照品溶液和三七花蕾皂苷样品溶液显色后于548 nm处有一明显吸收峰，芦丁对照 品溶液、葡萄糖对照品溶液显色后在此波长下无吸收， 说明三七花中黄酮类和糖类成分无干扰，因此选择548 nm 为三七花蕾总皂苷的吸收波长。
&2．1．2 测定方法
&香草醛一冰醋酸显色法：精密吸取样 品液至磨口具塞试管中，热水浴挥干溶剂，加5％香草 醛冰醋酸溶液(新配置)O．2 ml，高氯酸0．8Ⅱd，于60℃恒温 水浴15min，立即取出置冰水浴内冷却，加冰醋酸5．0ml 摇匀，以相应试剂为空白，紫外分光光度仪548 nm处测 定吸光度，计算总皂苷含量。
&2．1-3 供试品溶液的制备
&取三七花蕾粉碎成粗粉，取 0．1 精密称定，置于索氏提取器中，加6O ml甲醇，提取 6 h，提取液水浴浓缩，甲醇定容至1Oml，备用。
&2．1．4 标准曲线的制备
&取人参二醇对照品适量，精 密称定，置5 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇 匀，精密量取25 l、5O l、75 l、100卜Ll、125 l，分别置 2O m1磨口具塞试管中，热水浴挥干溶剂，加5％香草醛 冰醋酸溶液(新配置)0。2 ml，高氯酸0．8Ⅱd，于6O℃恒温 水浴15 min，立即取出置冰水浴内冷却，加冰醋酸5．0 ml 摇匀，以相应试剂为空白，在548 nm波长处测定吸收 度，以总皂苷含量为横坐标，吸光度(ABS)为纵坐标作 图，得标准曲线：v：0。+0．0329(其中2．0为Rb 族20(S)一原人参二醇型皂苷与20(S)一原人参二醇的 转换系数)，r=0．998，结果表明人参二醇在26．5～132．5 LLg 范围内线性关系良好。
&2．1．5 精密度考察
&精密量取人参二醇对照品溶液 (1．06 m~m1)40 l，按2．1．2项下所述方法进行香草醛一 冰醋酸显色，紫外分光光度仪548 nm处连续测定6次， 测得吸光度RSD值为O．64％ 表明精密度良好。
&2．1．6 重现性考察
&取同一批样品6份，精密称定，按 2．1．2项操作，测定含量，结果总皂苷含量平均值为 14．69％ ，RSD=0．24％ 。
&2．1．7 稳定性实验
&取供试品溶液按2．1．2．项下的方法 每隔一定时间测定～次，结果RSD：0．16％ 表明三七花 总皂苷在显色6 h内吸收值基本稳定。
&2．1．8 回收率试验
&精密称取一定量的人参二醇对照 品加入到已测定含量的样品中，按2．1．3项操作制备，按 2．1．2项测定含量，计算加样回收率，结果平均回收率为 1oo．OO％ ，RSD=0．13％ 。
&2．1．9 样品测定
&结果见表3
&2．2 单体皂苷的含量测定
&2．2．1 色谱条件与系统适用性
&色谱柱为Kromasil C一18柱(250 mmx4．6 mm，5 m)，以乙腈、水为流动相按下 表进行梯度洗脱，检测波长为203 nm，柱温：25℃，进样 量为1O LLl
&2．2．2 供试品溶液的制备
&取药材粗粉0．1 g，精密称 定，置于索氏提取器中，加6OⅡd甲醇，提取6 h，提取液 浓缩至1O m1。加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀， 用微孔滤膜(O．45 LLm)滤过，取续滤液，备用。
&2．2．3 对照品溶液的制备
&取人参皂苷Rbl和人参皂 苷Rb3对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含人 参皂苷Rbl 0．6 mg和人参皂苷Rb3 2．0 mg的溶液。 2．2．4 标准曲线 分别精密量取对照品溶液0．5、1．0、 2．0、3．0、4．0、5．0Ⅱd，置1O m1容量瓶中，甲醇稀释至刻 度，取1O LLl进样，测定峰面积。以峰面积积分值为纵坐 标，样品量为横坐标，作线性回归，得回归方程(表2)。
&2．2．5 精密度
&精密量取22．3项下的对照品溶液1O LLl， 连续进样6次，测得人参皂苷Rbl和人参皂苷Rb3对 照品溶液的峰面积平均值分别为69．32， RSD分别为0．12％和0．48％。
&2．2,6 重现性实验
&取同一批样品6份，精密称定，按 2．2．1、2．2．2项操作，测定含量，结果人参皂苷Rbl和人 参皂苷Rb3的含量分别为1．64％、5．11％ ，RSD分别为 0-33％和0．47％。
&2．2．7 稳定性实验
&取供试品溶液按2．2．1项下的方法 每隔一定时间测定一次，结果人参皂苷Rbl和人参皂 苷Rb3的峰面积的RSD分别为O．96％和1．05％ 表明样 品在48 h内基本稳定。
&2．2．8 回收率试验
&精密称取一定量的人参皂苷Rbl 和人参皂苷Rb3对照品加入到已测定含量的样品中， 按2．2．2项操作制备，测定含量，计算加样回收率，结果 平均回收率为97．81％、100．96％ ，RSD分别为2．69％ 、 】．05％ 。
&关于三七花中总皂苷的含量测定，有以三七总皂苷、人参皂苷Rbl为对照品采用比色法进行含量测定 的文献报道[引。三七花为名贵中药三七的地上部分，其 所含总皂苷以人参二醇型皂苷为主，而地下部分三七所 含总皂苷以人参三醇型皂苷为主。因此，本文采用人参 二醇为对照品，同时在方法学考察中排除三七花中黄酮 类和糖类成分的干扰，使所用方法专属性更强，准确性 更高。
&13批三七花样品的含量测定结果显示：产地和生 长年限不同，三七花所含总皂苷和人参皂苷Rbl、Rb3 的含量有显著性差异；总皂苷的含量与两个单体皂苷的 含量趋势呈对应关系；三年生的药材中总皂苷和单体皂 苷含量都高于同产地二年生的药材，这符合民间“三七 花入药用三年生”的传统。
&三七花中人参皂苷Rbl和Rb3在200 nm左右波 长处有末端吸收，本文采用DAD检测器可以很好地消除 杂质峰的干扰，峰形好，分离度高。柱温和流速对分离效 果影响较大，经反复实验，以柱温25℃，流速0．5 ml／min 为佳。
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16:56:08&|&来源：家庭医生报&|&责任编辑：家庭医生网
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&&&&& 三七又名田三七或参三七，为五加科多年生草本植物三七的根，与人参同属一科，主产于云南和广西一带。三七性温而味甘微苦，入肝、胃经，能活血化瘀、补气止血、消肿止痛。本品可以治疗瘀血阻滞、跌打损伤、气滞血瘀所引起的疼痛；又可治疗各种出血症，既能止血，又不留瘀，有散瘀止血之功效。
&&&&& 三七一般加工为三七粉或三七片及三七胶囊运用于临床。三七粉既可外用，更可内服。外用多用于外伤止血，能明显缩短出血和凝血的时间，并使伤口外周血中血小板的数量迅速增加，因而止血的效果十分显著。内服可治疗多种疾病，每次取三七粉０．５克～１克，每天３次，用于治疗冠心病心绞痛、、动脉硬化、高脂血症、颅脑外伤、痛经、痔疮出血、胃及十二指肠溃疡、脑出血、血瘀型肝炎等。
&&&&& 中成药三七片或三七胶囊尤为常用。片剂每片０．５克，口服每次２～６片，每天３次；胶囊剂每粒０．３克，口服每次６～８粒， 每天两次。口服片剂或胶囊剂可以治疗咯血、吐血、衄血（鼻流血）、崩漏、痔疮出血、尿血、各种外伤出血、胸腹刺痛及跌仆肿痛等症；又可治疗冠心病、心律失常、原发性血小板减少紫癜、高脂血症、、动脉硬化、脑梗死等。
&&&&& 三七乃活血止血良药，为广大患病群众所喜用。但不可贪效滥服，一般病愈即止。如果过量服用，也会引起皮肤过敏或球结膜溢血等副作用。孕妇尤应忌服，恐其久服可能引起流产。因此，中药三七亦应在指导下合理地服用，不可擅自作主任意多服久服。
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