益生菌对增加肠道益生菌的作用

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视频:食品专家解读益生菌十大功能
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食品专家解读益生菌十大功能
(责任编辑:余海涛)
军演日美双方共投入4.4万人,其规模是美韩军演的6倍。日防卫大臣北泽俊美说:“考虑周边安全保障环境的变化情况,演习不针对特定国家。”…利用Caco-2细胞研究三种常用乳制品益生菌对肠道屏障功能影响--《吉林大学》2012年硕士论文
利用Caco-2细胞研究三种常用乳制品益生菌对肠道屏障功能影响
【摘要】:益生菌具有多种生理功能,被广泛应用于食品及医药领域,新型菌种的出现也加快了益生菌产业化的进程,同时益生菌的安全性问题引起了广大学者关注,大多数的益生菌在长期的使用过程中被认为是相对安全的,但是近年来许多菌属从人的感染性损伤组织中分离出来,并且也出现服用益生菌制品所导致的病例,这使得益生菌的安全性成为一个不容忽视的问题,引起了人们对益生菌安全性的重新认识。
目的:保加利亚杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌是乳制品中常用的三种益生菌,本文采用体外Caco-2细胞模型方法考察这三种常用乳制品益生菌对肠道屏障功能的影响,探讨这三种菌是否存在潜在的安全性问题。
方法:保加利亚杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌的活化培养,调整益生菌的浓度为102-108cfu/mL,分别与Caco-2细胞共培养,用MTT比色法考察这三种菌对Caco-2细胞的毒性作用,计算本实验条件下三种益生菌的IC50,将同一浓度三种益生菌按照1:1:1比例混合并计算混合菌的IC50;益生菌以108cfu/mL的浓度与分化的Caco-2细胞共培养48h,ELISA方法检测细胞因子IL-1β、IL-10、TNF-α和IFN-γ的分泌;建立Caco-2单层细胞模型,益生菌以108cfu/mL的浓度与单层模型共培养24h,酶标仪检测酚红的透过率,透射电镜观察细胞模型的紧密连接结构;益生菌以108cfu/mL的浓度与Caco-2细胞共培养24h,通过免疫荧光法标记Caco-2细胞的β-微管蛋白,在激光共聚焦显微镜下观察;益生菌以108cfu/mL的浓度与Caco-2细胞共培养24h,western blot分析Caco-2细胞紧密连接蛋白Occludin的表达。
结果:保加利亚杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和混合菌在较低浓度时(≤104cfu/mL)对Caco-2细胞的增殖无显著影响,未表现出细胞毒性作用,当这三种益生菌的浓度≥105cfu/mL时,可显著的抑制Caco-2细胞(结肠癌细胞)增殖,当浓度≥107cfu/mL时,三种益生菌对Caco-2细胞表现出了细胞毒性作用,并计算得出了三种益生菌在本实验条件下的的半数抑制浓度(IC50),保加利亚杆菌IC50=1.19108cfu/mL、嗜酸乳杆菌IC50=3.93108cfu/mL、嗜热链球菌IC50=2.02108cfu/mL,混合菌IC50=3.93108cfu/mL益生菌对体外培养的Caco-2细胞无联合毒性作用;保加利亚杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌(108cfu/mL)作用于Caco-2细胞48h后,细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ及IL-10分泌无影响;保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌(108cfu/mL)作用于Caco-2细胞单层模型24h、48h、72h后,对Caco-2细胞单层模型酚红透过率无影响,嗜热链球菌(108cfu/mL)作用于72h后,显著增加了Caco-2细胞单层酚红透过率,三种益生菌作用24h后,在透射电镜下观察紧密连接结构完好,未出现异常变化,保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌单独作用未对细胞单层的紧密连接结构产生破坏性的影响;保加利亚杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌(108cfu/mL)与Caco-2细胞共培养24h,对细胞骨架蛋白β-tublin无影响;保加利亚杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌(108cfu/mL)与Caco-2细胞共培养24h,Caco-2细胞的紧密连接蛋白Occludin表达无影响。结论:体外Caco-2细胞试验表明,三种常用的乳制品益生菌并未对肠道屏障功能产生不良影响,不存在潜在的安全性问题。
【关键词】:
【学位授予单位】:吉林大学【学位级别】:硕士【学位授予年份】:2012【分类号】:R151【目录】:
中文摘要4-6Abstract6-9第1章 绪论9-16 1.1 肠道微生态系统及益生菌概念的发展9-10 1.2 肠道上皮细胞的紧密连接10-11 1.3 益生菌的安全性问题11-14 1.4 研究目的及意义14-15 1.5 主要研究内容15-16第2章 三种常用乳制品益生菌的细胞毒性试验16-33 2.1 材料与方法16-22 2.2 结果22-30 2.3 讨论30-33第3章 三种常用乳制品益生菌对细胞因子分泌的影响33-41 3.1 材料与方法33-35 3.2 结果35-38 3.3 讨论38-41第4章 三种常用乳制品益生菌对 Caco-2 细胞单层模型紧密连接结构的影响41-49 4.1 材料与方法41-43 4.2 结果43-46 4.3 讨论46-49第5章 三种常用乳制品益生菌对Caco-2 细胞骨架β-微管蛋白的影响49-54 5.1 材料与方法49-51 5.2 结果51-52 5.3 讨论52-54第6章 三种常用乳制品益生菌对 Occludin 蛋白的影响54-60 6.1 材料与方法54-58 6.2 结果58 6.3 讨论58-60结论60-61参考文献61-72导师简介72-73作者简介及科研成果73-74致谢74
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益生菌有减肥的作用吗
肠道不好了,能吃些益生菌来调理啊?
人体的肠道中存有大量的细菌,并且有好坏之分,对身体有益的则称为益生菌,它能够在人体肠道内繁殖,具有调节人体肠道平衡的作用。益生菌的最大特点就在一个''活'' 字上。从饮用效果来说,普通乳酸菌要想到达肠胃产生良性作用,需要过五关斩六将,首先在销售过程中要保持存活,而且在饮用后还要抵抗胃液、胆汁的强酸性消化作用,所以存活率很低。"而国际营养学界普遍认可的定义是,益生菌是一种对人体有益的细菌,它们可直接作为食品添加剂服用,以维持肠道菌丛的平衡。市面上比较常见的是乳杆菌类和双歧杆菌类。虽然在国内起步较晚,但益生菌在世界范围早已是威名远扬。自上世纪90年代初以来,形形色色的"益生菌" 类保健品已风靡了不少国家,与"益生菌"相关的研究也成为国际上的热门研究课题。如妈咪爱的产品中就添加了益生菌。
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